Наследственные аспекты невынашивания беременности

• Автор: Климова, Ольга Ивановна
• Шифр специальности: 14.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 104 с. : 3 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
Список сокращений
ВВЕДЕНИЕ
Глава I. Обзор литературы
Глава И. Материалы и методы исследования
Глава ПІ. Клиническая характеристика обследования
женщин
Глава IV. Результаты клинико-лабораторной и функциональной
диагностики
Глава V. Обсуждение результатов
ВЫВОДЫ
Практические рекомендации
Список литературы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ЗРП - задержка роста плода
КОК - комбинированные оральные контрацептивы ЛГ - лютеинизирующий гормон НБ - невынашивание беременности ПНБ - привычное невынашивание беременности ПЦР - полимеразная цепная реакция СА - самопроизвольный аборт ФСГ - фолликулостимулирующий гормон ХА - хромосомные аномалии ХГ - хорионический гонадотропин УПБ - угроза прерывания беременности XH3JI - хронические неспецифические заболевания легких ССЗ - сердечно-сосудистые заболевания GPIIIa - glycoprotein Ilia HLA - histocompatibility leucocyte antigens

ВВЕДЕНИЕ Актуальность проблемы
Невынашивание беременности - главный приоритет научно-практической проблематики отечественной репродуктологии.
По данным Коллегии МЗРФ(2002), ежегодно в стране почти каждая пятая беременность завершается самопроизвольным выкидышем, что в сумме составляет 180 тыс. нерожденных желанных детей. В настоящее время нет тенденции к снижению уровня невынашивания и недонашивания беременности, что в условиях демографического кризиса («русский крест») определяет недостаточный прирост населения страны.
Частота этого основного вида акушерской патологии остается стабильной в течение многих лет и составляет 15-20%. Подобное явление, получившее название «очень ранние потери беременности», имеет место в популяции, вероятно, как фактор естественного отбора, препятствующий развитию генетически аномальных плодов.
Установлено, что риск потери беременности после первого выкидыша составляет 13-17%, что соответствует частоте спорадического выкидыша в популяции, тогда как после двух предшествующих самопроизвольных прерываний риск потери желанной беременности возрастает более чем в два раза и составляет 36-38%.
В этиологической структуре привычного выкидыша выделяют генетические, анатомические, инфекционные, эндокринные и иммунологические факторы. При исключении всех вышеперечисленных причин, ведущих к потерям беременности, остается группа больных, генез привычного выкидыша которых представляется неясным, так называемые идиопатические.

Исследование крови на носительство аллеля PL-АП гена GP Ша Забор материала
Отбирали 100 мкл периферической крови в пробирку, содержащую 25 мкл 50 мМ раствора нейтрального Na - ЭДТА ("Sigma", США), и перемешивали. В таком виде кровь может храниться 15-20 суток в бытовом морозильнике (около - 12°).
Получение ДНК-матрицы К 125 мкл смеси крови и раствора Na - ЭДТА добавляли 125 мкл раствора 0,15 М NaCl ("Реахим", степень чистоты ОСЧ или ХЧ), 0,1 % тритона - XI00 ("Sigma", США) перемешивали и инкубировали при комнатной температуре 20 мин. Затем осаждали центрифугированием на микрофуге "Eppendorf (Германия) 10 мин при 10 000 об/мин. Убирали супернатант. Осадок суспендировали в 200 мкл 0,1 % тритона - XI00, полученную смесь центрифугировали 10 мин при 10 000 об / мин, супернатант убирали. Полученный осадок дважды промывали 500 мкл 10 мМ трис - НС1 ("Sigma", США) путем суспендирования и осаждения центрифугированием при вышеуказанных условиях. Затем ресуспендировали в 50 мкл 10 мМ трис - НС1 и выдерживали 10 мин на кипящей водяной бане с последующим быстрым охлаждением (для денатурации ДНК и получения гомогенного раствора).
Электрофорез в агарозном геле Электрофорез ДНК проводили на аппарате "Bio - Kad" в 0,8 % агарозном геле ("Sigma", США) в трис - ацетатном буфере ("Реахим", степень чистоты ОСЧ или ХЧ) с бромистым этидием ("Sigma", США) при напряженности поля 20 мА и 150 V. Краска для нанесения образцов содержала 0,25 % бромфенолового синего, 0,25 % ксиленцианола и 50 % глицерина в воде (все - "Sigma", США).
Полимеразная цепная реакция