Формирование антиинфекционной и противоопухолевой защиты при стимуляции врожденного иммунитета рекомбинантным белком теплового шока-70 в эксперименте.

• Автор: Воробьёв, Денис Сергеевич
• Шифр специальности: 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 115 с. : 5 ил.

ЧАСТЬ I. ГЛАВА 1. ГЛАВА 2. ГЛАВА 3. ЧАСТЬ II. ГЛАВА 1. Влияние примеси ЛПС на протективную активность рекомбинантного белка теплового шока
ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ рБТШЛПС НА ФУНКЦИЮ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК, ЛИМФОЦИТОВ И СИНТЕЗ цитокинов. ГЛАВА 4. ГЛАВА 5. Исследование острой токсичности препарата рБТШЛПС. ГЛАВА 1. Начало исследований белков теплового шока БТШ связано с появлением в году работы Ф. Ритоззы, в которой автор наблюдал радикальное изменение распределения пуфов вздутий в хромосомах слюнных желез i после кратковременного повышения температуры 3. Сами же БТШ, синтезируемые клетками в ответ на гипертермию и поэтому вызвавшие изменения в хромосомах дрозофил, были обнаружены только лет спустя, в году 8. Вскоре после открытия БТШ было установлено, что связанные с гипертермией процессы белкового синтеза являются универсальной реакцией всех типов клеток не только на тепловой шок, но и на другие воздействия как физиологического, так и искусственного происхождения. В связи с этим в литературе, наряду с исторически сложившимся термином БТШ, используется также его аналогстресспротсины .


В качестве модификаторов исследуют природные лиганды патогенассоциированные молекулярные структуры ПАМС микроорганизмов и их синтетические аналоги , 2. Обширная литература посвящена исследованию роли представителей большой группы многофункциональных белков теплового шока БТШ, которые взаимодействуют с . В эту группу входят различающиеся по молекулярной массе и структуре члены семейств БТ1Л, БТШ, низкомолекулярные БТШ и высокомолекулярные БТШ М0 9. Иммунологическая активность выявлена у БТШ, семейство БТШ, БТШ0 и БТШ 0 . Показано, что БТШ и являются элементами иммунологических событий и патогенеза инфекций, аутоиммунных и онкологических процессов , 7, 2. Молекулы БТШ и служат лигандами для рецепторов антигенпредставляющих клеток АПК и других клеток врожденного иммунитета. Белки теплового шока используют при конструировании разных вакцин ДНК, пептидные, применяя их в качестве иммуногенного антигена или адъюванта . Мы исследовали антиинфекционную и противоопухолевую активность рекомбинантного белка теплового шока i i1. Препарат содержал примесь липополисахарида ЛПС ii i, поэтому БТШ описывали аббревиатурой рБТШЛПС. Изучена способность рБТШЛПС создавать быструю через ч защиту против патогенов разных таксономических групп представителей разных семейств бактерий ii 5 . Определили роль примеси ЛПС при формировании антибактериальной защиты у мышей, иммунизированных рБТШЛПС. В специальной серии опытов установили, что рБТШЛПС обладает противоопухолевым действием в отношении меланомы В. Цель работы. Исследовать способность рБТШЛПС создавать у животных защиту против патогенов разных таксономических групп и оказывать влияние на развитие экспериментальных опухолей. Задачи исследования. Оценить резистентность мышей к . БТШЛПС. Препарат был любезно предоставлен сотрудниками НИИ молекулярной диагностики и лечения проф. В.И. Киселевым и проф. П.Г. Исследовать противоопухолевую против меланомы В и карциномы яичников активность рБТШЛПС в экспериментах на мышах. Установить роль ЛИС, входящего в состав рекомбинантного БТШ, при формировании у животных невосприимчивости к инфекциям. Изучить действие рБТШЛПС на функциональную активность ДК, функциональные свойства и фенотип мононуклеарных клеток, а также продукцию цитокинов. Экспериментально определить возможность образования аутоантител к органонеспецифическим антигенам у мышей при введении рБТШЛПС. Научная новизна. Впервые показано, что рБТШЛПС М i при однократном введении создает у мышей быструю через ч защиту против микроорганизмов разных таксономических групп бактерий разных семейств . При трехкратном введении рБТШЛПС в дозе мкгмышь формируется защита в течение всего срока наблюдения день от . Впервые выявлено, что наряду с антиинфекционной активностью рБТШЛПС обладает способностью тормозить рост экспериментальных опухолей при пятикратной аппликации меланома В. Впервые установлено, что примесь ЛПС в составе рекомбинантного белка теплового шока усиливает антиинфекционную активность БТШ. Изучено взаимодействие рБТШЛПС с 2 и 4 человека, экспрессированными на перевиваемых клеточных линиях. При этом показана активация внутриклеточного ядерного фактора кВ, который контролирует синтез цитокинов. Установлено, что в ответ на введение рБТШЛПС у интактных мышей повышался уровень I6 и I в сыворотке, а у иммунизированных и зараженных . I6 и , но увеличивался синтез I. Выявлено, что в системе i vi рБТШЛПС стимулировал созревание ДК мышей и усиливал цитотоксическую активность мононуклеарных лейкоцитов 1 периферической крови человека в отношении клеток эритробластного лейкоза К2. Под влиянием рБТШЛПС возрастала экспрессия молекул и на мембране МНЛ. Впервые в эксперименте на мышах показано, что введение рБТШЛПС не сопровождалось выработкой аутоантител к органонеспецифическим антигенам ДНК, коллаген, эластин. Практическая значимость. Результаты проведенных исследований открывают перспективу использования рекомбинантного БТШЛПС в качестве модификатора функций , с помощью которого можно создавать защиту против широкого круга патогенов.