Изучение иммунобиологических свойств вакцин против оспы овец и оспы коз

• Автор: Гарькин, Алексей Викторович
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Владимир
• Количество страниц: 139 с. : ил.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика заболевания и возбудителей оспы овец и оспы коз

1.1.1. Таксономическая принадлежность вирусов оспы овец и оспы коз

1.1.2. Антигенное родство вирусов оспы овец и оспы коз

1.1.3. Устойчивость вирусов оспы овец и оспы коз, их свойства и способы передачи

1.1.4. Клинические признаки заболевания и патоморфогенез при оспе овец и оспе коз

1.2. Эпизоотическая ситуация по оспе овец и коз в мире, странах СНГ и Российской Федерации

1.3. Культивирование вирусов оспы овец и оспы коз

1.4. Борьба с оспой мелкого рогатого скота, иммунитет и средства специфической профилактики заболевания

1.4.1. Историческая справка о борьбе с оспой овец и оспой коз

1.4.2. Иммунитет при оспе овец и оспе коз и методы его

изучения
1.4.3. Вакцины против оспы овец
1.4.4. Вакцины против оспы коз
1.4.5. Ассоциированные вакцины против оспы и других инфекций мелкого рогатого скота
1.5. Заключение по обзору литературы
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1.1. Материалы для исследований
2.1.1.1. Вирусы
2.1.1.2. Культуры клеток
2.1.1.3. Питательные среды, сыворотки, растворы
2.1.1.4. Реактивы
2.1.1.5. Оборудование
2.1.1.6. Животные
2.1.2. Методы исследований
2.1.2.1. Приготовление тканевой суспензии
2.1.2.2. Определение инфекционной активности вируса оспы коз
2.1.2.3. Изучение эвтектических свойств защитных сред
2.1.2.4. Составление и лиофилизация экспериментальных образцов вирусвакцин
2.1.2.5. Определение стерильности, безвредности, биологической, антигенной и иммуногенной активности вирусвакцин
2.1.2.6. Статистическая обработка результатов исследований
З.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Изучение эпизоотической ситуации по оспе овец и коз в Российской Федерации в гг.
3.1.1. Эпизоотическая ситуация по оспе мелкого рогатого скота
и вакцинация овец и коз против оспы в России в гг.
3.1.2. Анализ вспышки оспы овец и коз в Еврейской автономной области и Приморском крае в году
3.2. Исследование биологических свойств вирулентного штамма Приморский вируса оспы коз
3.2.1. Выделение вируса и определение титра инфекционной активности
3.2.2. Изучение клинических признаков заболевания и оценка патогенных свойств вируса на восприимчивых животных
3.2.3. Адаптация вируса к первичным и перевиваемым культурам клеток и изучение культуральных свойств
3.3. Изучение культуральных свойств аттенуированного
штамма ВНИИЗЖ вируса оспы коз
3.4. Оценка свойств различных защитных сред при изготовлении сухой культуральной вирусвакцины против оспы коз
3.5. Изучение иммунобиологических свойств вирусвакцин против оспы при гомологичной и перекрестной иммунизации
3.5.1. Исследование реактогенности и безвредности вирусвакцин
3.5.2. Оценка эффективности вирусвакцин с использованием метода контрольного заражения животных
3.5.3. Изучение поствакцинального гуморального иммунитета
3.6. Изучение иммунобиологических свойств ассоциированной вирусвакцины против оспы овец и оспы коз
3.7. Биологическая активность вирусвакцины против оспы овец из штамма ВНИИЗЖ в условиях длительного хранения
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
5. ВЫВОДЫ
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ 2
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВНИИВВиМ Всероссийский научноисследовательский институт ветеринарной микробиологии и вирусологии
ВНИИЗЖ Всероссийский научноисследовательский институт
защиты животных
ВОК вирус оспы коз
ВОО вирус оспы овец
ГЛА гидролизат лактальбумина
ГОА гидрат окиси алюминия
ИДзо инфицирующая доза
ИФА иммуноферментный анализ IА
ККЭО культура клеток кожи эмбрионов овцы МПА МПБ мясопептонный агар бульон МЭБ Международное эпизоотическое бюро ГГВД полевая вакцинирующая доза ПЗБ Покровский завод биопрепаратов ПО культура клеток почки овцы
ПК ПТ ПЯ культуры клеток почки козленка теленка ягненка
ПЦР полимеразная цепная реакция
ПЭО культура клеток почки эмбрионов овцы
РДП реакция диффузионной преципитации
РДСК реакция длительного связывания комплемента
реакция нейтрализации
тиогликолевая среда
ТТ ТЯ тестикулярные культуры клеток теленка ягненка ТЦД тканевая цитопатическая доза ХАО хориоалантоисная оболочка ЦПД цитопатогенное действие
