Бактериологическая диагностика туберкулеза животных и ее усовершенствование

• Автор: Боганец, Нина Сергеевна
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Омск
• Количество страниц: 274 с. : 10 ил.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Возбудитель ту беркулеза и его основные свойства.

1.2. Методы диагностики туберкулеза животных.

1.3. Бактериологическая диагностика туберкулеза

1.3.1. Бактериоскопический метод.

1.3.2. Культивирование микобактерий на питательных средах

1.3.2.1. Консервирование, хранение и предварительная обработка биологического материала.

1.3.2.2. Питательные среды и их совершенствование

1.3.3. Биологическая проба на лабораторных животных

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал и методы исследований

2.1.1. Место и сроки выполнения работы.
2.1.2.Соотвегствие работы тематическим планам НИР
2.1.3. Гносеология работы
2.1.4. Сельскохозяйственные и лабораторные животные
2.1.5. Культуры микобактерий.
2.1.6. Диагностические препараты.
2.1.7. Экспериментальнопроизводственные хозяйства.
2.1.8. Мясоперерабатывающие предприятия
2.1.9. Основные лабораторные приборы и оборудование
2.1 Питательные среды
2.1.1 1. Объемы диагностических исследований.
2.1 Первичная документация
2.1 Методы и методики исследований.
2.1 Экономическая эффективность научных разработок.
2.1 Математическая обработка экспериментальных данных .
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ.
3.1. Уровень бактериологической диагностики туберкулеза животных в РФ.
3.2. Видовой спектр Мкобактсри, изолированных от крупного рогатого скота и из внешней среды в регионе Сибири
3.2.1. Частота изоляции и видовой состав микобактерий.
3.2.2. Коллекция музейных эпизоотических штаммов микобактерий
3.2.3. Характеристика культуры М. vi, шт. ВНИИБТЖ.
3.3. Усовершенствование культурального метода бактериологического исследован пи
3.3.1. Влияние методов консервирования биологического материала
на высевасмость микобактерий
3.3.2. Сравнительная оценка методов предварительной обработки биологического материала
3.3.3. Эффективность различных видов пробок при хранении культур микобактерий
3.3.4. Влияние различных концентраций серной кислоты на высеваемость микобактерий из биологического материала
3.3.5. Информативность плотных питательных сред при культивировании разных видов микобактерий.
3.3.6. Информативность плотных питательных сред с
использованием химических и биологических добавок
3.3.7. Совершенствование технологии приготовления плотных питательных сред
3.4. Усовершенствование биологического метода диагностики
туберкулеза
3.4.1. Чувствительность белых мышей к М. vi.
3.4.2. Эффективность интратестикулярного заражения морских свинок
3.4.3. Ускоренная постановка биологической пробы на морских свинках в диагностике туберкулеза животных на основе феномена Коха .
3.4.3.1. Теоретическое обоснование.
3.4.3.2. Летальная доза туберкулина для здоровых морских свинок
3.4.3.3. Летальная доза туберкулина для морских свинок,
зараженных М. vi 7
3.4.3.4. Оптимальный срок введения туберкулина, вызывающий
гибель зараженных М. vi морских свинок.
3.4.3.5. Летальность морских свинок после введения туберкулина
в зависимости от дозы заражения культурой М. vi
3.4.4. Методика ускоренной постановки биологической пробы
на туберкулез
3.4.5. Комиссионное производственное испытание метода
ускоренной постановки биологической пробы на туберкулез
3.4.6. Экономическая эффективность метода ускоренной постановки биологической пробы на туберкулез.
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.
5. ВЫВОДЫ
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
8. ПРИЛОЖЕНИЕ 5
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность


