Патогенез инфекционного процесса, вызываемого поксвирусными рекомбинантами, экспрессирующими ген ENV вируса лейкоза крупного рогатого скота

• Автор: Бекелча Ассефа Арарса
• Шифр специальности: 16.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 112 с.

В экспериментах i vi показана функциональная активность таких рекомбинантов. Они сохранили способность размножаться и индуцировать в культурах клеток образование оболочсчного белка БЛВ. Биологические свойства рекомбинантов изучаются. Рекомбинанты предполагается использовать для создания живой рекомбинантной вакцины против бычьего лейкоза. Не смотря на о тносительно большое количество опубликованных работ, посвященных изучению биологии ВОВ, экспериментальные данные, характеризующие поведение рекомбинантных вирусов i viv, практически отсутствуют. В связи с чем, исследование основных характеристик векторной системы в различных организмах представляет самостоятельный научный интерес. Целью данной работы явилось изучение векторов на основе вируса осповакцины сконструированных для доставки и экспресии i vi и i viv протективного гена v ВБЛ, исследование экспрессии и
функциональной активности продуктов экспрессии в культурах клеток млекопитающих, а также изучение патогенеза лоствакцинальной инфекции у привитых животных. Сравнение i vi, в культурах клеток млекопитающих кинетики накопления продукта экспрессии целевого гена v ВБЛ в зависимости от исходного вирусавектора и генноинженерной конструкции. Изучение функциональных свойств рекомбинантов, экспрессирующих целевой ген в организме кроликов. Изучить безвредность, реактогненность и особенности инфекционного процесса у телят, привитых рекомбинантами, экспрессирующими ВБЛ. Научная новизна. Получены новые экспериментальные данные по биологическим свойствам рекомбинантов вируса осповакцины, экспрессирующих ген v ВБЛ. Путем трансдукции клеточной культуры определена эффективность векторов, в которых трансген находится под контролем синтетических поксвирусных промоторов. Показана функциональная активность гена v ВБЛ, встроенного в геном ВОВ, продукт экспрессии которого вызывал гуморальный иммунный ответ при внутрикожном заражении кроликов. Показано существенное снижение нейровирулентной активности рекомбинантов по сравнению с исходными штаммами ВОВ. ВОВ для телят. Ограниченная ттоствакцинальная инфекция характеризовалась доброкачественным течением, местной воспалительной реакцией, лихорадкой, региональным лимфаденитом и краткосрочным лейкоцитозом. Установлено время персистенции вакцинного штамма в организме привитых животных. Практическая значимость. Работа представляет не только научный интерес, но и может иметь практическое приложение. Разработка таких рекомбинантов является новым перспективным направлением в создании специфических средств профилактики лейкоза крупного рогатого скота. Векторы на основе вируса осповакцины могут служить дополнительным источником рекомбинантного антигена для разработки новых методов серологической диагностики. Публикации. По материалам диссертации опубликованы 4 печатные работы. Результаты работ представлены на молодежной международной конференции Живые системы и биологическая безопасность населения Москва, г. Актуальные проблемы ветеринарной медицины и ветеринарносанитарного контроля сельскохозяйственной продукции Москва, , на 4 международной конференции Пища, экология, человек Москва, . Результаты работы доложены и обсуждены на расширенном заседании кафедры биологии, вирусологии и генной инженерии МГУ прикладной биотехнологии. Вирус осповакцины ВОВ является наиболее удобной моделью для изучения возможности разработки рекомбинантных вакцин против ретровирусных инфекций , Альтштейн А. Д. и др. Черное В. И. и др. Виту А. ВОВ относится к семейству xvii, подсемейству xvii поксвирусы позвоночных. В., . Жизненный цикл поксвирусов происходит в цитоплазме клетки, в значительной степени автономно от ядра. В связи с этим ВОВ имеет свою систему транскрипции . РНК в полиаденилированной, копированной и метилированной форме i . Строение вируса. Вирионы внутриклеточного вируса состоят из двояковогнутой сердцевины и боковых тел, расположенных в местах вогнутостей. Сердцевина и боковые тела окружены внешней мембраной. Поверхность вириона покрыта многочисленными трубчатыми структурами В.