Экспериментальное изучение фармакокинетики и биотрансформации нового дипептидного ноотропа ноопепта

• Автор: Коротков, Сергей Анатольевич
• Шифр специальности: 14.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 136 с. : ил

ВВЕДЕНИЕ. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Хроматографические методы анализа пептидных соединений. Иммунохимические методы анализа пептидных соединений. Окулярный путь введения пептидов. Через легкие. Анатомические барьеры желудочнокишечного тракта. Методы. Способы введения ноопепта экспериментальным животным. Подбор условий хроматографирования. Выбор детектирования. Хроматографический анализ ноопепта и его метаболитов. Статистическая обработка результатов анализа. Экстракция из ткани мозга. Массспектрометрический анализ эндогенного циклопролилглицина. УФспектроскопия. Предполагаемый метаболизм ноопепта. Необходимым условием для проведения анализа пептидов в биологическом материале является возможность эффективного отделения анализируемого пептида от сопутствующих эндогенных соединений. Высокоэффективная жидкостная хроматография ВЭЖХ характеризуется высокой селективностью и высокой разрешающей способностью и может использоваться для разделения пептидов, в том числе и пептидов с близкой структурой. В качестве примера можно привести типичное хроматографическое разделение с одновременной идентификацией тестируемых пептидов, включающих синтетические энкефалины, динорфины и рэндорфины, выполненное РагиНа Д.


Метод ВЭЖХ в обращеннофазном варианте ОФВЭЖХ является частным случаем такой хроматографии. Этот вариант ВЭЖХ предполагает использование гидрофобной неподвижной
фазы, состоящей из мелкодисперсных 0 мкм сорбентов, обычно представляющих собой пористые кремнеземы, модифицированные силанами с 2 атомами углерода, и полярной подвижной фазы, поток которой, проходит по хроматографической системе при повышенном давлении. Следует отметить, что разделение пептидов возможно провести и с использованием ВЭЖХ в нормальнофазном варианте , . Однако удельный вес метода ВЭЖХ в нормальнофазном варианте в анализе пептидов в биологическом материале незначителен. Начиная с г г метод ОФВЭЖХ нашел широкое применение в области анализа пептидов в биологическом материале. С применением этого метода проводились классические работы по изучению структуры и метаболизма большого числа биологически активных пептидов . В современном анализе ОФВЭЖХ вытесняется более информативными методами при проведении идентификации пептидов, однако до настоящего времени это предпочтительный метод разделения пептидных смесей и выделения индивидуальных пептидов 9, , . Наибольшее использование в разделении пептидов получили аналитические колонки с октил и октадецилсилановыми сорбентами, имеющими средний эффективный диамезр пор от до 0 А. Эффективность таких колонок при анализе белков и пептидов составляет 0 Ыт . Режимы и условия проведения хроматографического процесса влияют как на селективность, так и на эффективность разделения в ВЭЖХ.