Фотодинамическая эффективность авидин-биотиновой системы, включающей биотинилированные антитела и производные фталоцианиновых фотосенсибилизаторов

• Автор: Меерович, Ирина Геннадьевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 155 с. : ил

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Аг - антиген Ат - антитело
Биотин-ВМСС - биотинамидо-4-[4'-(малеимидометил)циклогексанкарбоксамидо]бутан БСА - бычий сывороточный альбумин ДМСО - диметилсульфоксид ДМФА - диметилформамид
(ИКО-25)-ИН-биотин - конъюгат моноклональных антител ИКО-25 с биотинамидокапроат N-гидроксисукцимидным эфиром
(I4KO-25)-S-6hothh - конъюгат моноклональных антител ИКО-25 с биотин-ВМСС
ИФА - иммуноферментный анализ
НФДТ - направленная фотодинамическая терапия
МкАт - моноклональные антитела
ФДА - флуоресцеиндиацетат
ФДТ - фотодинамическая терапия
ФС - фотосенсибилизатор
ЭДТА (EDTA) - этилендиаминтетрауксусная кислота
ABTS - 2,2' - азино-ди-1,3-этилбензотиазолин сульфоновая кислота
ADEPT (Antibody Directed Enzyme Prodrug Therapy) - антитело-направленный транспорт ферментативных пролекарств Себ - хлорин еб
DCC - дициклогексилкарбодиимид
4-DMAP - 4-диметиламинопиридин IgG - иммуноглобулин G
HRP-биотин - биотинилированная пероксидаза хрена NEt3 - триэтиламин
NSI - N-гидроксисукцинимид
LD90 (LD50) - летальные дозы; мощности облучения, при которых доля погибш
составляет 90 или 50% соответственно
NAv - нейтравидин
Ne - нафталоцианин
AISPc - сульфофталоцианин алюминия
AlSPc-биотин - дибиотинилированный сульфофталоцианин алюминия
DUE - дигематопорфириновый эфир
HPD - смесь производных дигематопорфирина
HRP-биотин - биотинилированная пероксидаза хрена
RAM-HRP - кроличьи антимышиные антитела, меченые пероксидазой хрена
RYD-домен - домен Arg-Tyr-Asp
SAv - стрептавидин
BPD - бензопорфирин
ЛПНП - липопротеин низкой плотности
ЛПВП - липопротеин высокой плотности
ФИТ - фотоиммунотоксин
НФС - направленный фотосенсибилизатор
HP - гематопорфирин
СР -копропорфирин I
ССР - циклопентанкопропорфирин I
EDCI -1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид
PBS - фосфатно-солевой буфер
PBST - фосфатно-солевой буфер, содержащий 0,05% Tween-
PBS-АТ - буфер PBST, содержащий альбумин
PBD - фосфатно-солевой буфер (модификация Дюльбекко)
Pc - фталоцианин

СОДЕРЖАНИЕ
I. ВВЕДЕНИЕ.
II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
2.1. Механизм фотодинамического воздействия.
2.2. Фотосенсибилизаторы.
2.2.1. Требования, предъявляемые к фотосенсибилизаторам для ФДТ опухолей.
2.2.2. Порфирины.
2.2.3. Фотосенсибилизаторы второго поколения,
2.3. Проблема повышения тропности противоопухолевых препаратов и их направленного транспорта.
2.3.1 Использование липосом в НФДТ.
2.3.2. Использование конъюгатов ФС с полимерами для НФДТ.
2.3.3. Использование конъюгатов ФС с антителами для НФДТ.
2.3.4. Основные способы получения конъюгатов моноклональных антител с
фотосенсибилизаторами.
2.3.5 Пути решения некоторых проблем, возникающих при использовании антител в качестве носителя для цитотоксического агента.
2.4. Авидин-биотиновая система и ее использование для направленного транспорта.
2.4.1. Характеристика авидина, стрептавидина, биотина.
2.4.2. Биотинилирование антител.
2.4.3. Исследования и клинические применения системы авидин-биотин для
направленного транспорта радиомаркеров при радиоиммунодиагностике и
радиоиммунотерапии.
III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Материалы.

принципе, все описанные подходы могут быть разделены на две группы: монофазные методы и полифазные методы.
Монофазные методы
Монофазный направленный транспорт означает прямую связь между антителом и токсическим (химиотерапевтическим, биотерапевтическим, фотохимическим) агентом. На основе такой концепции было разработано несколько различных препаратов, включая антитела, несущие радионуклиды [46, 47], псевдомонадный, дифтерийный и другие токсины или рицин [48, 52], антибиотики и другие химиопрепараты [51], фотосенсибилизаторы [53-72].
Большинство этих конъюгатов эффективно разрушают опухолевые клетки в системах in vitro. В системах in vivo практически все они теряют свою эффективность. Было отмечено несколько факторов, объясняющих это: нестабильность связи, малое количество антигенных центров на поверхности опухолевых клеток, раннее разрушение или удаление коньюгатов печенью или клетками крови, неконтролируемое поражение здоровых тканей на пути к мишени, выработка анти-идиотипических антител и т.д. Бесспорным является также факт, что каждая модификация антител приводит к увеличению их узнаваемости ретикулоэндотелиальной системой, которая быстро разрушает антитела любого рода, если они заметно модифицированы. Только слабая модификация, подобная биотинилированию или присоединению пропиленпеитауксусной кислоты для связывания изотопов, по-видимому, плохо распознается естественными защитными механизмами человеческого организма, что и приводит к успешному использованию таких производных для мечения опухолей.
Полифазные методы
Полифазные методы используют различного рода мультипликативные системы: ферментативные (в случае ADEPT терапии) [80] или авидин - биотиновые [78, 79].