Разработка тест-систем и технических средств ускоренной оценки безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля

Разработка тест-систем и технических средств ускоренной оценки безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля

Автор: Светличкин, Вячеслав Владимирович

Шифр специальности: 16.00.06

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2002

Место защиты: Москва

Количество страниц: 350 с. : ил

Стоимость: 250 руб.

Разработка тест-систем и технических средств ускоренной оценки безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля  Разработка тест-систем и технических средств ускоренной оценки безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля 

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.
ОБЗОР ЛИТЕРАТ УРЫ.
ГЛАВА 1. Современное состояние оценки безопасности и качества объектов ветеринарносанитарного контроля
Критерии и методы оценки безопасности и качества
животноводческих производств и продукции.
Микробные контаминации и их оценка.
Идентификация продукции и определение
фальсифицирующих примесей
Методы генной диагностики и их роль в оценке безопасности
и качества объектов ветеринарносанитарного контроля
Автоматизированные системы и приборы контроля качества и
безопасности.
ДНКмикрочиповая технология
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ .
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследований
Микробиологические методы исследований
Методы бактериологического анализа эшерихий, сальмонелл,
стафилококков.
Определение чувствительности бактерий к действию
антибиотиков
Метод выращивания бактерий в полужидком агаре на
мембранных фильтрах.
Получение и определение Ьформ бактерий.
Электронномикросколические исследования.
Методы ДНКдиагностики III
2.3.1. Выделение и очистка ДНК бактерий.
2.3.2. Выделение и очистка ДНК из тканей животных.
2.3.3. Включение тритиевой метки в ДНК методом никтрансляции
2.3.4. Включение биотиновой метки в ДНК методом никтрансляции
2.3.5. Включение метки в ДНК методов рассеяной затравки
2.3.6. Получение меченых ДНКзондов с помощью полимеразной цепной реакции.
2.3.7. Точечная ДНКгибридизация с биотиновой меткой
2.3.8. Гибридизация ДНК с тритиевой меткой
2.3.9. ДНКгибридизация с использованием тестнабора с ДНК
зондами меченными биотином.
2.3 Методика гибридизации колоний
2.3 Методика полимеразной цепной реакции.
2.4. Методика иммудиффузии в геле.
2.5. Статистическая обработка результатов.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
ГЛАВА 3. Разработка методов и тестсистем индикации и идентификации микроорганизмов в объектах ветеринарносанитарного контроля на основе ДНКдиагностики.
3.1. Идентификация бактерий в объектах ветеринарносанитарного и экологического контроля на основе гомологии нуклеиновых кислот методом гибридизации колоний
.2. Разработка модификации метода ускоренной идентификации
бактерий на основе гомологии ДНК меченной биотином
3.3. Разработка тестсистем индикации бактерий с
использованием генных зондов.
3.4. Разработка метода дифференциального определения
вегетативных и Ьформ бактерий в объектах ветеринарносанитарного контроля с использованием ДНКгибридизации
на мембранных фильтрах.
Индикация бактерий в объектах ветеринарносанитарного контроля на основе ПЦР с меченными
дезоксинуклеозидтрифосфатами
ГЛАВА 4. Разработка методов и тестсистем идентификации
видовой принадлежности мяса и мясопродуктов.
Разработка методов и тестсистем идентификации говядины
на основе ДНКдиагностики
Разработка тестсистемы определения видовой
принадлежности мяса и субпродуктов на основе
иммунодиффузии в геле
ГЛАВА 5. Приборная реализация ускоренных методов оценки
безопасности качества.
Разработка автоматизированных систем на основе ДНК
диагностики.
Разработка тестсистем и технических средств для проведения
анализа в нестационарных условиях.
