Выделение и исследование сапонинов сахарной свеклы

• Автор: Брежнева, Татьяна Александровна
• Шифр специальности: 15.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 215 с.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

Часть I. Обзор литературы

1.1. Сапонины, их классификация, химическое строение и свойства.

1.2. Выделение сапонинов из растительного сырья.

1.3. Выделение сапонинов из промотходов.

1.4. Методы определения сапонинов в растительном сырье и фармпрепаратах

1.5. Фармакологическая активность сапонинов.

1.6. Растение vi . v. ii i, его ботанические особенности, химический состав и история использования в качестве пищевого продукта и лекарственного растения
1.7. Сапонины сахарной свеклы, их химическое строение, свойства, получение и определение.

Часть II. Материалы и методы исследования

2.1. Характеристика растительного сырья.
2.2. Отходы сахарного производства, используемые в качестве источника сапонинов, и их характеристика
2.3. Неионогенный макропористый сорбент Стиросорб 1 МХДЭ
х 0.
2.4. Методика качественного определения сапонинов методом ТСХ.
2.5. Методика количественного определения сапонинов в растительном сырье и отходах сахарного производства.
2.6. Получение очищенного образца олеаноловой кислоты.
2.7. Методика подготовки образцов сапонинов для проведения ИКспектроскопического исследования
Часть III Исследование растения vi . v. ii i как
потенциального источника сапонинов. Выделение сапонинов из корнеплодов сахарной свеклы и отходов сахарного производства, исследование качественного и количественного состава полученных суммарных сапонинных фракций
3.1. Определение содержания сапонинов в отдельных частях растения vi . v. ii i
3.2. Получение первичных сапонинсодержащих извлечений из корнеплодов сахарной свеклы
3.2.1. Планирование эксперимента. Анализ факторов, способных оказать влияние на качество получаемых первичных извлечений
3.2.2. Определение действующих и сопутствующих веществ в извлечениях из корнеплодов.
3.2.2.1. Разработка методики количественного определения сапонинов методом ВЭТСХ с применением сканирующей денситометрии
3.2.2.2. Определение красящих веществ в извлечениях методом УФспектрофотометрии
3.2.2.3. Определение липофильных фракций в извлечениях методом УФспектрофотометрии.
3.2.3. Оценка влияния исходных характеристик растительного сырья
на состав и качество первичных извлечений
3.3. Очистка промежуточных сапонинсодержащих фракций экстракционными методами.
3.4. Получение целевых очищенных суммарных сапонинных фракций в виде аммонийных солей.
3.5. Очистка сапонинов на неионогенном макропористом сорбенте Стиросорб
3.6. Получение сапонинов из отходов сахарного производства 4
3.7. Сравнение качественного и количественного состава суммарных сапонинных фракций, полученных с использованием разных схем выделения, выбор оптимальных
условий проведения процесса
Часть IV Разработка методик контроля качества и проведение стандартизации суммы аммонийных солей сапонинов сахарной свеклы.
4.1. Определение подлинности и степени чистоты сапбета суммы аммонийных солей сапонинов сахарной свеклы.
4.1.1. Оценка внешнего вида и определение растворимости в различных растворителях
4.1.2. Проведение испытаний на подлинность
4.1.3. Проведение испытаний на чистоту определение содержания примесей
4.1.4. Определение остаточных органических растворителей в сапбете методом ГЖХ
4.2. Исследование спектральных характеристик водных и спиртовых растворов сапонинов и их количественное определение методом прямой УФспектрофотометрии.
4.3. Анализ сапонинов, основанный на количественном определении агликона после гидролиза
4.3.1. Проведение кислотного гидролиза сапонинов, исследование гидролизата методом ТСХ
4.3.2. Разработка методики количественного определения сапонинов, основанной на потенциометрическом неводном титровании агликона.
4.3.3. Разработка методики количественного определения сапонинов, основанной на УФспектрофотометрическом определении
агликона после гидролиза.
4.4. Определение сапонинов методом ВЭЖХ
4.5. Сравнительная характеристика методик определения сапонинов в растительном сырье, промотходах, промежуточных извлечениях и целевых сапонинных фракциях
4.6. Исследование суммарных сапонинных фракций методом ИК
спектроскопии
Часть V. Первичная оценка фармакологической активности суммы
аммонийных солей сапонинов.
5.1. Определение острой токсичности сапонинов
5.2. Исследование адаптогенного действия сапонинов
5.2.1. Оценка адаптогенного действия сапонинов в опытах на простейших
5.2.2. Исследование физической работоспособности.
5.3. Исследование нейролептического действия сапонинов сахарной свеклы.
5.4. Первичная оценка гипогликемического действия
сапонинов
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ.
Список литерату


