Радиационно-индуцированный "эффект свидетеля" в совместной культуре лимфоцитов разнополых доноров

• Автор: Колесникова, Ирина Станиславовна
• Шифр специальности: 03.01.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 150 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1.0Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Особенности биологического действия ионизирующего излучения в малых

дозах
1.2. Радиационно-индуцированный эффект свидетеля
1.2.1. Ранние исследования опосредованных (дистанционных) эффектов

ионизирующей радиации
1.2.2. Современные представления о возможных механизмах ЗС

1.2.2.1. Оксидативный стресс при РИЭС

1.2.2.2. Межклеточная сигнализация при РИЭС
1.2.2.2. Внутриклеточные молекулярные сигнальные процессы в клетках-

свидетелях

1.2.2.4. Репаративные процессы при РИЭС
[ РИЭС
1 2.2.5. Эпигенетические изменения и биоэлектрические процессы при
1.2.3. Методы исследования РИЭС

1.2.4. Критерии оценки РИЭС

1.3. Радиационно-индуцированныи адаптивный ответ
1.3.1. Возможные механизмы РИАО
1.3.1.1. Индукция систем антиоксидантной защиты при РИАО
1.3.1.2. Индукция систем репарации ДНК при РИАО
1.3.1.3. Другие внутриклеточные молекулярные процессы при РИАО
1.3.1.4. Изменения клеточного цикла и возможные популяционные механизмы

РИАО

1.3.1.5. Перестройка хроматина при РИАО
1.4. Радиационно-индуцированная нестабильность генома
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
2.1. Характеристика материала

2.2. Схемы экспериментов
2.2.1. Исследование РИЭС по критерию АО при временной схеме адаптирующего и
повреждающего облучений

2.2.2. Исследование РИЭС по критерию АО при временной схеме адаптирующего и повреждающего облучений
2.2.3. Сопоставление количества индуцированных в лимфоцитах ХА в моно
совместных культурах при временной схеме облучения в,-И,
2.2.4. Исследование взаимного влияния необлучённых и облучённых в дозе 1 Гр
лимфоцитов на частоту ХА в них

2.3. Облучение лимфоцитов
2.4. Культивирование лимфоцитов крови и приготовление метафазных

препаратов

2.5. Микроскопический анализ препаратов
2.6. Статистическая обработка результатов
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Влияние облучения в дозе 0.05 Гр на развитие адаптивного ответа в облучённых (ПАО) и необлучённых (ОАО) лимфоцитах при совместном
культивировании
3.1.1. Временная схема адаптирующего и повреждающего облучений С0-С,
3.1.2. Временная схема адаптирующего и повреждающего облучении С,-С,
3 1 3. Общий статистический анализ данных по всем донорам при обеих временных

схемах адаптирующего и повреждающего облучении
3.1.4. Выраженность ПАО и ОАО у доноров при различных временных схемах

облучений
3.2. Сопоставление результатов облучения моно- и совместных культур при одинаковой схеме адаптирующего и повреждающего облучений (СГС,)
3.3. Влияние облучения лимфоцитов в дозе 1 Гр на частоту ХА в необлучённых
лимфоцитах при их совместном культивировании
3 4 Влияние необлучённых лимфоцитов на частоту ХА в лимфоцитах, облучённых в

дозе 1 Гр, при их совместном культивировании
4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Список сокращений

ИР - ионизирующая радиация
РИЭС - радиационно-индуцированный «эффект свидетеля»
РИАО - радиационно-индуцированный адаптивный ответ
РИНГ - радиационно-индуцированная нестабильность генома
РУ- радиоустойчивость
ПАО - прямой адаптивный ответ
ОАО - опосредованный адаптивный ответ
АК - аберрантные клетки
ХА - хромосомные аберрации
вкДНК - внеклеточная ДНК
РКВ - реакционно-способные кислородсодержащие вещества

исследованиях используют один из двух способов воздействия ИР. Первый предполагает внешнее облучение клеток (Zhumiel I. et al., 1971), второй -внутреннее облучение с использованием радиоактивных изотопов, в частности, трития (Н3) в виде Н3-тимидина, которые включаются в ДНК клетки при их культивировании (Pinto М. et al., 2006). В некоторых
123т 131т
исследованиях в качестве радиоактивного изотопа использовался i, 1, 2UAt в виде соответствующих мета-бензилгуанидинов (Boyd М. et al., 2006).
Существуют также работы по исследованию РИЭС, в которых осуществлялось внутреннее облучение клеток путём включения в них трития в виде Н3-тимидина (Bishayee A. et al., 2001) или 1251 в виде 5[1231]йодо-2’-дезоксиуридина (Xue L.Y. et al, 2002) и затем смешивание их с необлучёнными клетками. При этом предполагалось, что излучаемые радиоактивными изотопами ионизирующие частицы имеют длину пробега, не превышающую размеры клетки, и следовательно не покидают её пределы.
Имеется ряд работ, в которых исследовали РИЭС, добавляя плазму крови облучённых доноров в культуры необлучённых клеток. В работе (Littlefield L.G. et al., 1969) индуцировали РИЭС (хроматидные разрывы) путём внесения в культуры нормальных необлучённых лейкоцитов человека плазму крови онкопациентов, облучавшихся локально в общей дозе порядка 70 Гр в связи с радиотерапией. В исследовании (Морозик П.М. и др., 2011) наблюдали РИЭС (повышенное количество микроядер) после добавления в культуру человеческих кератиноцитов сыворотки крови людей,