Простаноиды и опиоиды в регуляции функций клеточных систем

• Автор: Сергеева, Марина Глебовна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 245 с. : ил.

МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ им. М.В.ЛОМОНОСОВА
На правах рукописи
СЕРГЕЕВА МАРИНА ГЛЕБОВНА
ПРОСТАНОИДЫ И ОПИОИДЫ В РЕГУЛЯЦИИ ФУНКЦИЙ КЛЕТОЧНЫХ СИСТЕМ
03.00.04 - биохимия
диссертация на соискание ученой степени доктора химических наук
Москва-1998
ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений
Введение
Глава 1. Методы и методики исследования
1.1. Использованные методики
1.1.1. Реактивы и препараты
1Л.2. Среды и растворы
1Л.З. Буферы для выделения PGH-синтазы и определение активности
фермента
L1.4. Радиорецепторный анализ
1Л.5. Клеточные культуры
1Л.6. Насыщение перитонеальных макрофагов меченой арахидоновой
кислотой
1Л.7. Метод гомогенного сцинтилляционного счета
1Л.8. Подсчет клеток и оценка их жизнеспособности
1Л.9. Выделение препарата микросом из перитонеальных макрофагов
1ЛЛ0. Полярографическое определение PGH-синтазной активности
1.1.11. Спектрофотометрическое определение PGH-синтазной активности
1.1.12. Определение белка в анализируемых пробах
1.1.13. Определение простаноидов, синтезируемых клетками
1.1.14. Биосинтез простагландинов препаратами микросом
1.1.15. Оценка пролиферативной активности клеток
1.2. Метод оценки общей активности иммунной системы in vitro по реакции митоген-стимулированной пролиферации
1.2.1. Пролиферация лимфоцитов в ходе иммунного ответа
1.2.2. Оптимизация метода митоген-стимулированной пролиферации
лимфоцитов
1.2.3. Определение уровня пролиферативной активности лимфоидных
клеток в модельной системе
1.3. Развитие метода ВЭЖХ анализа простаноидов

1.3.1. Методы определения простаноидов в биологических объектах
1.3.2.Подготовка проб для хроматографического анализа
1.3.3. Выбор хроматографических условий
1.3.4 Получение флуоресцентных производных простаноидов
1.4. Определение опиоидной активности радиорецегггорным методом
анализа
1.4.1. Общие принципы радиорецепторного метода анализа с использованием препаратов мембран, содержащих рецепторы
1.4.2. Использование радиорецепторного метода анализа для детекции общей опиоидной активности
Глава 2. Участие нервной и иммунной систем в установлении новых
гомеостатических состояний при наркотической зависимости
2.1. Основные понятия проблемы возникновения пристрастия к химическим
веществам
2.2. Основные структуры центральной нервной системы, вовлеченные в установление новых гомеостатических состояний при наркотической зависимости
2.3. Опиоидные вещества и их рецепторы
2.3.1. История открытия опиоидных рецепторов и их эндогенных лигандов
2.3.2. Гетерогенность опиоидных рецепторов
2.3.3. Регуляция процессов, участвующих в проведении сигналов опиоидных рецепторов
2.4. Бимодальные эффекты действия опиоидов при различных концентрациях
2.5. Изменение концентрации опиоидных веществ при введении в организм животных
2.6. Анализ возможности участия иммунной системы в возникновении наркотической зависимости
2.6.1. Изменения в иммунной системе при длительном введении
наркотических веществ in vivo

Рис.1.4. Уровень пролиферативной активности в модельной системе лимфоидных клеток при различных значениях длительности О)-фазы первого цикла Т(*:1 - Тои=16 час.; 2 -То1*=24 час. Расчетные ростовые кривые (А) и данные по количеству клеток в стадии У4 (8-фазе) (Б).
О 25 50 75
Время, часы
Таблица 1.1. Результаты интегрирования данных рис.1.4Б.
Величина интервала интегри- рования час. У рОВе! в зависни 24 час. 1Ь пролиферап 4ОСТИ ОТ Време! 48 час. иной активное -щ добавления 72 час. ти (%) митогена 96 час.
2 776,3 (+) 38,4 (-) 41Д (-) 245,4 (+)
4 581,3 (+) 72,1 (-) 33,9 (-) 169,5 (+)
8 221,4 (+) 168,7 (+) 47,4 (-) 89,2 (-)
12 128,6 (+) 159,2 (+) 87,3 (-) 92,3 (0)
18 86,4 (-) 101,6 (0) 102,2 (0) 157,8 (+)
24 83,1 (-) 89,4 (-) 79,8 (-) 142,5 (+)