Тест-система для диагностики трихинеллеза свиней иммуноферментной реакцией с антигеном, очищенным моноклональными антителами

• Автор: Козлова, Галина Александровна
• Шифр специальности: 03.00.19
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 124 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Антигены в диагностике трихинеллеза
2.2. Методы иммунологической диагностики трихинеллеза
2.3. Внутрикожная аллергическая проба
2.4. Реакция кольцепреципитации
2.5. Реакции агглютинации
2.6. Реакция непрямой гемагглютинации
2.7. Реакция латекс-агглютинации
2.8. Реакция связывания комплемента
2.9. Реакции иммунофлуоресценции
2.10. Иммуноферментная реакция (ИФА)
3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Материалы и методы
3.1.1. Культивирование гибридом
3.1.2. Криоконсервирование клеток
3.1.3. Восстановление клеточной культуры после хранения в глубокозамороженном состоянии
3.1.4. Определение качества клеточных линий
3.1.5. Спектрофотометрическое определение концентрации белков
3.1.6. Приготовление антигенов из личинок трихинелл
3.1.6.1. Получение культуры личинок трихинелл
3.1.6.2. Приготовление цельного экстракта личинок трихинелл
3.1.6.3. Фракционирование экстракта личинок Т.spiralis
3.1.6.4. Очистка антигена с помощью моноклональных антител
3.1.7. Отработка технологических условий создания тест-системы

3.2. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.2.1. Влияние криоконсервирования на биологическую активность
клеточной культуры
3.2.2. Технологические параметры тест-системы
3.2.3. Изучение сравнительной диагностической эффективности антигенов в иммуноферментной реакции
3.2.4. Динамика иммунного ответа при экспериментальном заражении свиней личинками Т.вригаНз
3.2.5. Динамика выделения антител при экспериментальном заражении свиней личинками Т.рзеибозрДаИз
4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
5. ВЫВОДЫ
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
8. ПРИЛОЖЕНИЯ

1. ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы.
Широкое распространение ряда опасных гельминтозоонозов, таких как трихинеллез, эхинококкозы, цистицеркозы и др. свидетельствуют о недостаточно высоком уровне ветеринарно-санитарных мероприятий при этих заболеваниях и необходимости разработки и внедрения средств и методов борьбы, обеспечивающих их надежную профилактику и, соответственно, защиту населения в отношении этих инвазий.
Данная проблема становится особенно значимой в условиях современной реорганизации сельскохозяйственного производства, формирования животноводческих хозяйств различных форм собственности, с широким спектром технологии выращивания животных и слабой кормовой базой.
На этом фоне, особенно последние годы, четко просматривается тенденция в увеличении экстенсинвазированности сельскохозяйственных животных, в частности, свиней трихинеллезом, и соответственно уровень заражения этим гельминтозом населения.
Комплекс противотрихинеллезных мероприятий широко применявшихся в предыдущие годы, как правило, базировался на решении ветеринарных и медико-санитарных вопросов - трихинеллоскопическом контроле туш и мясопродуктов, дератизации, наведении санитарного порядка на территориях ферм и населенных пунктов, борьбе с бродячими животными.
Анализ современной эпизоотической и эпидемической ситуаций по трихинеллезу и перспектив развития агропромышленного комплекса в России свидетельствуют о необходимости коррекции системы мер борьбы с трихинеллезом и интеграции в нее новых приоритетных направлений.
Фото 1. Культура гибридных клетоу 4G4 in vitro (x 260).
Фото 2. Культура гибридных клеток 4G4 in vivo.