Нековалентные комплексы белков с полиалкиленоксидами

• Автор: Сорокина, Елена Михайловна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 150 с.

Оглавление
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1.1. Ковалентная модификация белков водорастворимыми полимерами
1.1.1. Строение полимер-белкового конъюгата
1.1.2. Изменение свойств и стабильности белков при их химической модификации
1.2. Нековалентная модификация белков
1.2.1. Белок—полиэлектролитные комплексы
1.2.2. Свойства ферментов в комплексе с полиэлектролитами
1.2.3. Нековалентные комплексы белков с незаряженными полимерами
ПОСТАНОВКА ЗАДАЧИ
2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2.1. Используемые вещества
2.2. Оценка качества блок-сополимера оксида этилена и оксида пропилена
2.2.1. Очистка блок-сополимера оксидов этилена и пропилена
2.2.2. Определение состава блок-сополимера оксидов этилена
и пропилена
2.3. Введение изотопной метки (трития) в полиэтиленгликоль
2.4. Получение полимер—белковых комплексов
2.4.1. Получение температурно-индуцированных полимер—белковых
комплексов

2.4.2. Получение полимер—белковых комплексов под воздействием повышенного давления
2.5. Выделение полимер—белковых комплексов
2.6. Тонкослойная хроматография
2.7. Определение содержания белка и полимера
2.8. Определение ферментативной активности
2.9. Определение термостабильности
2.10. к-Химотрипсин и его полимер—белковые комплексы, включенные
в систему гидратированных обращенных мицелл
2.11. Определение коэффициентов седиментации комплексов
и исходного белка
2.12. Дифференциальная сканирующая калориметрия
2.13. Метод кругового дихроизма
2.14. Метод флюоресцентной спектроскопии
2.15. Определение состава комплекса полимер—белок с циклодекстрином методом ИК—спектроскопии
2.16. Получение трех-компонентных систем на основе комплексов полиэтиленгликоль—ос-химотрипсин и разветвленных полимерных производных циклодекстрина
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Полимер-белковые комплексы, полученные при нагревании
3.2. Полимер-белковые комплексы, полученные под действием
повышенного давления

3.2.1. Комплексы белок—проксанол, полученные под действием повышенного давления
3.2.2. Комплексы белок—полиэтиленгликоль (ПЭГ), полученные
под действием повышенного давления
Характеристика ПЭГ—белковых комплексов
Стабильность комплексов в растворе
Ферментативные свойства ПЭГ—ХТ комплексов
Исследование ПЭГ—ХТ комплексов в системе гидратированных
обращенных мицелл
Конформационные и гидродинамические свойства
полимер—белковых комплексов
3.3. Термическая стабильность полимер—белковых комплексов
3.4. Влияние добавок ПЭГ и проксанолов на термоинактивацию ХТ
3.5. Изучение термической денатурации ХТ и его комплексов с полиалкиленоксидами с помощью метода флуоресцентной спектроскопии
3.6. Взаимодействие полимер—белковых комплексов с циклодекстринами
и их производными
3.7. Ферментативная активность комплексов полимер—белок в смешивающихся с водой органических растворителях
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА

Рис. 1.8. Схематическое строение “палочкообразной” частицы комплекса полиэлектролита с глобулярным белком. Приведено из (Кабанов В.А., Мустафаев В.И., 1981). Обозначения: 1 — белок, 2 — полиэлектролит.