ВНК перевиваемая культура клеток почки сирийского хомячка
перевиваемая культура клеток гонады козы
перевиваемая культура клеток коронарных сосудов теленка
перевиваемая культура клеток кожи кролика
V перевиваемая культура клеток почки зеленой мартышки
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Ветеринарная патология, 9, г. ФГУ ВНИИЗЖ в гг. Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 9 страницах, состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов собственных исследований, обсуждения, выводов и практических предложений, содержит таблицы и рисунков. Список использованной литературы включает 0 наименований, из них 1 отечественных и 9 зарубежных. В приложении представлены документы, подтверждающие достоверность результатов работы, ее научную и практическую значимость. Возбудителем оспы мелкого рогатого скота являются ДНКсодержащие эпителиотропные вирусы, относящиеся к семейству xvii, роду ixvi. В г. XII сессии Генерального Комитета МЭБ оспу овец внесли в список наиболее опасных болезней животных список А, подлежащих декларации в случае возникновения. Опасность оспы мелких жвачных животных характеризуется высокой контагиозностью и летальностью, которая при доброкачественном течении составляет 0 и достигает 0 в случае осложнений при присоединении секундарных инфекций. Заболевание характеризуется высокой степенью контагиозности, поэтому основным методом борьбы с инфекцией является профилактическая иммунизация восприимчивого поголовья животных. Морфологическая характеристика и структура ВОО и ВОК была изучена рядом исследователей ,,,,5. При значительном сходстве структуры обоих вирусов, Е. И. Скалинским были выявлены субмикроскопические маркеры ВОК, отличающиеся от маркеров, свойственных ВОО и позволяющие предположить, что данные вирусы являются самостоятельными видами ,. Позднее это предположение нашло подтверждение на молекулярногенетическом уровне. При сравнительном электронномикроскопическом изучении морфологической структуры ВОК и ВОО, А. П. Пономаревым в условиях применения негативного контрастирования препаратов была отмечена выраженная гетерогенность популяции ВОК по сравнению с ВОО . До настоящего времени вопрос таксономической принадлежности возбудителей оспы овец и оспы коз вызывал определенные споры, основанные на их сходной морфологической характеристике, тесном антигеном родстве, хозяевоспецифичности и патогенности. Существовало
мнение, что возбудителем оспы овец и коз является единый вирус, обладающий разным спектром чувствительности по отношению к восприимчивым животным. При этом отмечалось наличие штаммов одинаково патогенных и для овец и для коз, а также штаммов, обладающих измененными свойствами вследствие генетической рекомбинации между вакцинными и полевыми изолятами, как это было доказано 5. Существование штаммов, обладающих патогенностью как для овец, так и для коз подтверждалось наблюдениями во время эпизоотий оспы среди мелкого рогатого скота в различных странах мира 0,2,3,9,7,4. При анализе ряда изолированных в Кении, Гане, Йемене и других странах патогенных и для овец и для коз эпизоотических штаммов следовало, что клинические и патоморфологические проявления у животных в подавляющем большинстве случаев совпадали, но все же козы реагировали быстрее 0,4,8,9. При этом было выявлено отличие по патогенности Кенийского штамма вируса оспы овец и коз от всех изолированных на Среднем Востоке и Индии штаммов 2,3,9,7,5. Лабораторное изучение вирулентных каприпоксвирусных штаммов и их циркуляция в полевых условиях среди овец и коз свидетельствовали в пользу этиологии единого вируса оспы овец и коз и целесообразности названия оспы мелких жвачных Сарпрох, независимо от вида животных 1,4,7,5. Однако работами последних лет доказано, что в таксономическом отношении ВОО и ВОК являются самостоятельными нозоединицами, характеризующимися высокой степенью антигенного родства между собой ,9,4. В настоящее время исследованиями посредством мультиплексной ПЦР установлена возможность видовой дифференциации ВОО от ВОК ,. Разработанный метод, основанный на рестрикционном анализе амплифицированного с помощью ПЦР фрагмента гена ii белка, позволил верифицировать ВОО в пределах штаммовой принадлежности к вакцинным или эпизоотическим изолятам ,.