Физиолого-биохимические характеристики каллусной культуры Silene vulgaris (M. ) G. как продуцента полисахаридов

• Автор: Гюнтер, Елена Александровна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Сыктывкар
• Количество страниц: 164 с. : ил

Содержание
Введение
Глава 1. Обзор литературы
Культуры клеток растений как продуценты полисахаридов
1.1. Пектины культур клеток растений
1.2. Гемицеллюлозы культур клеток растений
1.3. Сравнительное изучение полисахаридов растений
и культур растительных клеток
1.4. Биосинтез полисахаридов в культурах клеток растений
1.5. Роль факторов культивирования в биосинтезе полисахаридов
в культурах клеток растений
1.6. Silene vulgaris (М.) G. как объект для введения в культуру
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Объекты исследований
2.2. Получение стерильных растений S. vulgaris in vitro
2.3. Получение и культивирование каллусных культур
смолевки обыкновенной
2.4. Оптимизация условий культивирования каллусных культур
2.5. Анализ углеводного состава питательной среды
2.6. Выделение полисахаридов из растений и каллусных культур
2.7. Анализ полисахаридов из растений и каллусных культур
2.8. Качественный и количественный анализ каллусной культуры Rauwolfia serpentina на содержание алкалоидов различных групп
2.8. Статистическая обработка результатов
Глава 3. Результаты исследований
3.1. Получение каллусных культур смолевки обыкновенной
и их морфо-физиологические характеристики
3.1.1. Влияние фитогормонов на каллусогенез S. vulgaris
3.1.2. Влияние типа экспланта на каллусогенез S. vulgaris
3.1.3. Морфо-физиологические характеристики каллусных тканей смолевки обыкновенной

3.2. Состав и содержание полисахаридов в растениях и каллусных
культурах смолевки обыкновенной
3.2.1. Содержание полисахаридов в плантационных растениях
S. vulgaris
3.2.2. Содержание полисахаридов в каллусных культурах
S. vulgaris
3.2.3. Динамика роста и биосинтеза полисахаридов
каллусной культуры смолевки обыкновенной
3.3. Влияние факторов культивирования на рост и биосинтез полисахаридов в каллусной культуре смолевки обыкновенной
3.3.1. Влияние фитогормонов на рост и биосинтез полисахаридов
3.3.2. Влияние углеводов на физиолого-биохимические характеристики каллусной культуры смолевки
3.3.3. Влияние элементов минерального питания на физиологобиохимические характеристики каллусной культуры
S. vulgaris
3.4. Влияние полисахаридов каллусной культуры
S. vulgaris на накопление алкалоидов
в культуре ткани Rauwolfia serpentina (Benth.)
Глава 4. Обсуждение результатов
4.1. Зависимость каллусообразования S. vulgaris
от различных факторов
4.2. Полисахаридный состав интакгного растения и различных каллусных линий смолевки обыкновенной
4.3. Биосинтез полисахаридов в каллусной культуре
S. vulgaris в зависимости от динамики роста
4.4. Физиолого-биохимические характеристики каллусной культуры
S. vulgaris при различных условиях культивирования
4.5. Полисахариды каллусной культуры смолевки обыкновенной
как факторы регуляции вторичного метаболизма
Выводы
Список литературы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ
2,4-Д - 2,4-дихлорфсноксиуксусная кислота БАЛ - 6-бензиламинопурин
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография
ГЖХ - газожидкостная хроматография
ИМК - индолилмасляная кислота
ИУК - индолилуксусная кислота
НУК - нафтилуксусная кислота
Сем. - семейство
ТСХ - тонкослойная хроматография AG - арабиногалактан AGP - арбиногалактановый протеин Агф" - арабинофураноза
DEAE-целлюлоза - диэтиламиноэтил-целлюлоза Gal - галактопираноза
GalA - D-галактопиранозилуроновая кислота
Glc - глюкопираноза
GlcA - глюкуроновая кислота
Man - маннопираноза
PG - полигалактуроназа
PME - пектинметилэстераза
РМТ - пектинметилтрансфераза
RGI - рамногалактуронан I
RGII - рамногалактуронан II
Rha - рамнопираноза
Suc - сахароза
SV - силенан из каллуса
SVj - силенан из интактного растения
SVii - силенан из интактного растения
TFA - трифторуксусная кислота
UDP - уридин дифосфат
Ху1 - ксилопираноза

тимофеевки, проса Panicum miliaceum, канареечника Phalaris aquatica и риса, которые не полностью дедифференцированы (содержат корневые примордии), не всегда близки полисахаридам, найденным в клеточной стенке. В то же время суспензионная культура ячменя Hordeum vulgare, состоящая в основном из недифференцированных клеток, продуцирует в среду полисахариды, близкие таковым клеточной стенки (Sims et al., 2000).
Сходство состава полисахаридов клеточной стенки и экстрацеллюлярных полисахаридов для суспензионных культур было отмечено многими исследователями (Burke et al., 1974; McNeil et al., 1984; Suzuki et al., 1990; Kakegawa et al., 2000), однако возможны и отличия. Так, показано, что экстрацеллюлярные полисахариды культуры клеток овса Avena sp. содержат большое количество арабиногалактана II, тогда как в клеточных стенках обнаружено высокое содержание арабииоксилана, связанного с арабиногалактаном II, присутствующим в минорном количестве (Burke et al., 1974).
Первичные клеточные стенки всех высших растений содержат одни и те же основные полисахариды, но иногда в различных пропорциях (McNeil et al., 1984; Darvill et al., 1985). Дар вилл с соавторами выдвинули гипотезу, что комплекс углеводов клеточной стенки в различных органах и тканях одного растения отличается, но возможно создать единую картину первичной клеточной стенки без знания деталей строения стенки индивидуальных клеток (Darvill et al., 1985).
1.4. Биосинтез полисахаридов в культурах клеток растений
Биосинтез сложных полисахаридов клеточной стенки растений -пектинов и гемицеллюлоз, а также гликопротеинов осуществляется аппаратом Гольджи, тогда как биосинтез целлюлозы происходит на плазматической мембране (Driouich et al., 1993; Gibeaut and Carpita, 1994; Cosgrove, 1997; Carpita and McCann, 2000). Доказано, что аппарат Гольджи - место синтеза и секреции