Электронно-микроскопическое изучение характера кристаллизации при замораживании водных растворов криопротекторов и некоторых клеток

• Автор: Репин, Николай Васильевич
• Шифр специальности: 03.00.22
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Харьков
• Количество страниц: 199 c. : ил

-2.
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА I. РОЛЬ ЛЬДООБРАЗОВАНИЯ В КРИОПОВРЕШДЕНИИ КЛЕТОК. ХО
1.1. Некоторые методические подходы при замораживании биологических объектов
ГЛАВА II. ХАРАКТЕР КРИСТАЛЛИЗАЦИИ В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ
КРИОПРОТЕКТОРОВ
ГЛАВА III. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Глава IV. РАЗРАБОТКА АППАРАТУРНОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ МЕТОДА
ЗАМОРАЖИВАНИЯ-СКАЛЫВАНИЯ
Глава V. КРИСТАЛЛИЗАЦИЯ ВОДНЫХ РАСТВОРОВ ГЛИЦЕРИНА И
ПЭ0-1500 ПРИ РАЗЛИЧНЫХ УСЛОВИЯХ ОХЛАЖДЕНИЯ
УЛ. Характер кристаллизации водно-глицериновых
растворов
У.2. Изучение характера кристаллизации ПЭ0-1500
Глава V1. ВЛИЯНИЕ РЕЖИМОВ ЗАМОРАЖИВАНИЯ НА ХАРАКТЕР
КРИСТАЛЛИЗАЦИИ ВЗВЕСИ ЭРИТРОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА
У1.1. Изучение вне- и внутриклеточной кристаллизации в суспензии эритроцитов человека при различных условиях охлаждения в присутствии глицерина
У1.2. Влияние ПЭ0-1500 на характер кристаллизации в суспензии эритроцитов при различных условиях
охлаждения
Глава VП, РЕКРИСТАЛЛИЗАЦИЯ ВНЕ- И ВНУТРИКЛЕТОЧНОГО ЛЬДА И ОБЕЗВОЖИВАНИЯ КЛЕТОК НА ЭТАПЕ ТЕМПЕРАТУРНОЙ

ОСТАНОВКИ ПРИ ДВУХСТУПЕНЧАТОМ ЗАМОРАЖИВАНИИ
УПД. Двухступенчатое замораживание эритроцитов
УП.2. Двухступенчатое замораживание ядросодержащих
клеток крови
УП.З. Двухступенчатое замораживание клеток культуры ткани
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

К настоящему времени в криобиологии накопилось значительное число гипотез, объясняющих механизмы криоповреждения биологических объектов [2,116,148,161] . Все авторы единодушны в том, что образующиеся при замораживании кристаллы льда могут вызвать повреждение как непосредственно, механически действуя на биологические структуры, так и опосредованно, в результате увеличения концентрации электролитов, обезвоживания клеток и других явлений, вызываемых кристаллообразованием.
Однако ни одна из этих гипотез не смогла охватить всего многообразия процессов, протекающих в живых объектах при действии отрицательных температур. Более того, наличие целого ряда противоречивых данных, полученных при изучении сходных процессов, но для разных биологических структур, указанывает на необходимость индивидуального подхода к изучению биологических объектов.
О роли льдообразования в повреждении биологических структур высказывалось много точек зрения [64,106,117,132,172]
Тем не менее конкретные механизмы взаимодействия кристаллов льда с клетками на этапах замораживания-отогрева не нашли удовлетворительного объяснения в литературе.
Основная повреждающая роль при быстром замораживании биообъектов отводится обычно кристаллам внутриклеточного льда

Д1 в) *>>

Рис.1. Последовательность операций метода замораживания-скалывания:
А - криофиксация ; Б,В - этап скалывания ; Г - травление ; Д - получение реплики;
Е - очистка от биологических остатков.