ГЛАВА 6. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Общими свойствами протопластов и сферопластов является их способность к неравновеликому делению и почкованию. Они широко распространены как в природе, так и в организме животных и человека, однако их выделение затруднено, так как они имеют либо дефектность клеточной стенки, либо ее полное отсутствие, в результате чего не окрашиваются и не выявляются методами световой микроскопии Прозоровский С. В.,, Тимаков В. Д.,, ,, i . Для форм характерны колонии, врастающие в питательный субстрат, способные проходить через бактериальные фильтры благодаря особым способам репродукции. Изменение характера роста и обменных процессов по сравнению с исходными формами, способность к стабилизации и другие признаки, существенно отличают формы от всех других групп микроорганизмов Шлегель Г. Гетероморфиые формы, сферопласты и протопласты могут являться потенциальными предшественниками форм, т. Различают нестабильные формы, легко реверсирующие в отсутствие трансформирующего фактора и являющиеся выражением фенотипических изменений бактерий, и стабильные формы, утратившие способность к реверсии и наследственно закрепленные. Из нестабильных форм выделяют условностабильные. Они отличаются отсутствием способности к реверсии при пассировании на средах без трансформирующего агента. Могут реверсировать при дополнительных изменениях условий культивирования Билич ГЛ. Габрилович И. М.,
Стент Г. Шапиро Джеймс А. В.,. Как стабильные, так и нестабильные формы характеризуются значительным полиморфизмом, независимо от фазы развития и условий культивирования. Павлова И. Б.,, ,. Различия в структуре клеточной стенки стабильных и нестабильных форм особенно наглядны у форм грамотрицательных бактерий. Изменения бактериальной клетки при трансформации не исчерпываются клеточной стенкой и мембранным аппаратом. Эти изменения на поздних стадиях трансформации затрагивают и генетический аппарат клетки. Существует также явление спонтанной трансформации бактерий, которое представляет собой естественную, генетически запрограммированную форму развития популяции, скорость и степень проявления которой определяются условиями среды обитания Гинцбург А. Л., Романова Ю. М.,, Прозоровский С. В., и др. I ,, М. Приведенные данные, касающиеся полиморфизма форм, архитектоники колоний и взаимоотношения между отдельными клетками внутри колонии, показали перспективность дальнейшего исследования бактерий на популяционном уровне Павлова И. Б.,, Т. М., , i . Колония это популяция микроорганизмов, полученная из одной клетки. В процессе развития колонии возникают измененные формы в результате мутаций отдельных генов или в результате перестройки
генетического материала. Изменчивость состава популяции отражает процессы микроэволюции. К такого рода явлениям относится, прежде всего, так называемая диссоциация бактерий . Диссоциация бактерий постоянный процесс и потому легко обнаруживается изменчивость внешнего вида колоний, причем одновременно с этими изменениями нарушается и целый ряд других свойств клетки. Изменчивость такого рода может иметь большое значение для выживания бактерий, а также представляет большой практический интерес, поскольку в процессе диссоциации происходит изменение степени вирулентности патогенных бактерий, интенсивность синтеза биологических активных соединений соответствующими продуцентами и т. Билич Г. Л., Габрилович И. М.,. Ьшероховатые или складчатые. Диссоциация отличается от случайных мутаций высокой частотой возникновения вариантов и их взаимных переходов. Частота переходов характерна для определенных штаммов, т. Сассон А. Диссоциацию наблюдали, прежде всего, у патогенных бактерий. Особое внимание этот процесс привлекает потому, что с изменением характера колоний связано изменение вирулентности и антигенных свойств микроорганизмов Милько Е. С., Егоров Н. С.,, Николаев Ю. А., Воронина , , i . I ,, ii . В колониях вариантов бактерии имеют частично редуцированную полисахаридную часть липополисахарида внешней мембраны клеточной стенки, следовательно клетки более гидрофобны. Также часто образуются инволюционные клетки, т.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

10.02.2018

Бесплатные авторефераты диссертаций

Дорогие друзья! Мы развиваем наш сервис и спешим сообщить, что на нашем сайте для ознакомления доступны афторефераты диссертаций. На данный ...

02.01.2018

С Новым 2018 Годом!

Поздравляем Вас с Новым 2018 Годом и наступающим Рождеством! Желаем Счастья и новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.032, запросов: 105