Формирование наноструктурированных оболочек микроконтейнеров, содержащих биологически активные вещества, ингибирующие процесс пероксидного окисления липидов

• Автор: Ломова, Мария Владимировна
• Шифр специальности: 03.01.02, 02.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 138 с. : ил.

Оглавление
Оглавление
Список сокращений
Введение
ГЛАВА 1. Аналитический обзор литературы
1.1. Формирование полимерных нанокомпозитных пленок методом последовательной адсорбции из водной фазы молекул полимеров и функциональных элементов
1.1.1.Описание метода формирования многослойной полимерной
нанокомпозитной пленки
1.1.2.Применение метода последовательной адсорбции из водной фазы макромолекул и функциональных элементов для формирования капсулирующих оболочек
1.2. Методы контроля проницаемости и структурной целостности оболочек микроконтейнеров
1.2.1.Физико-химические факторы, определяющие проницаемость оболочек
1.2.2.Физические методы влияния на проницаемость и структурную целостность оболочек
1.2.3.Биологические методы деградации оболочек для контролируемого высвобождения содержимого
1.2.4.Капсулирование низкомолекулярных водорастворимых веществ
1.3. Капсулирование дисперсной фазы эмульсии многослойной оболочкой
1.3.1.Методы получения эмульсионных систем
1.3.2.Классификация эмульсий
1.3.3 .Эмульгаторы
1.4. Пероксидное окисление липидов
1.4.1.Реакции пероксидного окисления липидов
1.4.2.Факторы, инициирующие пероксидное окисление полиненасыщенных жирных кислот липидов in vivo
1.4.3.Пероксидное окисление полиненасыщенных жирных кислот липидов дисперсной фазы
1.5. Взаимодействие живых клеток и микроконтейнеров, включающих многослойные полимерные оболочки
1.6. Методы исследования многослойных нанокомпозитных полимерных оболочек и покрытий
1.7. Выводы к первой главе и постановка задачи исследования
ГЛАВА 2. Пероксидное окисление полиненасыщенных жирных кислот, капсулированных в многослойные полимерные оболочки
2.1. Капсулирование дисперсной фазы эмульсии льняного масла
многослойной полимерной оболочкой
2.2. Аналитические методы
2.2.1.Измерение уровня пероксидного окисления липидов, капсулированных в многослойную полимерную оболочку
2.2.2.Микроскопи я
2.2.3.Определение гидродинамического диаметра и электростатического
заряда на поверхности микроконтейнеров
2.2.4.Лиофильное высушивание
2.3. Исследование агрегативной устойчивости и механической стабильности многослойных полимерных оболочек микроконтейнеров
2.4. Влияние количества полимерных слоев оболочки микроконтейнера на уровень пероксидного окисления липидов капсулированного ляняного масла

2.5. Ингибирование пероксидного окисления полиненасыщенных жирных кислот липидов в растворах, содержащих ионы железа (II)
2.6. Выявление главного инициатора пероксидного окисления липидов в эмульсиях
2.7. Влияние механизма действия ингибитора и места его локализации в микроконтейнере на уровень пероксидного окисления ПНЖК липидов
2.8. Защита ПНЖК липидов от пероксидного окисления, инициированного ультрафиолетовым излучением
2.9. Выводы ко второй главе
Защищаемые результаты исследований
ГЛАВА 3. Ферментативная защита от пероксидного окисления ПНЖК липидов капсулированного масла
3.1. Формирование микроконтейнеров, содержащих ферменты в оболочке
3.2. Ингибирование пероксидного окисления ПНЖК липидов льняного масла ферментами каталаза и супероксиддисмутаз, в структуре многослойной оболочки, капсулирующей дисперсную фазу эмульсии льняного масла
3.3. Выводы к третьей главе
Защищаемые результаты исследований
ГЛАВА 4. Ферментативная деградация многослойных оболочек и пленок и изучение цитотоксичности оболочек in vitro
4.1. Экспериментальные методы
4.1.1.Получение многослойных пленок БСА/ТА
4.1.2.Микроскопи я
4.1.3.Изучение пролиферации клеток в присутствии многослойных оболочек
4.2. Деградация оболочки БСА/ТА/БСА, капсулирующей дисперсную фазу эмульсии льнягого масла, под действием фермента а-химотрипсин

Молекулы ферментов класса гидролаз можно капсулировать посредством насыщения пор частиц карбоната кальция в момент пресипитации с последующим формированием многослойной полимерной оболочки, содержащей субстрат фермента. Наличие неорганической матрицы затрудняет диффузию и каталитическую активность молекул фермента, однако после растворения карбоната кальция молекулы фермента катализируют деградацию оболочки. Описанный способ был продемонстрирован на примере капсулирования коммерчески синтезируемого комплекса протеиназ (Проназа™) одновременно с модельным активным грузом - молекулами ДНК. После экстракции ядра оболочка поли-Ь-аргинин-полиаспаргиновая кислота деградировала под действием молекул а-химотрипсина, находящихся в полости, высвобождая капсулированные молекулы ДНК [3].
1.2.4. Капсулирование низкомолекулярных водорастворимых
веществ
Существенное количество современных лекарственных соединений имеют низкий молекулярный вес и хорошо растворимы в воде. Капсулирование низкомолекулярных водорастворимых веществ многослойной оболочкой возможно, например, с помощью эмульсификации, выпаривания или экстракции органического растворителя, а также формирования капсулирующих оболочек посредством реакции «сшивки» адсорбированных полиэлектролитов [91-94].
В качестве примеров можно привести капсулирование 6-карбоксифлуоресцина (молекулярный вес 373.62 г/моль) и прокаинамид гидрохлорида (молекулярный вес 271.79 г/моль), используя зависимость проницаемости многослойной полимерной оболочки от температуры. Однако спустя несколько часов после загрузки, происходила значительная утечка капсулированных веществ из полости оболочек [95].