Получение и биологические свойства бактериоциноподобных веществ, продуцируемых Bacillus circulans

• Автор: Калмантаев, Тимур Ахмерович
• Шифр специальности: 03.02.03, 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Оболенск
• Количество страниц: 112 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ
ОБОЗНАЧЕНИЙ, СИМВОЛОВ, ЕДИНИЦ И ТЕРМИНОВ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1Л. Антимикробные пептиды бактерий, основные свойства и классификация
1.2. Бактерии рода Bacillus - продуценты пептидов широкого спектра антимикробного действия
1.3. Методология получения бактериоцинов и бактериоцино-подобных соединений (БИС)
1.4. Примеры использования бактериоцинов и БПС
1.5. Заключение по обзору литературы
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Используемые штаммы бактерий
2.2. Питательные среды и условия культивирования
2.3. Накопление биомассы и концентрирование продукта
2.4. Микробиологические методы
2.5. Биохимические методы
2.6. Экспериментальные животные
2.7. Методика приготовления и нанесения антимикробных полимерных покрытий
2.8. Методы статистической обработки результатов
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА 3. ШТАММЫ В. CIRCULANS И ПРОДУКЦИЯ
АНТИМИКРОБНОЙ СУБСТАНЦИИ

3.1. Описание штаммов-продуцентов антимикробных субстанций
3.2. Определение факторов, влияющих на синтез бактерицидных веществ, режимы культивирования
3.2.1. Продукция бактериоциноподобных веществ в зависимости от источника азота
3.2.2. Продукция бактериоциноподобных веществ в зависимости от источника углерода
ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИЦИНА
В. СтСШАЖ
4.1. Питательная среда
4.2. Глубинное культивирование штамма-продуцента
4.3. Разделение культуральной жидкости
4.4. Сравнение и выбор способа выделения БПС
4.4.1. Метод высаливания неорганическими солями
4.4.2. Адсорбция-десорбция на твердом носителе
4.4.3. Фазовая сепарация органическим растворителем
4.5. Приготовление экспериментальных образцов БПС
4.6. Очистка и идентификация компонентов препарата
ГЛАВА 5. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА БАКТЕРИОЦИНА В. СтСШАЖ
5.1. Спектр антимикробного (деконтаминируюгцего) действия
5.2. Физико-химические свойства: термоустойчивость, pH зависимость, устойчивость к протеолизу, молекулярный вес
5.3. Оценка безвредности бактериоцина
ГЛАВА 6. ПРИМЕРЫ И РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПРАКТИЧЕСКОМУ
ПРИМЕНЕНИЮ БПС
6.1. Лечебная эффективность на бройлерной птице
6.2. Обеззараживание лабильных биоматериалов
6.3. Снижение контаминации вареных мясных колбас

ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ
ДИССЕРТАЦИИ
БЛАГОДАРНОСТИ

Таблица 1 - Практическая значимость полупродуктов в процессе полу-
чения бактериоцина и бактериоциноподобного соединения
Стадии процесса Наименование продукта Состав продукта Возможная область применения
Аппаратное культивирование продуцента (ферментеры) Культуральная жидкость (КЖ) Живые клетки, бак-териоцин/БПС, соли и метаболиты Как пробиотический комплекс для ветеринарии и в производстве ферментированных продуктов
Сепарирование (центрифуга, микрофильтрация) Бесклеточный ферментат Бактериоцин/БПС и метаболиты Как бактерицидная добавка в корм животным
Концентрирование (ультрафильтрация) Бесклеточный концентрат Концентрат неочищенного бактерио-цина/БПС с метаболитами Как концентрат бактерицидной добавки в корм животным
Частичная очистка (методы преципитации, фазовой сепарации, сорбции) Грубый концентрат бактериоци-на/БПС Концентрат грубого бактериоцина/БПС с примесью пептидов Как грубый концентрат бактериоцина - компонент корма, деконтами-нирующего препарата
Глубокая очистка (методы хроматографии) Очищенный бак-териоцин/БПС Чистый (>95%) бактериоцин/БПС Медицина для системного применения
1.5. Заключение по обзору литературы
Возрастание интереса к бактериоцинам микроорганизмов подкрепляется ростом числа публикаций по вопросам выделения все новых продуцентов этих веществ, разнообразия вновь выделенных антимикробных пептидов, расшифровки их химического состава и уточнению механизма биосинтеза. Наряду с действующей классификацией бактериоцинов лактобактерий недавно предложена классификация антимикробных пептидов, продуцируемых представителями рода Bacillus. Эти бактериоцины и БПС отличаются активностью против грамотрицательных патогенов и характеризуются устойчивостью к действию протеаз, высоких температур и экстремальных значений pH. Вместе с тем арсенал реально используемых сегодня в практической работе бактериоцинов, а это преимущественно низин и педиоцин, крайне недостаточен для решения задач борьбы с бактериальными патогенами и бактериями, вызывающими порчу продовольствия в среде обитания человека.