Количественная характеристика антителосекретирующих клеток в органах и тканях иммунной системы мышей в процессе иммуногенеза

• Автор: Жаданов, Алексей Игоревич
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 136 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

I. ВВЕДЕНИЕ5.

2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.Е Общая характеристика органов и клеток иммунной системы.И.

2.2. Механизмы формирования иммунного ответа.

2.3. Иммунологические методы исследованийЗЕ

2.4. Количественная оценка различных типов клеток иммунной системы ЕЫБРОТметодом.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

4 РЕЗУЛЬТАТЫ РССЛЕДОВАНИЙ.

4 1. Разработка методов ЕЕБРОТ и ИФА для характер и стики гуморального

иммунного ответа и определение общего количества ангителосекрс ирующих
клеток у интактных беспородных мышей и мышей линии ВАЕВс
4.1.1. Выделение, очистка и идентификация вирусных антигенов.
4.1.2. Разработка непрямого и сэндвичвариантов твердофазного ИФА
4.1.3. Разработка ЕЬБ РОТметода для количественной характеристики АСК
4.1.4. Количественная характеристика фСК, 1М, Асекретирующих клеток в лимфоидных органах интактных мышей.
4.2. Количественная характеристика антителосекретирующих клеток в органах и
тканях иммунной системы мышей в процессе иммуногенеза
4.2.1. Характеристика количественных изменений антителосекретирующих клеток в органах и тканях лимфоидной системы мышей при формировании иммунного ответа на вирусные антигены ВТГС и РВ
4.2.1.1. Характеристика иммунного ответа в периферических лимфатических узлах паховых и подколенных
4.2.1.2. Характеристика иммунного ответа в селезнке.
4.2.1.3. Характеристика иммунного ответа в косгном мозге.
4.2.1.4. Характеристика иммунного ответа в ЛТК.
4.2.1.5. Характеристика иммунного ответа в тимусе
4.2.1.6. Динамика количественных изменений АСК в крови.
4.2.1.7 Динамика изменений титра вирусспецифических антител в
сыворотке крови иммунных мышей.
4.2.2. Оценка иммуногенной активности вакцины против рожи свиней и характеристика количественных изменений антителосекретирующих клеток в
процессе иммунного отвега на бакгериальный антиген Е.гизорайае
4.2.2.1. Характеристика иммунного ответа в периферических лимфатических
узлах паховых и подколенных
4 2.2.2. Характеристика иммунного о твега в селезнке
4 2.2.3. Характеристика иммунного ответа в костном мозге.
4.2.2 4. Характеристика иммунного ответа в лимфоидной ткани ассоциированной со слизистыми оболочками.
4.2.2.5. Характеристика иммунного ответа в тимусе
4.2.2.6. Количественная характеристика антителосекретирующих клеток в
смыве с перитонеальной полости.2.
4.2.2.7. Количественная характеристика АСК в крови.3.
4.2.2.8. Определение уровня 1, 1М, в сыворотке крови мышей
после вакцинации и контрольного заражения5.
5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ.9.
6 ВЫВОДЫ.
7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.4.
8 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.5.
ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕННЫХ НАЗВАНИЙ
иммуноглобулин ы иммуноглобулины класса изотипа в М иммуноглобулины класса изотипа М 1А иммуноглобулины класса изотипа А
, А СК клетки, секретирующие иммуноглобулины соответствующего класса изотипа
АСК антителосекретирующие клетки АПК антигеипрезентирующая клетка АЭК аминотгилкарбазол
ВТГС вирус трансмиссивного гастроэнтерита свиней
ОФД ортофенилендиамин
РВ ротавирус свиней
ЛГК лимфоидная ткань кишечника
ЛТЛ лимфоидная ткань лгких
ТЕбуфер ТрисНСЬбуфер, 8,
МНК мононуклеарные клетки
МПА мясопептонный агар
МЛБ мясопептонный бульон
ЦСК цитокинсекретирующис клетки
ЭБ эритроциты барана
ФБ фосфатносолевой буфер, 7,2 7,
НЦмембрана иитроцеллюлозная мембрана
ВВЕДЕНИЕ


