Усовершенствование селекционного процесса льна-долгунца (Linum usitatissimum) на основе использования биотехнологических методов

• Автор: Поляков, Алексей Васильевич
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Торжок
• Количество страниц: 301 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Перечень сокращений
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. УСЛОВИЯ, ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА
ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ
Глава 2. СОЗДАНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ ЛЬНА
2.1. Создание генетического разнообразия льна тради-
ционными методами
2.2. Клональная изменчивость льна в культуре ткани
2.2.1. Сомаклонапьная изменчивость
2.2.2. Гаметоклональная изменчивость >37
2.3. Увеличение генетического разнообразия льна-долгунца путем использования нежизнеспособных зародышей самоопыленных генотипов и внутривидовых гибридов
2.3.1. Образование недоразвитых зародышей при внутривидовой гибридизации льна-долгунца
2.3.2. Культура недоразвитых зародышей льна-долгунца
2.3.3. Характеристика регенерантов, полученных на основе недоразвитых зародышей льна-долгунца
2.4. Создание генетического разнообразия при межвидовой гибридизации льна
2.5. Генетическая трансформация
2.5.1. Генетическая трансформация растений с использованием АдгоЬаШепит ШтеТааепв
2.5.2. Генетическая трансформация льна
2.5.3. Трансформация льна-долгунца с помощью АдгоЬаШепит Шгтааепэ на примере введения гена МРТ-Н
2.5.4. Оценка трансгенных форм льна в культуре ткани
на устойчивость к канамицину
-3
2.5.5. Оценка трансгенных форм льна на устойчивость к
канамицину при проращивании семян
Выводы
Глава 3. ГЕНЕТИЧЕСКАЯ СТАБИЛИЗАЦИЯ. ПОЛУЧЕНИЕ
ГАПЛОИДОВ ЛЬНА
3.1. Отбор
3.2. Г аплоидия
3.2.1. Получение апомиктичных гаплоидов льна
3.2.2. Использование полиэмбрионии для получения
гаплоидов льна
3.2.3. Диплоидизация гаплоидов льна
3.2.4. Генетическая стабилизация признаков при
использовании близнецовых гаплоидов
3.3. Культура пыльников
3.3.1. Влияние условий выращивания донорных растений
на каллусогенез пыльников льна
3.3.2. Влияние стадии развития пыльцы
3.3.3. Индуцирование каллусо- и органогенеза у исходных
эксплантов
3.3.4. Каллусогенез у льна-долгунца разных генотипов
3.3.5. Регенерация почек и побегов из пыльцевого каллуса
3.3.6. Получение регенерантов льна в культуре пыльников
3.4. Получение гаплоидов методом “дгапсПАогит”
Выводы
Глава 4. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ГЕНОТИПОВ
4.1. Идентификация генотипов по белкам семян
4.1.1. Идентификация генотипов льна по белкам семян
4.2. Использование маркерных признаков
4.3. Отбор клеток растений по требуемым признакам
4.3.1. Отбор клеток льна по требуемым признакам 1§?

4.4. Оценка льна на устойчивость к гербицидам
4.5. Оценка на устойчивость к фузариозу (Fusarium oxysporum f. sp. Uni) Iff
4.6. Оценка на устойчивость к антракнозу (Colletotrichum
lini Mannas et Bolley)
4.7. Оценка на устойчивость к алюминию
4.5. Идентификация гаплоидов
Выводы
Глава 5. РАЗМНОЖЕНИЕ ЛЬНА-ДОЛГУНЦА IN VITRO.
ПОЛУЧЕНИЕ РЕГЕНЕРАНТОВ 19©
5.1. Традиционные способы размножения 19©
5.2. Размножение растений методами in vitro
5.2.1. Размножение льна in vitro при использовании
верхушечных почек
5.2.2. Размножение льна in vitro при использовании гипокотильных сегментов
5.2.3. Размножение льна при использовании культуры зародышей
Выводы
Глава 6. ВЫЯВЛЕНИЕ КОНКУРЕНТОСПОСОБНЫХ ГЕНОТИПОВ. ХАРАКТЕРИСТИКА СЕЛЕКЦИОННОГО МАТЕРИАЛА ЛЬНА-ДОЛГУНЦА, СОЗДАННОГО МЕТОДАМИ БИОТЕХНОЛОГИИ
6.1 Характеристика дигаплоидов, полученных близнецовым методом
6.2. Эффективность получения ценного селекционного материала в культуре пыльников
6.3. Характеристика линии, полученной при опылении
льна L. usitatissimum пыльцой L. grandiflorum
6.4. Получение ценного селекционного материала на основе незрелых зародышей при внутривидовой

являются миксоплоидами, а корень, стебель и листья состоят из диплоидных клеток. Однако старые листья пятинедельных растений имеют пониженное содержание ДНК. Аналогичное явление наблюдалось у всех изученных сортов (табл. 4).
Таблица
Уровень плоидности клеток тканей близнецовых проростков при культивировании in vitro в течение 1 месяца. Совместный эксперимент с ИНВ (Польша). 1996 г.
Уровень плоидности близнецов Исходный эксплант Изучено эксплан ТОВ.ШТ ' Уровень плоидности клеток
2п 4п 2п+4п
абс. % абс. % абс. %
1п корень 10 6 - 3 - 1
гипокотиль 10 6 - 4 - 0
семядоли 16 12 - 4 - 0
сумма, % 36 24 66,6 11 30,5 1 2
2п корень 9 3 - 6 - 0
гипокотиль 9 3 - 6 - 0
семядоли 15 3 - 11 - 1
сумма, % 33 9 27,0 23 70,0 1 3
Известно, что генетическая стабильность клеток каллуса, как правило, невысокая. Многочисленные авторы на многих субкультурах наблюдали возрастающие отклонения в числе хромосом. Генетически идентичное воспроизведение генотипов через дифференциацию в культуре каллуса можно осуществить только у некоторых видов и при определенных условиях, например, при использовании первичного каллуса, при малых субкультурах и по возможности при соматическом эмбриогенезе. Но для селекции большую ценность могут предстовлять так же регенераты, полученные из каллусных тканей или суспензионных каллусных клеток, в которых возникновение стеблевых меристем индуцируется заново, что обеспечивает увеличение генетической изменчивости (Лейке Г. и др., 1980; Бутенко Р.Г., Хромова Л.М., Седнина Г.А., 1983).