Молекулярно-биохимические механизмы развития вторичных иммунодефицитных состояний при действии различных экологических факторов

• Автор: Москалева, Елизавета Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 225 с. : ил.

МОСКОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ МЕДИЦИНСКОЙ ЭКОЛОГИИ
ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР МОЛЕКУЛЯРНОЙ ДИАГНОСТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ
МОСКАЛЕВА ЕЛИЗАВЕТА ЮРЬЕВНА
МОЛЕКУЛЯРНО-БИОХИМИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ ВТОРИЧНЫХ ИММУНОДЕФИЦИТНЫХ СОСТОЯНИЙ ПРИ ДЕЙСТВИИ РАЗЛИЧНЫХ ЭКОЛОГИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ (03.00.04 - биохимия)
На правах рукописи УДК 577.24:616_097.612.017_ 11/12
Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук
Научный консультант доктор медицинских наук, академик РАЕН, профессор
А.В.КАРАУЛОВ
Москва - 1998 г.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений
Введение
Глава I. Обзор литературы
1. Повреждения и репарация ДНК в клетках человека при действии эндогенных и экзогенных факторов
2. Вторичные иммунодефицитные состояния у человека
Глава П. Материалы и методы
Глава Ш. Результаты исследований и их обсуждение
1. Исследование лимфоцитов периферической крови к репарации ДНК у здоровых людей и при заболеваниях, сопровождающихся развитием вторичных иммунодефицитных состояний
1.1. Экспериментальная модель для оценки способности лимфоцитов периферической крови человека к репарации ДНК
1.2. Исследование способности к репарации ДНК лимфоцитов периферической крови больных при остром инфаркте миокарда
1.3. Исследование способности к репарации ДНК лимфоцитов периферической крови больных рассеянным склерозом
1.4. Исследование способности к репарации ДНК лимфоцитов периферической крови больных при неспецифических заболеваниях легких
2. Исследование структуры ДНК лимфоцитов периферической крови у здоровых доноров, при различных заболеваниях и генотоксических воздействиях
2.1. Исследование структуры ДНК лимфоцитов периферической крови здоровых доноров
2.2.Исследование структуры ДНК лимфоцитов периферической крови при заболеваниях, сопровождающихся развитием вторичных иммуноде-фицитных состояний
2.3. Исследование структуры ДНК ЛПК при вакцинации добровольцев
2.4. Исследование структуры ДНК и молекулярно-биохимических механизмов ее лабилизации при активации лимфоцитов периферической крови человека in vitro

2.4.1. Анализ структуры ДНК при активации лимфоцитов мито-генами
2.4.2. Изучение структуры ДНК лейкоцитов периферической крови в сравнении со структурой ДНК пролиферирующих лимфоидных и опухолевых клеток по скорости щелочной денатурации ДНК лизатов
2.4.3. Молекулярно-биохимические механизмы изменения структуры ДНК лимфоцитов при активации ЛПК
2.4.4. Повреждение ДНК лейкоцитов периферической крови человека при действии индукторов окислительного взрыва
2.4.5. Исследование механизмов повреждения ДНК клеток-мишеней при межклеточных взаимодействиях, опосредованных СЭА и

2.5. Структура ДНК лимфоцитов и гранулоцитов периферической крови и иммунный статус больных при различных заболеваниях
2.5.1. Структура ДНК лейкоцитов периферической крови и иммунных статус хирургических больных с гнойно-септическими осложнениями и при некоторых бактериальных инфекциях
2.5.2. Структура ДНК лейкоцитов периферической крови и показатели клеточного иммунитета больных вирусным гепатитом В
2.5.3. Структура ДНК лейкоцитов периферической крови больных при раке молочной железы
2.5.4. Структура ДНК лейкоцитов периферической крови больных при системной красной волчанке
2.6. Исследование структуры ДНК лейкоцитов больных после химио-
и химиорадиотерапии
2.6.1. Структура ДНК лейкоцитов периферической крови больных раком молочной железы после химиотерапии
2.6.2. Структура ДНК лейкоцитов периферической крови больных миелолейкозом в период химиорадиотерапии и в период восстановления
3. Обсуждение результатов
Выводы
Список литературы

вызывая повреждения клеток окружающих тканей продуктами распада [143].
Фрагментация ДНК в процессе апоптоза. Вовращаясь к анализу последовательности проявлений апоптоза (рис. 2), следует отметить, что такое событие апоптоза, как деградация ДНК до межнуклеосомных фрагментов, или хроматинолиз рассматривается многими авторами как один из наиболее типичных признаков апоптоза [301]. Это процесс легко регистрируется по накоплению низкомолекулярных фрагментов ДНК размером 180 п.о. и кратных (х2, хЗ и т.д.) этой величине фрагментов, образующихся под действием эндогенных эндонуклеаз [56, 301]. На ранних стадиях апоптоза (в течение 30 мин - 4 часов после индуцирующего воздействия) образуются гораздо более крупные фрагменты ДНК размером 50 - 300 т.п.о. [56, 111, 245, 284].
В то же время в литературе уже накоплено достаточное количество наблюдений, когда апоптоз лимфоидных клеток не сопровождался накоплением межнуклеосомных фрагментов ДНК, а удавалось зарегистрировать либо только крупные фрагменты ДНК [111, 151], либо появление однонитевых разрывов в ДНК [56, 284]. Исследование природы разрывов ДНК, возникающих в процессе апоптоза, позволило обнаружить в ди- и тринуклеосомных фрагментах однонитевые сегменты ДНК [238]. ОР обнаруживались как в межнуклеосомных областях , так и в коровых участках ДНК [238, 284]. Эти данные позволили заключить, что в процессе апоптоза образуются преимущественно ОР ДНК, а ДР возникают при близко расположенных ОР в противоположных нитях линкерных участков ДНК хроматина, что приводит к распаду молекулы ДНК [238]. Можно ожидать, что регистрация ОР ДНК окажется полезным тестом для выявления клеток на ранних стадиях апоптоза.