Разработка пробиотического препарата окарин для медицины и ветеринарии

• Автор: Кульчицкая, Марина Александровна
• Шифр специальности: 16.00.03, 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Нижний Новгород
• Количество страниц: 188 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Микрофлора кишечника и ее роль в обеспечении состояния здоровья организма хозяина

1.1.1. Колонизационная способность нормальной микрофлоры

1.1.1.1. Адгезивная активность

1.1.1.2. Антаг онистическая активность

1.1.2. Нарушения колонизационной резистентности кишечника

1.1.2.1. Дисбактериоз и его клинические проявления у людей

1.1.2.2. Дисбактериоз в животноводстве.

1.2. Пробиотики в системе мер по коррекции микробиоценоза

кишечника при дисбактериозах
1.2.1. Колисодержашие препараты
1.2.2. Технология производства препаратовпробиотиков
1.2.3. Новый препаратпробиотик окарин
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы и методы
2.2.1. Материалы
2.2.2. Методы
2.2. Доклиническое изучение окарина
2.2.1. Биологическая характеристика производственных
штаммов, входящих в состав окарина
2.2.1.1. Морфологобиохимическая характеристика штаммов ii i Г1, Г2, Г3 и i Г4
2.2.1.2. Геномная характеристика штаммов ii i Г1, Г2, Г3 и i Г4
2.2.2. Специфическая активность окарина, как комплекса
бактериальных культур
2.2.2.1. Антагонистическая активность штаммов окарина к штаммам эубиотикам.
2.2.2.2. Антагонистическая активность штаммов окарина к тесткультурам патогенным и условнопатогенным
2.2.3. Изучение лизогенности культур окарина на разных
этапах технологического процесса
2.2.4. Изучение доклинической безопасности культур окарина
2.2.4.1. Изучение острой и хронической токсичности
2.2.4.2. Изучение безвредности
2.2.4.3. Изучение токсигенности
2.2.4.4. Изучение вирулентности
2.2.4.5. Изучение аллергенности
2.3. Создание промышленной технологии получения окарина
2.3.1. Определение оптимальной среды культивирования
2.3.2. Разработка промышленной технологии
2.3.3. Создание новых лекарственных форм
2.3.3.1. Таблегированная форма
2.3.3.2. Порошки
2.3.3.3. Суппозитории
2.3.4. Разработка методов контроля разных лекарственных форм окарина
2.4. Клиническое изучение эффективности окарина
2.4.1. Апробация окарина в ветеринарной практике
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Первый метод предполагает регистрацию факта взаимодействия клеток с помощью светового микроскопа. Второй метод включает приемы культивирования для учета жизнеспособных микроорганизмов, прикрепившихся к клеткам и тканям. Третий метод предусматривает введение изотопной метки 3Н или 8С и дальнейший учет связавшихся микробных клеток по этой метке. Одной из важных сторон защитной функции бактерий нормальной микрофлоры является антагонистическая активность в отношении патогенных и условнопатогенных микроорганизмов. Благодаря биохимической активности микроэкологической системы пищеварительного тракта и образованию микрофлорной субстанции с выраженной антагонистической активностью, попадающие извне патогенные микроорганизмы быстро элиминируются из кишечника. Это предотвращает колонизацию ими разных отделов желудочнокишечного тракта и развитие инфекционного процесса , ,1. В некоторых случаях колонизационная резистентность реализуется за счет сочетания антагонистического действия определенных представителей нормальной микрофлоры и или их метаболитов и появления специфических антител ,5. Многие исследователи ,4 доказали роль лактобацилл в поддержании микробного баланса, благодаря продукции молочной кислоты и специфической адгезии к эпителию толстой кишки. Показана их антагонистическая активность в отношении патогенных бактерий, в частности, ii 9,,. Бифидобактерии, продуцируя уксусную и молочную кислоты препятствуют размножению гнилостной и патогенной микрофлоры, нормализуют перистальтику, а также способствуют всасыванию кальция, железа, витамина и участвуют в процессах витаминообразования ,5,7,9. Ряд авторов отметили, что кишечные палочки влияют на развитие и статус местной иммунной системы, связанной со слизистой оболочкой и обеспечивают защиту хозяина от инфекций, обусловленных энтеропатогенными микроорганизмами. Кишечная палочка принимает участие в расщеплении белков и углеводов, метаболических превращениях холестерина, желчных кислот, жирных кислот 5,,5,5. Показано, что кишечные палочки также обладают канцеролитическими свойствами. Так, А. О.Карапетян выделила из кишечника здоровых лиц штаммы кишечной палочки и фекального энтерококка, которые i vi обладали способностью вызывать некроз раковых клеток. В то же время, кишечные палочки, выделенные от онкологических больных, таковыми свойствами не обладали ,,8. Установлено, что кишечная палочка синтезирует 9 витаминов В В2, В6, В з, Вс, К, никотиновую и пантотеновую кислоты, биотин . Кроме того, бактерии . Е.соН ,,,,3. Немаловажными регуляторами роста бактерий в кишечнике являются различные экзоэнзимы и бактериоцины, микроцины, колицины, лизоцим. Большинство авторов считают, что синтезируемые бактериоцины отличаются от других антибиотиков узким спектром антибактериального действия, так как специфически подавляют рост бактерий того же или филогенетически родственных видов ,9,5. Обладая такими свойствами, патогенные энтеробактерии, например, подавляют нормальную микрофлору и беспрепятственно распространяются в кишечнике. Возможно, колицины у представителей нормальной кишечной палочки, подавляя беспредельный рост микроорганизмов, играют роль факторов естественной устойчивости ,,1,5. Следует отметить, что КР обеспечивается не только представителями преобладающей анаэробной микрофлоры, но и факультативно аэробными бактериями, значение которых с х годов стало искусственно занижаться. Однако, защитные свойства Е. Н обусловлены не только антагонизмом на метаболическом уровне как у бифидобактерий, бактероидов, лактобацилл, но и могут быть опосредованными через макроорганизм. В то же время, интимная связь Е. Н с макроорганизмом, играющая такую важную роль в созревании эпителия слизистой оболочки кишечника и формирования так называемого естественного иммунитета, обусловливает и более агрессивное ее повеление 5,,. Еще в г работами И. И.Мечникова показано, что нормальная микрофлора играет важную пусковую роль в механизме формирования иммунитета и специфических защитных реакций в постнагальном развитии макроорганизма ПО.