+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Новый тип протеолитического процессинга урокиназы : Возможный механизм регуляции эндоцитоза и взаимодействия с новым участком связывания

  • Автор:

    Поляков, Алексей Алексеевич

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2000

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    130 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
УРОКИНАЗА
Структура урокиназы
Процессинг урокиназы
Ингибиторы урокиназы: ИАП-1 и ИАП
Регуляция экспрессии урокиназы
Компоненты клеточной поверхности, связывающие урокиназу
УРОКИНАЗНЫЙ РЕЦЕПТОР
Структура и свойства урокиназного рецептора
Белки, взаимодействующие с урокиназным рецептором
Клеточная локализация урокиназного рецептора, урокиназы и

ЭНДОЦИТОЗ УРОКИНАЗЫ
Белки, принимающие участие в эндоцитозе урокиназы
Сигнальные функции эндоцитирующих рецепторов
Семейства ЛНП-Р
Регуляция эндоцитоза урокиназы
ФУНКЦИИ УРОКИНАЗЫ
Протеолитическая функция
Миграция клеток
Пролиферация клеток
Внутриклеточная сигнализация
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Очистка белков
Культивирование клеток
Мечение белков
Измерение интернализации и деградации урокиназы
Получение клеточных лизатов
Аффинная хроматография белков, связывающихся с различными
формами урокиназы
Иммунопреципитация
Иммуноблоттинг
Лигандный блоттинг
ДСН-электрофорез в ПААТ
ЇЧ-концевое секвенирование белков

Идентификация белков методов масс-спектроскопии
РЕЗУЛЬТАТЫ
1. Протеолитический процессинг урокиназы под действием
плазмина
2. Изучение интернализации и внутриклеточной деградации полноразмерной урокиназы и формы, лишенной «ростового» домена
3. Поиск белка, связывающего урокиназу без «ростового»
домена
ОБСУЖДЕНИЕ
Новая форма урокиназы
Новая функция урокиназного рецептора
Новый участок связывания урокиназы
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АКФ аминоконцевой фрагмент урокиназы
Апо-Е-Р2 рецептор аполипопротеидов Е 2 типа
БСА бычий сывороточный альбумин
ГМК гладкомышечные клетки
ГТ глутатион-Б-трансфераза
ГФИ гликозилфосфатидилинозитол
ДСН додецилсульфат натрия
ИАТТ-1 ингибитор активаторов плазминогена
ИАП-2 ингибитор активаторов плазминогена
кд крингл-домен
КНМФР катионнезависимый маннозо-6-фосфатный рецептор
лнп липопротеиды низкой плотности
ЛНП-Р рецептор липопротеидов низкой плотности
лонп липопротеиды очень низкой плотности
ЛОНП-Р рецептор липопротеидов очень низкой плотности
р-мэ Р-меркаптоэтанол
ПААГ полиакриламидный гель
ГТВДФ поливинилидендифлуорид
ПД протеолитический домен
ПКА протеинкиназа А
пкс протеинкиназа С
рд «ростовой» домен
ТХУ трихлоруксусная кислота
УК активатор плазминогена урокиназного типа (урокиназа)
ДЦ-УК двухцепочечная урокиназа
оц-УК одноцепочечная урокиназа
про-УК про-форма урокиназы
нм-УК низкомолекулярная форма урокиназы
УКАРД урокиназа без «ростового» домена
УКР урокиназный рецептор
рУКР растворимый урокиназный рецептор
ФМСФ фенилметилсульфонил фторид
ФНО-ос фактор некроза опухолей а
ФСБ фосфатно-солевой буфер
ц-АМФ циклический аденозинмонофосфат
ЭДТА этилендиаминтетраацетат
ЭФР эпидермальный фактор роста
ЯМР ядерный магнитный резонанс
LRP (low density lipoprotein receptor related protein), белок, гомологичный ЛНП-Р
RAP (receptor-associated protein), рецептор-ассоциированный белок

сигнализации зависят от наличия мембранных партнеров, клеточного окружения, а также стадии развития организма и дифференцировки клеток и тканей.
Регуляция эндоцитоза урокиназы.
Наиболее изученным является механизм LRP-опосредуемого эндоцитоза урокиназы, поэтому все стадии этого процесса будут рассмотрены на его примере (рис. 5). Поскольку из всех известных белков наибольшей аффинностью к УК (Ка = 0,1-1 нМ) обладает ГФИ-заякоренный УКР, непосредственно после секреции оц-УК связывается с клетками с его помощью. Находясь в связанном состоянии, оц-УК может быстро активироваться под действием плазмина и превращаться в дц-УК. В таком состоянии она может находиться долгое время, пока не свяжется с ингибиторами - ИАП-1, ИАП-2, нексином-1 и не эндоцитируется клеткой. Инициация эндоцитоза УК после связывания с ингибиторами объясняется повышением сродства к LRP. Так, константы диссоциации комплекса оц-УК и дц-УК с LRP составляют 45 и 60 нМ соответственно, то для комплекса дц-УК/ИАП-1 она составляет 3 нМ (Kounnas et al., 1993). Это происходит благодаря наличию независимых участков связывания с LRP в молекуле УК (два в А- и Б-цепи) и ИАП-1 (Nykjaer et al., 1994). После взаимодействия с LRP происходит клатрин-зависимый эндоцитоз комплекса УКР/УК/ИАП-1/LRP. В образовавшихся эндосомах происходит понижение pH, в результате чего УК/ИАП-1 диссоциируют от рецепторов и направляются в лизосомы для деградации. В то же время УКР и LRP в виде рецепторосом возвращаются на клеточную поверхность, где продолжают свое функционирование (Del Rosso et al., 1991; Nykjaer et al., 1997b). Установлено также, что эндоцитоз УК может происходить и в отсутствие ее ингибиторов. При этом она непосредственно связывается с LRP, благодаря наличию двух участков связывания, расположенных в аминоконцевом фрагменте и протеолитическом домене (Casslen et al., 1998). Роль урокиназного рецептора в эндоцитозе УК неоднозначна. С одной стороны показано, что предварительное связывание с ним является необходимым условием интернализации УК (Olson et al., 1992). В то же время взаимодействие УК с рецептором приводит к маскировке

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.103, запросов: 967