Путем извлечения экстракции получается основная группа суммарных галеновых препаратов экстракты и настойки, а также новогаленовые препараты, полифракционные экстракты, извлечения из свежих растений и ряд других. Экстракционный процесс лежит также в основе выделения из сырья индивидуальных фармакологически активных веществ алкалоиды, гликозиды, сапонины и др. Экстракция протекает различно при извлечении веществ из свежих растений с живыми клетками или из высушенного растительного сырья, когда процесс извлечения сложен и состоит из диализа, растворения и диффузии, протекающих одновременно. Несмотря на то, что большинство тритерпеновых сапонинов являются относительно стабильными природными веществами, необходимо проявлять особую осторожность при сборе и сушке растительного сырья во избежание ферментативного гидролитического отщепления их углеводной составляющей. Хроматографическое изучение экстрактов свежесобранного и высушенного сырья позволяет исследователю судить о сохранении нативности выделяемых соединений в процессе заготовки растений ,. Выделение тритерпеновых сапонинов включает в себя получение первичного неочищенного извлечения из сырья суммарного экстракта и последующую очистку его от балластных веществ. Очищенные суммарные фракции могут далее использоваться сами по себе или быть разделены на индивидуальные вещества, если это необходимо . Основные методы изменения сапонинов. В настоящее время наиболее распространенным методом извлечения тритерпеновых сапонинов является экстракция метиловым, этиловым или изопропиловым спиртами различной концентрации. Иногда проводят предварительное обезжиривание сырья петролейным 1,2,3 или серным 5,5 эфиром, гексаном 6,8,2, хлористым метиленом и бензолом 9. Необходимость этой операции связана с удалением из растений липофильных веществ, и, прежде всего, стеринов, с которыми большинство тритерпеновых сапонинов способно образовывать нерастворимые в водных спиртах комплексные соединения . Известны различные способы экстракции в экстракторах непрерывного действия, неоднократное нагревание сырья с растворителем и настаивание на холоду. Подбор растворителя для экстракции зависит от строения извлекаемых веществ. Для сапонинов урсоловой кислоты, содержащих небольшое количество моносахаридов, В. Бухаров рекомендует использовать этилацетат, в котором соединения с большой молекулярной массой практически не растворяются , а Г. Риппергер для выделения моноглюкозида кукурбитацина Е применяет смесь хлороформспирт
9. Японские химики извлекают простейшие сапонины чистым ацетоном 2. В случае сильнополярных сапонинов используют экстракцию водным бутиловым спиртом 9. При экстракции тритерпеновых сапонинов водноспиртовыми растворами принимается ряд предосторожностей, т. Для устранения упомянутого процесса добавляют небольшое количество пиридина, связывающего органические кислоты 0. В некоторых случаях предпочитают применять многократную холодную экстракцию 0. Для извлечения тритерпеновых сапонинов кислотного характера используют разбавленный раствор гидроксида аммония 0 или водный раствор карбоната натрия 7, т. Заслуживает внимания способ, использованный в работе 6 для выделения веществ из конского каштана. Он заключается в предварительном прессовании семян с получением клеточного сока, из которого в дальнейшем выделяют сумму тритерпеновых сапонинов. Извлечение водой применимо для сапонинов, устойчивых к действию относительно высоких температур. Преимущество такою подхода заключается в получении экстракта, свободного от хлорофилла, нерастворимого в воде. Однако в этом случае необходимо исключить протекание возможных ферментативных процессов, приводящих к расщеплению углеводной цепи тритерпеновых сапонинов. В некоторых исследованиях удаление хлорофилла проводят немедленным промыванием свежих водных экстрактов циклогексаном или четыреххлористым углеродом. Методы очистки сапонинов от балпастных веществ. Способ очистки от сопутствующих или балластных веществ зависит от строения и природы выделяемых соединений.