Электрогенная аденозинтрифосфатаза и трансгидрогеназа клеток Escherichia coli

• Автор: Четкаускайте, Анольда Витаутовна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Вильнюс
• Количество страниц: 166 c. : ил

Глава І
Глава
Глава

Глава
4 4 4 4

Глава

. ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ . ХЕМИОСМОТИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОГО СОПРЯЖЕНИЯ
И ДЫХАТЕЛЬНАЯ ЦЕПЬ МИКРООРГАНИЗМОВ
. ТРАНСГИДРОГЕНАЗА НИКОТИНАМИДНЫХ КОФЕРМЕНТОВ В МИКРООРГАНИЗМАХ И МИТОХОНДРИЯХ
.1. Общие свойства энергозависимой трансгидрогеназы
прокариотов и эукариотов
.2. Растворимость и стереоспецифичность трансгидрогеназ различных источников
.3. Выделение и структурные характеристики трансгидрогеназы митб^бндрий и E. coli
.4. Субстратная специфичность, проблема локализации и
функций трансгидрогеназы
.5. Кинетика трансгидрогенаяной реакции
.6. Энергообеспечение трансгидрогеназной реакции
.7. Механизм функционирования трансгидрогеназы
. МЕМБРАННАЯ АДЕНОЗИНТРИФОСФАТАЗА БАКТЕРИЙ
.1. Выделение и свойства бактерий
.2. Субъединичный состав Fx
.3. Выделение субъединиц F-^ и его реконструкция
.4. Очистка и свойства комплекса fq-f1
.5. Характеристики мутантов E. coli , дефектных по
Н+-АТФазе
.6. Механизм функционирования Н+-АТФазы
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ . МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

5.1. Культивирование бактерий
5.1.1. Микроорганизмы
5.1.2. Среды и условия культивирования микроорганизмов
5.2. Выделение ультразвуковых везикул цитоплазматической мембраны
5.3. Выделение аналитических количеств
5.4. Реконструкция генераторов мембранного потенциала
в ультразвуковых везикулах мембран E.coli
5.5. Выделение препаративных количеств F^
5.6. Выделение субъединиц ос и /3
5.7. Анализ препаратов Fx методом электрофореза в полиакриламидном геле
5.7.1. Аналитический гель-электрофорез
5.7.2. Гель-электрофорез в присутствии додецилсульфата натрия
5.8. Анализ субъединиц ос и ^ методом изофокусирова-ния
5.9. Регистрация скорости гидролиза АТФ
5.10. Определение мембранного потенциала методом проникающих анионов
5.11. Регистрация флуоресценции AHC“
5.12. Определение белка мембран методом Лоури
5.13. Определение белка спектрофотометрическим методом 78 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ
ОБСУЖДЕНИЕ
Глава 6. ТРАНСФОРМАЦИЯ ХИМИЧЕСКОЙ ЭНЕРГИИ В ЭЛЕКТРИЧЕСКУЮ В ТРАНСГИДР0ГЕНАЗН0М ЗВЕНЕ ДЫХАТЕЛЬНОЙ ЦЕПИ Escherichia coli
Глава 7. РЕКОНСТРУКЦИЯ АТФ-ЗАВИСИМ0Г0 ГЕНЕРАТОРА МЕМБРАННОГО

ПОТЕНЦИАЛА В МУТАНТАХ Е. coli С ИНАКТИВИРОВАННОЙ АТФазой
7.1. Выделение и очистка Р1
7.2. Генерация мембранного потенциала в вывернутых везикулах клеток с активной и инактивированной АТФазой
7.3. Реконструкция АТФ-зависимого генератора мембранного потенциала
Глава 8. ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИРОДЫ ИНАКТИВАЦИИ Р]_ У МУТАНТА Escherichia coli С ПОВРЕЖДЕННОЙ АТФазой
8.1. Выделение препаративных количеств
8.2. Выделение и физико-химические свойства ос и р субъединиц Ех
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Таблица 6. Характеристики мутаций различных unc генов Escherichia coli KI2
/55,66.67,68,79.95.201.202/.
Щутантные аллелы Е. ooli К
АТФазная
активность
АТФ зависимые реакции
Чувствительность к ДЩ
Реконструкция Доврежден-активным р,. ный компо-после удаления нент поврежденного Н+-АТФазы.
unc А401, шхо А447, unc А453
«•субъединица
unc А450
асубъединица
unc В402
uno С424
(в цитоплазме) +
(в мембране)

(в цитоплазме)
н.о.
„субъедианица
unc D405, unc D406 unc D409, unc D427 unc D412
йсубъединица