Кроветворение в длительной культуре костного мозга мышей, дефицитных по фактору некроза опухоли

• Автор: Нифонтова, Ирина Николаевна
• Шифр специальности: 14.00.29
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 201 с. : ил.

Актуальность проблемы. Цель работы. Основные задачи. Глава 1. Схема кроветворения. Методы изучения состава кроветворных предшественников. Регуляция само поддержания и дифференцировки пСКК. Характеристика кроветворения в ДККМ ФНО. Глава 2. Животные и их содержание. Получение и анализ КОЕС. Получение фидера из перитонеальных макрофагов. Получение прикрепленных клеточных линий. Клонирование полученных клеточных линий. Пассирование клеток полученных линий, а также линий, использовавшихся для сравнения. Получение кондиционированных сред от полученных стромальных линий. Проверка способности клеток полученных стромальных линий поддерживать кроветворение. Культивирование ЭСК. Проверка способности клеток полученных стромальных линий поддерживать рост ЭСК. Окрашивание срезов селезеночных колоний, образованных КОЕС. Окрашивание клеток СФ на щелочную фосфатазу 5. Окрашивание клеток СФ на неспецнфическую эстсразу 5. Проверка клеток СФ на опухолеродность. Кариотипирование клеток СФ и полученных стромальных линий.


Удалось обнаружить, что некоторые клоны их большинство действительно существуют относительно короткое время в связи с истощением пролиферативного потенциала в процессе кроветворения. Вместе с тем некоторые клоны могут функционировать существенно дольше и даже в течение всей жизни . Наиболее реальное объяснение заключается в разном пролиферативном потенциале клонообразующих клеток. Это возможно, например, в случае, если СКК в процессе своей индивидуальной истории проделали разнос количество делений, т. В таких случаях обнаружение одинаково маркированных клеток одного клона не обязательно свидетельствует о длительном постоянном функционировании одного клона с практически неограниченным пролиферативным потенциалом более вероятно существование множества субклонов, начинающих функционировать последовательно, но имеющих общего предшественника, уникальную СКК. В целом дерево дифференцировок в отделе ранних кроветворных предшественников далеко от расшифровки. Возможно, бифуркация дифференцировок на миелоидные и лимфоидные следует за первоначальным коммитированием уже на уровне КРСКК, причем сам этот процесс не одномоментен, и потеря, например, миелоидного потенциала лимфоидными предшественниками начинается с блокирования эритромегакариоцитарных дифференцировок, при сохранении грануломоноцитарных, что сопровождается началом постепенного снижения пролиферативного потенциала. Во всяком случае, можно выделить популяцию стволовых клеток 1дпсКлГС4риЗ7, сохраняющую лимфомиелоидиый потенциал, но уже не способных к эритромегакариоцитарным дифференцировкам .