Разработка и усовершенствование технологии промышленного производства биопрепаратов для специфической профилактики и диагностики бруцеллеза, эшерихиоза и сальмонеллеза животных, рожи свиней, пуллороза-тифа птиц и вибриоза рыб

• Автор: Зенов, Николай Иванович
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 49 с. : ил.; 20х14 см + Прил. (124с. )

Сравкнтслышс данные по составу и эффективности метательных сред, используемых для культивирования бруцелл пл. Показателн . Состав интателысой среда 5 V 9 . Пептон Мартена Печеночный экстракт Перевар Хоттютера Пептон ферментативный 0. Глюкоза 1 Агар микробиологический Глицерин 0,5 Перевар Хотжшера Дрожжевой экстракт 0, Глюкоза 1 Глицерин 1 Сыворотка крупного рогатого скота 1 I 0. Стсришщит 0 С мин. Время культивирования час. Выход доз с 1 я 6,4 шт. Цена 1 л иена г. В процессе исследований определен следующий алгоритм управления периодическим глубинным культивированием бруцелд игг. Дота зпеевного материала 1,,0 млрд м. Температура культивирования . Концентрация водородных ионов 7,0 0. Уровень растворенного кислорода 0 6 час. Время культивирования 1 час. В качестве псногаснтсля при глубшшом культивировании били исследованы растительные масла подсолнечное, соевое, оливковое, фи рыбий, каталоговий и поасрхвосгаочпстшные вещества ПАВ твин , эмульсия ГТМСО, длсконоль, пропииол Б0. Наибоясе эффективным и не влияющим на биологические свойства бруцедл является пропииол В0 в концентрации 0,0, к обьсму баксушесшш. Для концентрирования бактериальной массы бруцедл нами использованы флокулянти желатина, хитин и натриевая соль карбоксимсгилцсллюдозы и метод удьтрафидьтрацки. Рекомендована, как наиболее эффективная из флокулянти, натриевая соль гзрбоксикспшэсллюлозы в 2 концентрации из расчета 0,2 сухою вещества к объему бактериальной суспензии. Осаждение бруцадя при температуре С происходило в ечешсе часов при 6,,1 шт. Применение промышленной ультрафильтрациотюй установки УПВ6 с диаметром пор тыс. К осажденной бакмассс бруцедл добавляли среду высушивания, состоящую ю желатина и сахарозы из расчета 3 части бакмасеы и 1 часть среда высупптватшя, расфасовывали во флаконы и подвергали замораживанию при температуре минус С и лиофклюяции в течение часов. Результаты исследований, доказывающие стабильность сохранения культуральных, биохимических н биологических свойств бруцеля штаммов X и , выращенных глубинным методом, представ. Диссоциация с акрифлавшюм термоаидютинации истод Уайт Видсона р. Агглютинируете с Зсыиоротхами Всыворотхоми подо, реакция отриц. Про1мьобрцс. ЛггдютикогемиыЙ титр у морских СВИНОК не ниже 1 отр и цат. Количество жилых бруцелл в вакципс через мес. Иммуногенна активность для морских евннох ,5 ,5
Зшюташс Серии сухих живых бруцеллезных вакцин т штаммов и вс пжгамшпромвш, безвредны и соответствуют ОСТу 5 шт. Было выпущено за период с по п более 0 млндоз сухой живой вакцины против бруцеллеза из шг. К более 0 млядоз из шг Рекламации па вшхжш не поступили. Внедрение в производственную практику модифицированного биохимического зксярессметода определено числа живых бруцелл в протнвобруцеллеишх вакцинах и штаммов В. В основе метода определения количества живых бруцелл по их дегидрогеназ ной активности лежит принцип биологического окисления восстановления, суть которого сводится к тому, что некоторые вещества оргаиичесхие кислоты, краски, сахара н пр. Ю1Сн донаторами водорода и акцепторами кислорода, причем, в живых клетках при отсутствии свободного кислорода, опцсллсж водорода ОКИС. ТС1ШС может происходить в анаэробных условиях только при наличии ферментов дегидрогеназ. В качестве индикатора использовали метиленовий синий, который, присоединяя два втома водорода, восстанавливается и становится бесцвет ным. Время редукции метиленового синего обратно пропорционально концегграции живых бруцелл и зависит от температуры, при которой происходит определение, ог создания анаэробных условий для исключения окисления метиленового синего кисюродом воздуха и учета точного врсдасии в секундах. В гг. Для исследований использовали образам 7 серий вакцины из цгг. Результаты сравнительной оценки ферментативного и культурального методов определения количество доз в вакцине из пи. М 3. Дпнные таблицы 3 демонстрируют отсутствие статистически достоверной розницы р0, между средним количеством доз в образцах серый вакцины, установленным при проверке биохимическим и бактерткь логичсским методами и равных соответственно ,5 0, и ,9 0, ют.