Реакции растительных клеток при вирусном поражении и их роль в защите растений и патогенезе

• Автор: Лега, Светлана Николаевна
• Шифр специальности: 06.01.11, 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 150 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

У С ЛОВ ЫЕ ОБОЗНАЧЕН 1ИЯ

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ РАСТЕНИЙ И ВИРУСОВ ПРИ

РАЗВИТИИ ЛОКАЛЬНЫХ И СИСТЕМНЫХ ИНФЕКЦИЙ

обзор литературы

1. Размножение фитовирусов и распространение их по растению

2. Локальные инфекции

2.1. Реакция сверхчувствительности.

2.2. Локализация инфекции

2.3. Приобретенная устойчивость

3. Системные инфекции
Глава И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
1. Растения
2. Вирусы
3. Заражение листьев, определение инфекционности.
4. Определение активности гидролаз в листьях растений
4.1. Активность РНКазы.
4.2. Активность протеаз
4.3. Активность кислой фосфатазы.
5. Электронная микроскопия.
5.1. Ультрагонкие срезы
5.2. Морфометрический анализ.
5.3. Выявление внутриклеточной локализации кислой фосфатазы
5.4. Негативное контрастирование.
5.5. Иммунная электронная микроскопия
5.6. Определение размеров частиц ВТМ в препаратах из локальных некрозов
6. Электрофоретический анализ белков в ПАГ
6.1.1 риготовление образцов для электрофореза
6.2. Электрофорез.
7. Иммуноферментный анализ
8. Исследование вирусных препаратов, обработанных соком
из вирусиндуцированных принекрозных зон и здоровых листьев
8.1. Контрасгированные ФВК препараты
8.2. Инфекционность.
9. Статистический анализ
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Глава III. ХАРАКТЕРИСТИКА ПАТОГЕНЕЗА У РАСТЕНИЙ
ПРИ ЛОКАЛЬНОМ ВИРУСНОМ ПОРАЖЕНИИ.
1. Ультраструктура локальных некрозов на отделенных
и не отделенных от растений листьях.
1.1. i ..
1.2. .X.
2. Ткани, окружающие локальные некрозы
2.1. Ультраструктура клеток.
2.1.1. i .
2.1.2. . .X
2.2. Активность гидролаз
2.3. Действие сока из принекрозных зон на вирусные частицы
2.3.1. Контрастированные ФВК препараты
2.3.2. Инфекционность.
3. Развитие смешанной инфекции в листьях
. i ., зараженных и X.
4. Ультраструктура клеток локальных поражений и прилегающих
к ним тканей на инфицированных ВТМ листьях .
Глава IV. УЛЬТРАСТРУКТУРНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА КЛЕТОК ПРИ СИСТЕМНОМ ВИРУСНОМ ПОРАЖЕНИИ ЛИСТЬЯ СОИ
ВИРУС МОЗАИКИ СОИ.
ОБСУЖДЕШЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ЛИТЕРАТУРА


К настоящему времени накоплен большой объем информации, касающейся экспрессивной стадии патогенеза растений, в том числе и вирусного физиологобиохимические и цитологичекис изменения растений, симптомы заболеваний. Детерминантная стадия исследована слабо, хотя в последние годы и в сс изучении достигнут определенный прогресс. Установлено, в частности, что в ее реализации имеет место взаимодействие между поверхностями клеток хозяина и патогена. Так, показано Метлицкий, Озерецковская, , что распознавание растением паразитических грибов осуществляется в результате специфического взаимодействия рецепторов плазмалеммы с углеводными лигандами комплементарными олигосахаридными детерминантами клеточной поверхности патогена. Заметим, что первая стадия взаимодействия фагов и вирусов животных также заключается в прикреплении вирионов к поверхности клетки, т. Соловьев, Баландин, . Что касается вирусов растений, то начальный этап их взаимодействия с клетками хозяина остается практически неизученным. Агол, . Получены данные об интерференции вирионов с гомологичным капсидным белком но не с вирусной РНК или гетерологичными вирусами, на основании чего было высказано предположение о том, что вирусный белок связывается с комплементарными участками на поверхности клеток v, . Сообщалось о способности ВТМ связываться с липокарбогидратным комплексом, выделенным из мембранной фракции листьев табака i, i,. Обнаружено взаимодействие белка вируса крапчатости гвоздики с моносахаридами глкжозой и маннозой, предположительно, входящими в состав рецепторов, с которыми связывается вирус Бойко и др. Однако клеточные рецепторы вирусов растений не выявлены. До конца не выяснен механизм проникновения вирусов в клетки растений. Данные, полученные при изучении поглощения ВТМ изолированными протопластами, позволили предположить, что вирионы могут проникать в клетки посредством эндоцитоза либо через микроповреждения плазмалеммы см. Журавлев, , . Несмотря, однако, на слабую изученность начального этапа взаимодействия фитовирусов с клетками, несомненно, что и вирусному патогенезу растений присуща детерминантная стадия, на которой определяется, будут ли хозяин и патоген совместимы или нет, т. При совместимом взаимодействии вирус распространяется по всему растению системные инфекции, при несовместимом лишь в ограниченном количестве клеток, после чего дальнейшее распространение его блокируется локальные инфекции. Важно подчеркнуть, что при любом типе инфекций в той или иной степени реализуются процессы размножения и межклеточного транспорта вирусов. Кратко остановимся на характеристике этих процессов. Размножению вирусов предшествует их депротеинизация, которая, как предполагалось , , , , может осуществляться при взаимодействии вирионов с клеточной стенкой КС и плазмалеммой Пл. Сообщалось, однако, что процесс диссоциации ВТМ идет и при инъецировании вирусного препарата в животную клетку, т. КС и Пл . По современным представлениям, депротеинизация фиговирусов происходит по механизму котрансляционной разборки i, . Показано i, , что инкубация ВТМ при 8 с последующим перенесением в бесклеточную трансляционную систему ведет к потере субъединиц капсидного белка с 5конца в результате рибосомы связываются с обнаженным участком РНК, образуя трансляционно активные комплексы страйпосомы i. Транслокация рибосом сопровождается удалением белковых субъединиц. Сообщалось . Сведения по реализации генетической информации различных фитовирусов подробно освещены в литературе v, i, i . Кратко коснемся данных по экспрессии геномов исследуемых нами вирусов ВТМ, ХВК, ВМС, принадлежащих к тобамо, потеке и потигруппам. Установлено v, i, , что РНК ВТМ несет информацию для синтеза четырех белков 6, 0, и кДа. Первые два из них ранние белки включаются в РНКзависимый РНКполимеразный комплекс РНКрепликазу, участвующий в репликации вирусного генома. РНКрепликаза, присоединяясь к Зконцу вирусной РНК и перемещаясь к 5концу, образует цепи РНК, на которых затем синтезирует цепи , .