Коррекция острой печеночной недостаточности аллотрансплантацией гепатоцитов в эксперименте

• Автор: Сапин, Кирилл Анатольевич
• Шифр специальности: 14.00.27
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Воронеж
• Количество страниц: 89 с. : 26 ил.

1.1 История исследования гепатоцитов.

1.2 Методы замещения функций печени.

1.3 Методы получения изолированных гепатоцитов.

1.4 Условия инкубирования изолированных гепатоцитов

1.5 Морфологические критерии жизнеспособности

изолированных гепатоцитов

1.6 Биохимические критерии жизнеспособности

изолированных гепатоцитов.

1.7 Механизм действия изолированных гепатоцитов

1.8 Методы использования изолированных гепатоцитов.

ГЛАВА II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Методика выделения клеток
2.2 Методика культивирования.
2.3 Методика определения функции клеток
2.3.1 Методика определения глюкозы.
2.3.2 Методика определения мочевины
2.3.3 Методика определения креатииина
2.4 Методика гистологического исследования.
2.5 Методика затравки животных СС
2.6 Методика трансплантации изолированных гепатоцитов
2.7 Методика исследования места трансплантации.
2.8 Статистическая обработка полученных данных.
ГЛАВА III РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1 Морфологические критерии жизнеспособности
изолированных гепатоцитов
3.2 Биохимические критерии жизнеспособности
изолированных гепатоцитов
3.2.1 Глюкозоутилизирующая функция.
3.2.2 Дезинтоксикационная функция
3.3 Динамика биохимических изменений трансаминаз крови крыс в процессе наблюдения
3.4 Динамика морфологических изменений
в процессе наблюдения
3.4.1 Динамика гистологических изменений печени крыс в процессе наблюдения.
3.4.2 Динамика цитологических изменений места пересадки изолированных гепатоцитов
ГЛАВА 1У ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ЛИТЕРАТУРА


Впервые гепатоцигы были выделены около лет назад Элиотом и Либсром, которые обнаружили, что изотонические среды в отличие от гипотонических, а также раствор сахарозы предотвращают цитолиз клеток. Метаболическая реактивность таких клеток резко отличалась от срезов и иптактной печени. Применение гепатоцитов в качестве биологического объекта имеет целый ряд преимуществ. Гепатоцигы существенно увеличивают количественные возможности эксперимента сравнительно с целой печенью, при том, что, так же как и последняя, они сохраняют интактной внутриклеточную ультрастуктуру, необходимую для адекватного воспроизведения на клеточном уровне специфических реакций целого органа. Они не имеют раневой поверхности, характерной для срезов. В них сохраняется селективная проницаемость через плазматическую мембрану, но в то же время снимаются диффузионные ограничения для свободно проникающих веществ но сравнению со срезами и печенью. Гспатоциты являются идеальным объектом для изучения вопросов, связанных с внутриклеточной регуляцией метаболизма, оценки направления метаболических потоков, взаимодействия внутриклеточных компонентов, исследования биотрансформации ксенобиотиков. С появлением взвеси изолированных гепатоцитов открылись исключительные возможности для изучения механизма транспорта веществ через клеточную мембрану, гормональной регуляции этого процесса, а также межклеточных взаимодействий. Изолированные клетки печени с хорошо сохранившимися нативными свойствами позволяют подойти к роли клеточных механизмов в формировании и регуляции индивидуальной чувствительности и реактивности организма.