Новая система доставки биологически активных веществ на основе олигоэфирполиола

• Автор: Иксанова, Альфия Габдулахатовна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 134 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Плазматические мембраны клеток как барьер для 13 транспорта лекарственных соединений
1.2 Множественная лекарственная устойчивость
1.3 Лекарственные формы и системы доставки лекарств
1.3.1 Полимерные системы доставки лекарственных средств
1.3.2 Общая характеристика класса амфифильных блоксополимеров
1.3.2.1 Применение амфифильных полимеров в качестве 31 ингибиторов обратных транспортеров опухолевых клеток
1.3.3 Плуроники как пример полимерной системы доставки лекарств
1.3.3.1 Влияние Плуроников на биологические мембраны 35 опухолевых клеток
1.3.3.2 Влияние Плуроников на цитотоксичность 40 противоопухолевых препаратов в МЛУ-клетках
1.3.3.3 Влияние Плуроников на ГЭБ
1.3.3.4 Клинические испытания препарата SP1049C, содержащего в 42 своем составе доксорубицин и Плуроники
1.3.3.5 Токсичность Плуроников
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1 Реактивы и оборудование
2.2 Объекты исследований
2.2.1 Объекты исследования in vitro
2.2.2 Объекты исследования in vivo
2.3 Цитотоксичность и транспортные свойства носителей БАВ
2.3.1 Исследование цитотоксичности полимеров ПЭ-240, Плуроников

L-61 и F
2.3.2 Методика определения транспортных свойств носителей БАВ
2.3.2.1 Определение цитотоксичности противоопухолевого препарата Ara-С в присутствии полимеров
2.3.2.2 Методика определения внутриклеточного накопления родамина 6Ж и доксорубицина клетками HeLa
2.3.2.3 Методика исследования влияния олигоэфирполиола на транспорт флуорофоров в клетки HeLa и MCF-7 in situ
2.3.2.4 Методика определения ДНК-повреждающей активности доксорубицина гидрохлорида по отношению к опухолевым клеткам линии HeLa в тесте «Comet assay»
2.4 Исследование механизма действия ПЭ-240 на транспортные системы опухолевых клеток
2.4.1 Методика определения микровязкости плазматических мембран клеток HeLa и MCF
2.4.2 Методика определения влияния полимеров на систему обратных переносчиков опухолевых клеток HeLa и MCF
2.4.3 Методика определения P-gp и MRP-7 зависимой АТФ-азной активности
2.4.4 Методика определения уровня АТФ в клетках MCF-7 и СаСо-2 PC и М
2.5 Токсичность и фармакологическая активность ПЭ-240 в экспериментах in vivo
2.5.1 Методика определения подострой токсичности ПЭ-240 на мышах
2.5.2 Гистологические исследования
2.5.3 Методика определения влияния ПЭ-240 на систему Р450 печени мышей
2.5.3.1 Выделение микросом печени мышей
2.5.3.2 Определение концентрации белка и цитохромов Р450

2.5.3.3 Определение скорости С-гидроксилирования эритромицина микросомами печени мышей
2.5.4 Методика определения проницаемости клеток головного мозга мышей
2.5.4.1 Выделение клеток головного мозга
2.5.4.2 Определение проницаемости мембран клеток головного мозга
2.5.4.3 Методика определения ДНК-повреждающей активности по отношению к клеткам головного мозга мышей
2.5.5 Методика изучения противовоспалительной активности комплексов субстанций полиэфира ПЭ-240 и НПВС при трансдермальном введении
2.6 Статистический анализ
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 Цитотоксичность и транспортные свойства носителей БАВ
3.1.1 Цитотоксичность полимеров ПЭ-240, Плуроников L-61, F
3.2 Транспортные свойства носителей БАВ
3.2.1 Влияние олигоэфирполиола на цитотоксичность противоопухолевого препарата Ara-С в сопоставлении с Плурониками L-61 и F
3.2.2 Накопление родамина 6Ж и доксорубицина клетками Не La в присутствии олигоэфирполиола
3.2.3 Влияние полимеров на ДНК-повреждающую активность доксорубицина гидрохлорида по отношению к опухолевым клеткам линии Не La в тесте «Comet assay»
3.3 Исследование механизма действия ПЭ-240 на транспортные системы опухолевых клеток
3.3.1 Микровязкость плазматических мембран клеток HeLa и MCF-7 в присутствии олигоэфирполиола
3.3.2 Влияние полимеров на систему обратных переносчиков

1.3.3.1 Влияние Плуроников на биологические мембраны опухолевых
клеток
Полимеры, используемые для доставки лекарств, долгое время считались биологически инертными компонентами, которые имеют только неоспоримые преимущества в отношении J1C: капсулирование J1C, защищающее их от деградации; пролонгированность действия; активация транспорта ЛС в клетки. Однако, в настоящее время эта система оптимистичных взглядов претерпевает значительные изменения вследствие накопления все большего количества фактов, указывающих на то, что синтетические полимеры могут радикально изменять специфические клеточные ответы (Kabanov et а/., 2005а; Kabanov et al., 20056; Kabanov, 2006; Batrakova, 1998; Rapoport, 2002). Показано, что кроме способности к самоорганизации в мицеллы, Плуроники являются мощными модификаторами биологических ответов, способными повышать чувствительность устойчивых к лекарствам опухолевых клеток (МЛУ) и увеличивать транспорт лекарств через клеточные барьеры, такие как поляризованные кишечные эпителиальные клетки, эндотелий мозга (Kabanov et al., 2002а; Kabanov et al, 20026).
Сложные механизмы действия Плуроников в МЛУ-клетках являются предметом тщательного изучения. Схематично это можно представить следующим образом (рис.4.):