Потеря гетерозиготности как маркер ранних генетических нарушений при канцерогенезе шейки матки

• Автор: Блиев, Александр Юрьевич
• Шифр специальности: 14.00.14
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 130 с. : 16 ил.

1.1. Эпидемиология и этиология рака шейки матки

1.2. Этапы развития дисплазий и цервикальных карцином.

1.3. Нестабильность генома и явление потери гетерозиготности

1.4. Генетическая гетерогенность в цервикальных дисплазиях и

карциномах.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Клинические материалы

2.2. Микродиссекция послойных срезов и выделение ДНК

2.3. Тестирование клинических материалов на присутствие V и

типов

2.4. Определение потери гетерозиготности в ДНК из рака и дисплазий

шейки матки при помощи ПЦР.
2.5. Электрофорез продуктов амплификации в денатурирующем
ПОЛИАКРИЛАМИДНОМ ГЕЛЕ
2.6. Выявление продуктов амплификации после электрофоретического
РАЗДЕЛЕНИЯ МЕТОДОМ СЕРЕБРЕНИЯ
2.7. Выявление продуктов амплификации после электрофоретического
разделения методом гибридизации с радиоактивномеченным олигонуклеотидным зондом
2.8. Определение инактивированных аллелей в гене андрогенового
рецептора на Ххромосоме.
2.9. Статистическая обработка данных
Список использованных растворов.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ.
3.1. Характеристика клинических материалов
3.2. Определение и типирование папилломавируса в клинических
МАТЕРИАЛАХ.
3.3. Определение потери гетерозиготности в микродиссецированных
ПРЕПАРАТАХ РАКА И ДИСПЛАЗИЙ ШЕЙКИ МАТКИ
Исследование потери гетерозиготности в препаратах ДНК, полученных в результате микродиссекции различных участков опухоли.
Б Анализ потери гетерозиготности в ДНК из нормального эпителия
шейки матки
Сравнительный анализ потери гетерозиготности в ДНК из участков дисплазий, сопутствующих раку шейки матки. Изменение частоты при прогрессии дисплазий и рака шейки матки
Г Анализ потери гетерозиготности в ДНК из дисплазий шейки матки.
Д Сравнение результатов в дисплазииях без рака и сопутствующих раку
шейки матки.
Е Изучение гетерогенности и клональности дисплазий и опухоли
3.4. Исследование внутриопухолевой гетерогенности методом оценки
Xхромосомной инактивации.
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Недавние исследования показали, что белок Е5 способен предотвращать апоптоз, вызванный повреждением первичной структуры ДНК . Существуют данные i . МНС первого класса на поверхности клетки. Известно, что молекулы МНС I класса несут антигенпрезентирующую функцию, нарушение которой, повидимому, позволяет инфицированным вирусом папиллом клеткам избегать уничтожения иммунной системой человека. Однако, вряд ли Е5 принимает участие в поздних событиях Vиндуцированного канцерогенеза, поскольку ОРС Е5 утрачивается при интеграции вируса в клеточный геном . Продукт гена Е2 является важным регуляторным белком при продуктивной инфекции папилломавируса. Он действует как репрессор транскрипции вирусных онкогенов Е6 и Е7 i, iv, а также как активатор репликации вирусной ДНК, совместно с 1 i, , . Ввиду того, что функциональная активность Е2 не проявляется в большинстве карцином рака шейки матки вследствие делеции ОРС Е2 при интеграции . Е2 ключевой этап Vиндуцированного канцерогенеза. Генам Е1 и Е4 отводится роль необходимых участников в продуктивной инфекции. Достаточно сказать, что в случае интеграции подробнее способность папилломавируса встраиваться в клеточный геном будет рассмотрена ниже эти гены не экспрессируются, то есть злокачественная трансформация клеток может протекать без их участия. Отдельно необходимо сказать о способах инфицирования и распространении вирусной инфекции. Папилломавирусная инфекция передается половым путем, что позволяет отнести ее к группе заболеваний, передающихся половым путем.