Принято считать, что микобактерии туберкулезного комплекса являются внутриклеточными патогенами, способными также к сапрофитному типу питания и развития Справочник фтизиатра, А. И. Коротясв, С. А. Бабичев, А. Н. Маянский, . Вместе с тем, чувствительность культурального метода исследований намного выше микроскопического, так как позволяет получить положительный результат при наличии в 1 мл исследуемого материала даже 0 микобактерий М. К. Вилькер, О. Н. Бронштейн и др. Драбкина, А. З. Смолянская, З. И. Костина с соавт. И.И. Румачик, В. И. Голышевская, . Результативность бактериологического исследования на туберкулез во многом зависит от состояния биологического материала, методов консервирования, условий и сроков его хранения. Микобактерии туберкулеза, как в чистой культуре, так и в биологическом материале весьма устойчивы к воздействию физических и химических факторов и способны длительно сохранять вирулентность. Поляков и др. Н.М. Колычев и др. По данным П. П. Вишневского , микобактерии птичьего вида в обычных культурах сохраняются до двух, а в высушенных до трех лег. По сообщению Л. М. Моделя , культуры, длительно хранящиеся в термостате без пересева на свежую среду, постепенно теряют жизнеспособность. Старые культуры свыше 6 мес. Спустя 0 мес. По Коннеру и Гауссу при хранении культур М. По данным В. А. Тараскина, К. П. Тараскиной , микобактерии туберкулеза птиц в культуре сохраняют жизнеспособность свыше трех лет при хранении культур в термостате или холодильнике. Культуры М. В. Корпег, . На среде ЛсвснштейнаЙенсена при комнатной температуре М. М. i сохраняют жизнеспособность до мес. М. vi до мес. Н.А. Иванова, . На высокую устойчивость микобактерий туберкулеза к низким температурам указывали А. П. Пируанский , Я. Б. Левинсон . Даже при температуре минус 0 С культуры оставались вирулентными, а при температуре минус С оставались жизнеспособными до 7 лет. По данным Н. Кадиш , микобактерии могут переносить температуру жидкого гелия минус С. Умеренное понижение температуры окружающей среды до 0 С удлиняет выживаемость микобактерий, так как в этих условиях замедляются процессы обмена веществ и аутолиза бацилл Л. М. Модель, . Устойчивость микобактерий с сохранением вирулентности высока не только в чистой культуре, но и в биологическом материале. Н.С. Щепилов и др. В трупах птиц, павших от туберкулеза и зарытых в почву, жизнеспособность и вирулентность микобактерий сохраняется в течение 2 мес. А.Н. Маккавейская, Е. Н. Мистуншн с соавт. По данным Н. М. Колычева , выживаемость М. С сохранялась до дней срок наблюдения, однако вирулентность терялась после дней. А.Л. Клебанова , М. И. Аллахвердиев показали, что микобактерии не теряют вирулентности при кратных замораживаний и оттаиваний. М. vi после 4 кратного замораживания и оттаивания теряют патогенные свойства для кроликов через 6 мес. Н.М. Колычев, . По данным С. И. Гельберга и др. Ю.К. Вейсфейлер , В. Н. Василева , I Ищенко , выживаемость патогенных и атипичных микобактерий сохраняется до мес. Вирулентные микобактерии туберкулеза взвесь в физиологическом растворе полностью теряют жизнеспособность через 8 недель . Вакцина БЦЖ в виде взвеси в растворе глюкозы и глицерина после хранения при температуре и С быстро теряет жизнеспособность, что подтверждается снижением количества выросших на питательной среде колоний . По данным . С теряют жизнеспособность через 3 недели. По наблюдению С. Vi в не консервированной мокроте при температуре минус С микобактерии остаются живыми мес. Замораживание биоматериала мокрота как в присутствии глицерина, так и без него, обеспечивает сохранность патогенных микобактерий в течение 1 дней О. В. Лебедева, Г. В. Цырулышкова, . По данным И. П. Чернот радского , температурные колебания окружающей среды значительно снижают выссвасмость и интенсивность роста и увеличивают срок появления культур микобактерий туберкулеза. Наставлением по диагностике туберкулеза консервирование биологического материала от животных для бактериологического исследования предусмотрено путем замораживания или помещения в водный раствор глицерина. Однако данные о влиянии этих методов консервации в зависимости от срока хранения биоматериала отсутствуют.