Роль каротиноидов в антиоксидантной защите грибной клетки

• Автор: Соколов, Александр Вячеславович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 109 с. : ил.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава 1. ХАРАКТЕРИСТИКИ ОСНОВНЫХ КОМПОНЕНТОВ СИСТЕМЫ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ ГРИБНОЙ КЛЕТКИ
1.1. АФК и их источники у грибов
1.2. Окислительный стресс, рост и дифференцировка у грибов
1.3. Характеристика основных компонентов системы антиоксидантной защиты грибной клетки
1.3.1. Супероксиддисмутазы
1.3.2. Каталазы
1.3.3. Пероксидазы
Глава 2. КАРОТИНОИДЫ
2.1. Свойства каротиноидов и факторы, влияющие на их синтез у грибов
2.2. Локализация каротиноидов у грибов
2.3. Синтез каротиноидов у грибов
2.4. Регуляция биосинтеза каротиноидов
2.5. Связь синтеза вторичных метаболитов с процессами дифференцировки у грибов
2.6. Каротиноиды - предшественники триспоровых кислот
ЗАКЛЮЧЕНИЕ К ОБЗОРУ ЛИТЕРАТУРЫ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Реактивы
3.2. Объекты исследования
3.3. Выделение и частичная очистка белков, проявляющих СОД активность из В. Мйрога и
3.4. Определение активности СОД
3.5. Определение активности каталазы
3.6. Экстракция Р-каротина из мицелия ВЛпзрога
3.7. Экстракция каротиноидов из У.сгсша
3.8. Электрофорез СОД в ГТААГ
3.9. Получение белкового препарата
3.10. Инкубация 6-каротина и В-апо-13-каротинона с белковыми препаратами из ВЛтрога
3.11. Идентификацию апокаротиналей
3.12. Окислительная деградация Р-каротина
3.13. Получение производных В-апо-13-каротинона
3.14. Синтез 4-метокси-р-каротина
3.15. Синтез изокриптоксантина
3.16. Выделение триспоровых кислот
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Глава 4. СРАВНЕНИЕ РЕАКЦИИ НА ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ СТРЕСС ОТДЕЛЬНЫХ КОМПОНЕНТОВ СИСТЕМЫ АНТИОКСИДАНТНОЙ • ЗАЩИТЫ У ВЬАКЕБЬЕА ТШЗРОМ и ЖЖОЗРАМ СЫЗБА:
4.1. Характеристика системы антиоксидантной защиты у ВЛшрога
4.2. Изменение активности СОД, каталазы и уровня каротиноидов у N. с/тта при окислительном стрессе
Заключение к главе
Глава 5. УЧАСТИЕ р-КАРОТИНА В АОЗ КЛЕТКИ ПРИ ОКИСЛИТЕЛЬНОМ СТРЕССЕ
Глава 6. ИЗУЧЕНИЕ СУПЕРОКСИДЦИСМУТИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ У В. ТШЗРОМ И N. СМЗЗА
Глава 7. НАЧАЛЬНЫЕ ЭТАПЫ СИНТЕЗА ТРИСПОРОВЫХ КИСЛОТ
7.1 Обнаружение изокриптоксантина
7.2 Идентификация апокаротиналей
7.3 Биотранформация Р-апо-13-каротинона
7.4 Схема начальных этапов синтеза ТСК

927) и 4-кето-6-апо-13-каротинона (7макс 345нм, Е|* 1007) определяли спектрофотометрически на приборе SpecordUV VIS (Германия).
3.14. Синтез 4-метокси-р-каротина осуществляли из ß-каротина реакцией с эфератом трифторида бора в хлороформе с последующим гидролизом фтор-производного и хроматографическим разделением полученного соединения на окиси алюминия (206). Спектр поглощения изокриптоксантина Хмаке 428, 447, 471 нм, Е|* 2500. Аллильную дегидратацию изокриптоксантина проводили в хлороформе, добавляя непосредственно в кювету 10-20 мкл раствора хлороформа, насыщенного газообразным НС1. Максимум поглощения изокриптоксантина смещается вправо - А,маКс 478, 500(плечо).
3.15. Синтез изокриптоксантина и проверка аллильного положения -ОН группы. К раствору изокриптоксантина в хлороформе добавляли 5 объемов метанола и несколько капель раствора хлороформа, насыщенного газообразным НС1. Смесь экстрагировали гексаном и хроматографировали. Спектр поглощения не изменялся, хроматографическая подвижность в стандартных условиях возрастала с Rf - 0,3 до Rf- 0,8. Масс-спектр полученного соединения снимали на приборе “Selmi” (Украина). Химическая ионизации проводилась ядрами метана при напряжении 20 1 03 В.
3.16. Выделение триспоровых кислот. Триспоровые кислоты экстрагировали из культуральной жидкости, для этого культуральную жидкость фильтровали и подкисляли серной кислотой до рН=1, а затем экстрагировали двумя объемами диэтилового эфира. Экстракт из культуральной жидкости убирали и промывали 0,5 объемом воды, а триспоровые кислоты экстрагировали 0,5 объемом 5%NaHCC>3. Данная бикарбонатная фракция мэжет