Мембранотропные свойства водорастворимых полизамещенных производных фуллеренов

• Автор: Полетаева, Дарья Александровна
• Шифр специальности: 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 128 с.

Содержание
Содержание
СПИСОК С0КРАЩЕЬШЙ
Введение
Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1.1 Фуллерены и их производные
фуллереновЧ6СКаЯ аКТИВН0СТЬ в°Д°РаствоРимых производных
Е2.1 .Противовирусная активность
1-2.2. Противоопухолевые свойства
1.2.3.Фуллерены как фотосенсибилизаторы для фотодинамической тсрз.пии
1.2.4. Нейропротекторные свойства
1.2.5. Токсичность
1.3 Мембранотропные свойства производных фуллеренов
1.3.2. Взаимодействие водорастворимых производных фуллеренов
с мембраносвязанными ферментами
1.3.3. Антиоксидантные свойства производных фуллеренов
Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ фуллеренов
2.1. МАТЕРИАЛЫ

2.1.1. Приборы и аппаратура ~
2.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
?'?'!' Приготовление суспензии фосфатидилхолиновых липосом
1.1.1. Регистрация диффузионных взаимодействий в водных
растворах и в структуре липосом с помощью метода триплетных зондов
2.2.3. Исследование мембранотропности ППФ по регистрации тушения флуоресценции люминесцентных зондов
2.2.4. Выделение митохондрий из головного мозга крыс""””!!!”'"
2.2.5. Определение концентрации белка по методу Лоури
2.2.6. Определение антиоксидантной активности ППФ методом ' хемилюминесценции
2.2.8. Определение каталитической активности цитохром с-
оксидазы в митохондриях головного мозга крыс
Определение каталитической активности цитохром с-оксидазы "'44
2.2.9. Статистическая обработка результатов
лава 3. Исследование мембранотропных свойств полизамещенных
производных фуллеренов методами флуоресцентных и фосфоресцентных зондов
3.1. Особенности структуры полизамещенных производных фумёренов и механизмы их взаимодействия с мембранами.!

3.2. Механизмы тушения флуоресценции и фосфоресценции люминофоров в растворах
3.3. Исследование мембранотропности полизамещенных производных фуллеренов методом триплетных ЗОНДОВ
3.3.1. Регистрация методом триплетных зондов диффузионных взаимодействий в водных растворах
3.3.2. Исследование диффузионных взаимодействий полизамещенных производных фуллеренов и триплетных зондов в структуре липосом
3.3.3. Исследование мембранотропности ППФ методами триплетных ЗОНДОВ
3.4. Исследование мембранотропности ППФ по регистрации тушения флуоресценции водорастворимых зондов
3.4.1. Оценка мембранотропности ППФ по регистрации тушения
флуоресценции гидрофобного зонда пирена
Глава 4. Исследование антирадикальной активности водорастворимых
полизамещенных производных фуллеренов
Глава 5. Влияние водорастворимых производных фуллеренов на
каталитическую активность мембраносвязанных ферментов
моноаминооксидазы А и моноаминооксидазы В
Глава 6. Изменение каталитической активности цитохром с-оксидазы под "
влиянием водорастворимых полизамещенных производных фуллеренов
. Анализ влияния электростатических зарядов цитохрома с на
эффективность реакций с его участием
6.2. Исследование влияния водорастворимых полизамещенных производных фуллеренов на реакцию переноса электрона между цитохромом с и цитохром с оксидазой 1 по
выводы
Приложение
Литература

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АПФ - аминокислотные производные фуллерена С60;
АТФ - аденозинтрифосфат;
АФК - активные формы кислорода;
АХ - ацетилхолин;
БА - болезнь Альцгеймера;
БП - болезнь Паркинсона;
ВИЧ - вирус иммунодефицита человека;
ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения;
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота;
ДПХФ - дипальмитоилфосфатидилхолин;
ИПХФ РАН - институт проблем химической физики РАН;
КЦФФ - карбонилцианид-р-трифлуорометоксифенилгидразон;
МАО-А и МАО-В - моноаминооксидаза А и В;
НАДН - восстановленный никотинамидадениндинуклеотид; ПВП - поливинилпирролидон;
ПМР - парамагнитный резонанс;
ПОЛ - пероксидное окисление липидов;
ППФ - полизамещенные производные фуллеренов;
РНК - рибонуклеиновая кислота;
СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита;
СР - саркоплазматический ретикулум;
ТБГП - трет-бутил-гидропероксид;
ФДТ - фотодинамическая терапия;
ЦНС - центральная нервная система.

2.1.1. Приборы и аппаратура
В работе использовали ультразвуковой дезинтегратор (УЗДН-1 У4.2), спектрофлуориметр Сагу-Ес! ірве, гомогенизатор Поттера, центрифуги К-23 и К-24, колонку для гель-фильтрационной хроматографии, спектрофотометр «Зресогй М-40», ротационный испаритель Неісіоіріг ЬАВСЖОТА 4000 еґІїсієЩ/НВ/Пб.
2.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.2.1. Приготовление суспензии фосфатидилхолиновых липосом
Готовили исходный раствор фосфатидилхолина (Пика) в этаноле, концентрация фосфолипида составляла 40 мг/мл. 5 мл раствора помещали в круглодонную колбу, спиртовую фазу удаляли с помощью вакуумного роторного испарителя (давление 150 мбар, 270 вращений в минуту). Получали молочно-белую фосфолипидную пленку на внутренней поверхности колбы, которую затем переносили в буфер трис-НС1 (pH = 7.2 0.02М), путем встряхиваний в течение 10-20 минут при комнатной температуре, конечный объем суспензии составлял 5 мл. Молочно-белую суспензию держали при комнатной температуре под аргоном для предотвращения денатурации фосфолипидных везикул. Затем суспензию подвергали ультразвуковой обработке на дезинтеграторе УЗДН-1 У4.2 в течение 10 минут, в атмосфере аргона, при температуре 4°С. Перед работой суспензию разбавляли в 100 раз буфером трис-НС1 (pH = 7.2 0.02М) и хранили под аргоном при 4°С не более суток [124]. Для введения в фосфатидилхолиновые липосомы молекул красителей фосфолипидную пленку переносили в водный раствор буфера трис-НС1 (pH - 7.2 0.02М), содержащий для разных экспериментов: 2-Ю'6 М эозина У, 2-Ю'6 М метилированного эозина (эозина М), 106 М 2.7-дибромпрофлавина, 105 М рибофлавина и 10'5Мпирена.