Идентификация потенциальных клеточных субстратов для различных изоформ онкогена V-src

• Автор: Родина, Анна Анатольевна
• Шифр специальности: 14.00.14
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 125 с. : ил.

Содержание. Введение. Обзор литературы. Методы идентификации белокбелковых взаимодействий. Введение. Система двойных гибридов, разработанная i и . Развитие системы двойных гибридов. Транскрипционные факторы. Векторы. Репортерные штаммы дрожжей. Трансформация дрожжей. Конъюгация дрожжей. Скрининг библиотек. Элиминация ложноположительных результатов. Проблемы, возникающие при использовании системы двойных гибридов. Преимущества системы двойных гибридов. Возможности использования системы двойных гибридов. Изучение ДНКбелковых взаимодействий. Обнаружение активирующих последовательностей ДНК. Идентификация ДНКсвязывающих белков. Метод обнаружения ДНКсвязывающих доменов. Система трех гибридов. Обнаружение белокбелковых взаимодействий в клетках животных. Метод количественной репликации. Стратегия отбора взаимодействующих белков в ядре. Бактериальная система двойных гибридов. Заключение. Материалы и методы. Список использованных растворов и сред. Клеточные линии, бактериальные и дрожжевые штаммы, использованные антитела.


В следствие приведенных особенностей белка , поиск его партнеров является очень акгуальной проблемой на данный момент. В настоящее время выявлено около белков, которые потенциально могут являться субстратами ррэтс, т. Оригинальность полученных в этой работе данных заключается в том, что исследуемые белки v и 2 являются новыми, не известными ранее партнерами белка . Результаты по сродству белка 2 к разновидностям белка v из клеточных линий с различной метастатической активностью дают возможность делать предположения о роли этого взаимодействия в процессах ассоциированного метастазирования. Была исследована степень продукции белка 2 в линиях трансформированных фибробластов хомяка, отличающихся по ряду параметров, обнаружены определенные корреляции. Исследована локализация и возможность фосфорилирования белка 2 в трансформированных клетках хомяка. Одним из путей передачи сигнала, в котором принимает участие белок , является сигнальный путь через интегрины. Он активируется при взаимодействии белков экстраклеточноо матрикса со своими трансмембранными клеточными рецепторами интегринами. Это взаимодействие приводит к аутофосфорилированию подмембранной киназы фокальной адгезии . Затем взаимодействует с белком . Последствием этого взаимодействия является фосфорилирование по ряду тирозиновых остатков. Затем белки и паксшшн через промежуточные адапторные белки 2 и взаимодействуют с белками, регулирующими активностью белка такими как и далее этот сигнальный путь идет через киназы в ядро клетки М. Т. , .