С помощью разноплановых методов ЕЫбРОТ, ИФА, ЕРОК впервые проведены комплексные исследования по изучению динамики формирования гуморального и клеточноопосредованного иммунного ответа у мышей на антигены различной природы и патогенности. Получены новые данные о количественных изменениях 1сС, , Асскретирующих клеток, ЕРОК в органах и тканях иммунной системы на отдельных этапах иммуногенеза. Впервые дана количественная характеристика , 1М, А секретирующих клеток в лимфоузлах, селезенке, костном мозге, лимфоидной ткани слизистых оболочек, крови и тимусе мышей в процессе формирования посгвакцинального и постинфекционного иммунного ответа. АСК и РОК в органах и тканях лимфоидной системы иммунных и неиммунных мышей в процессе иммуногенеза после заражения патогенным штаммом Е. Шае с использованием современных методов ЕШРОТ, ИФА и ЕРОК. ВИЭВ, Москва, . Публикации. По материалам диссертации опубликовано десять научных работ. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 6 стр. Материалы диссертации иллюсгрированы одной схемой, 6 таблицами и рисунками. Список литературы включает 3 источника отечественных и 4 зарубежных авторов. Иммунная система сформировалась в процессе эволюции позвоночных для защиты от инфекций, обеспечения индивидуальности и целостности организма, элиминации чужеродных агентов как экзогенной, так и эндогенной природы. Устойчивость организма складывается из множества различных защитных механизмов, которые можно разделить на две основные группы естественный нсспецифический или врожднный иммунитет и приобретнный специфический. Механизмы неспецифического иммунитета действуют против многих патогенов и не усиливаются после их повторного воздействия. Специфический приобретнный иммунитет является основным компонентом иммунной системы. В него вовлечены различные клеточные и молекулярные механизмы, он сохраняет многие механизмы врожденного иммунитета, необходимые для элиминации патогена и добавляет к ним три важнейших дополнительных свойства специфичность, иммунологическую память и способность отличать свое от чужого. Специфический иммунитет обеспечивается системой лимфоидных органов, основой функционирования которых являются иммунокомпетентные клетки. Органы иммунной системы разделяются на центральные и периферические. К первым относя тся костный мозг, тимус и фабрициева сумка у птиц, ко вторым селезенка, лимфатические узлы и лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми оболочками i i i. В свою очередь, подразделяется на i i i лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми оболочками кишечника, i i i лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми оболочками бронхов, i i i лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми оболочками носоглотки и ii i i, лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистыми оболочками кожи. Все органы и ткани связаны между собой кровеносными и лимфатическими сосудами, по которым осуществляется рециркуляция лимфоцитов. Костный мозг. В красном костном мозге содержатся полипотснтные стволовые кроветворные клетки предшественники всех клеток крови и лимфы Хэм А. Кормак Д. Они способны образовывать колонии кроветворных и лимфоцитообразующих элементов, каждый из которых является клоном, возникшим из одной клетки. Е.А. I Е. А., i . Из гематопоэтической стволовой клетки развиваются общая миелоидная и общая лимфоидная клеткипредшественники. Лимфоидный предшественник порождает Т и В лимфоциты, клетки, миелоидный мегакариоциты предшественники тромбоцитов, гранулоциты нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, полиморфноядерные лейкоциты, тучные клетки и моноциты, которые превращаются в макрофаги. Эритроидная линия продуцирует красные клетки крови эритроциты, схема 1. Часть стволовых лимфоидных клеток мигрирует в тимус, где они дифференцируются в Тлимфоциты. Каждому типу лимфоидных клеток и каждому этапу их дифференцировки соответствуют наборы рецепторов, обычно выявляемых с помощью моноклональных антител. Кластер моноклональных антител, реагируя со специфическими полипептидами на поверхности В и Тлимфоцитов, макрофагов, нейтрофилов и клеток, выявляет их поверхностные маркеры, по наличию или отсутствию которых можно судить на каком этапе развития находится данная клетка.