Исследование роли ионов Ca2+ и Ca2+-зависимых систем внутриклеточной сигнализации в эффектах электромагнитного излучения крайне высокой частоты на респираторный взрыв нейтрофилов

• Автор: Аловская, Алла Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 105 с.

Оглавление
1. Введение
Глава 1. Литературный обзор
1.1. Биологические эффекты ЭМИ КВЧ низкой интенсивности
1.1.1 Воздействие ЭМИ низкой интенсивности на целый организм
1.1.2 Воздействие ЭМИ КВЧ И СВЧ на клетки иммунной системы
1.1.3 Участие систем внутриклеточной сигнализации в
перестройке метаболизма клеток при действии ЭМИ КВЧ и СВЧ
1.1.4. Действие ЭМИ КВЧ и СВЧ на цитоплазматическую
мембрану клетки
1.1.5. Механизмы первичного взаимодействия ЭМИ
низкой интенсивности с биологическими объектами
1.2. Структурно-функциональные особенности нейтрофилов
1.2.1. Общая характеристика нейтрофилов
1.2.2. Функциональные особенности нейтрофилов
1.3. Функциональная пластичность нейтрофилов
1.3.1. Покоящиеся нейтрофилы
1.3.2. Праймированное состояние нейтрофилов а
1.3.3. Активированное состояние нейтрофилов
Глава 2. Материалы и методы
Глава 3. Результаты исследований
3.1. Активация респираторного взрыва нейтрофилов
кальциевыми ионофорами и форболовым эфиром
3.2. Эффект ЭМИ КВЧ на нейтрофилы в различном функциональном состоянии
3.3. Исследование механизмов активации респираторного взрыва нейтрофилов кальциевыми ионофорами и фордоловым эфиром
3.3.1. Особенности совместной активации респираторного
взрыва нейтрофилов кальциевыми ионофорами и ФМА
3.3.2. Измерение цитоплазматического кальция при действии кальциевых ионофоров
3.3.3. Взаимосвязь увеличения [Са2+]цит и изменения продукции АФК нейтрофилов в ответ на ФМА при совместной
активации с кальциевыми ионофорами
3.3.4. Участие ФЛА2 в регуляции респираторного взрыва нейтрофилов
3.3.5. Опенка функционального статуса нейтрофилов на модели активации
респираторного взрыва кальциевым ионофором А23187 и ФМА
3.4. Исследование биологического действия ЭМИ КВЧ
на модели активации респираторного взрыва нейтрофилов кальциевым ионофором и ФМА
3.4.1. Роль внешнего кальция в реализации эффектов
ЭМИ КВЧ на нейтрофилах
3.4.2. Роль фосфолипазы А? в эффекте ингибирования
ЭМИ КВЧ продукции АФК нейтрофилов, активированных кальциевым ионофором А23187 и ФМА
3.4.2. Модификация эффекта ЭМИ КВЧ при облучении нейтрофилов в присутствии проадифена, блокатора цитохрома Р
Глава 4. Обсуждение
Выводы
Список литературы
Благодарности

Глава 1. Введение.
Биологические эффекты низкоинтенсивного электромагнитного излучения крайне высокой частоты (ЭМИ КВЧ) широко исследуются в настояшее время. Клинические исследования влияния ЭМИ КВЧ на течение различных заболеваний показывают, что КВЧ-терапия оказывает иммунорегулирующее воздействие при онкологических заболеваниях; при воспалительных процессах нормализует лейкоцитарный индекс, снимает аллергические реакции на лекарственные препараты. Наиболее значительный терапевтический эффект наблюдали при действии ЭМИ КВЧ на течение воспалительных процессов [1, 2].
Четкого представления о физико-химических механизмах действия КВЧ-излучения на биологические системы на сегодняшний день нет, оно находится в стадии формирования. Существует ряд гипотез: гипотеза когерентных
возбуждений и взаимодействий, объясняющая резонансное запасание энергии ЭМИ КВЧ биологическими объектами [3]; гипотеза о солитонном механизме передачи энергии, причем, возбуждению солитонов сопутствует появление когерентных состояний по Фрелиху [пит. по 4]; информационная гипотеза [5], и некоторые другие, например, связывающие действие ЭМИ КВЧ с эффективным поглощением энергии ЭМИ КВЧ молекулами воды [6]. Также нет ясности в вопросе о природе сенсора ЭМИ КВЧ в клетках. Большинство работ по исследованию биологического действия ЭМИ КВЧ посвящено изучению частотных зависимостей, характеризующих изменение структурнофункционального состояния клетки при действии ЭМИ КВЧ [7-11]. При этом роль вторичных мессенджеров, реализующих изменение клеточного метаболизма вследствие действия ЭМИ КВЧ, остается неопределенной.
В работе [12] обсуждается, что к ЭМИ крайне низких частот более чувствительны активированные, а не покоящиеся клетки. В то же время с позиции информационной теории взаимодействия ЭМИ КВЧ с биологическими

приводящий к индукции циклооксигеназы и последующему увеличению уровня простагландинов. ФЛА2 типа 2 часто называют непанкреатической секретируемой ФЛА2, так как ее аминокислотная последовательность более тесно связана с последовательностью секретируемой ФЛА2 из яда змей. Этот фермент часто секретируется из активированных нейтрофилов, тромбоцитов и опухолевых клеток в ответ на агонисты. Определена роль этого фермента в деградации бактерий [131], гистаминовый выброс у опухолевых клеток и Т-клеточная активация, а также его вовлечение в высвобождение АК в макрофагах и эндотелиальных клетках [135, 136]. Маловероятно, что секретируемая ФЛА2,
локализованная в секреторных гранулах „ могла бы напрямую влиять на

фосфорилирование или изменения цитоплазматического Са+. Считается, что секретируемая ФЛА2 не является специфичной по отношению к АК, и в качестве субстрата предпочитает этаноламинсодержащий фосфоацилглицерин. Для активации секретируемой ФЛА2 недостаточно фосфорилированных сайтов, нужна транслокация. Ферменту требуются миллимолярные количества Са+ в качестве каталитического кофактора, но не для связывания с мембраной. Секретируемая ФЛА2 инактивируется агентами, которые редуцируют дисульфидную связь.
Найдена новая Са2+-независимая ФЛА2 в цитозоле миоцитов (40 кДа), которая быстро высвобождает АК из мембран [136].
Таким образом основной функцией всех форм фосфолипаз А2 является высвобождение арахидоновой кислоты из мембранных фосфолипидов [118].
В нейтрофилах ФЛА2 гидролизует фосфолипиды и 1-алкилфосфолипиды, в результате чего возникают два главных предшественника: арахидоновая кислота и 1-0-алкил-5п-глицеро-3-фосфорилхолин (лизо-ФАТ) [137]. Свободная арахидоновая кислота окисляется циклоосигеназой до простагландинов или превращается в лейкотриены при действии липооксигеназы; лизо-ФАТ ацилируется с помощью ацетил СоА-трансферазы с образованием СО-алкил-яп-глицеро-3-фосфорнтхолин (ФАТ). Установлно, что кроме метаболизма по циклооксигеназному и липоксигеназному путям, АК и ее продукты могут