Генетическая трансформация капусты белокачанной (Brassica oleracea var. capitata L.) в селекции на устойчивость к фитопатогенам (Plasmodiophora brassicae Wor., Fusarium ssp.)

• Автор: Зонтикова, Светлана Анатольевна
• Шифр специальности: 06.01.05, 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 148 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Генетическая трансформация растен ий

1.1.1. Успехи в генетической трансформации сельскохозяйствен

ных растении

1.1.2. Теоретические основы генетической трансформации расте

1.1.3. Методы генетической трансформации растений

1.1.4. Экспрессия трансгена в растительном организме

1.2. Изучение регенерационной активности растений в культуре

i vi

1.2.1. Морфогенетический ответ растений при регенерации в культуре i vi

1.2.2. Зависимость морфогенеза от генотипа
1.2.3. Зависимость морфогенеза от типа экспланта
1.2.4. Зависимость морфогенеза от питательной среды
1.3. Систематическое положение и особенности биологии капусты белокочанной i v. i .
1.4. Болезни капусты белокочанной, вызываемые i i . и фитопатогенными грибами рода i
2. УСЛОВИЯ ПРОВЕДЕНИЯ, ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ, СХЕМЫ И МЕТОДИКИ ОПЫТОВ
2.1. Цель, задачи и схема исследований
2.2. Условия проведения исследований
2.3. Материал и методы проведения исследований
2.3.1. Исходный материал
2.3.2. Методика опытов
2.3.3. Математическая обработка экспериментальных данных
3. ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ КАПУСТЫ БЕЛО
КОЧАННОЙ i v. i . УСТОЙЧИВОСТЬ К ФИТОНАТОГЕНАМ i i
., i .
3.1. Сравнение регенерационной активности семядольных и гипо
котильных сегментов капусты белокочанной на питательных средах с различных сочетанием и концентрацией регуляторов роста
3.2. Агробактериальная трансформация капусты белокочанной
3.2.1. Определение оптимальной плотности суспензии агробактерий для эффективной трансформации капусты белокочанной
3.2.2. Определение наиболее эффективного способа поранения эксплантов при агробактериальной трансформации капусты белокочанной
3.2.3. Определение оптимальной длительности инокулирования и сокультивирования эксплантов с агробактерией
3.2.4. Изучение влияния возраста экспланта и длительности прскультивирования на эффективность генетической трансформации
3.2.5. Изучение эффективности агробактериальной трансформации капусты белокочанной в зависимости от генотипа и типа экспланта
3.2.6. Изучение действия кананмицина на регенерацию растений
капусты белокочанной при подборе селективных сред Молекулярнобиологический анализ растенийрегенерантов капусты белокочанной, полученных в результате агробактериальной трансформации
СКРИНИНГ ТРАНСГЕННЫХ РАСТЕНИЙ КАПУСТЫ БЕЛОКОЧАННОЙ ПОКОЛЕНИЯ Т,
Экспрессоценка при проращивании семян капусты белокочанной на селективных фонах
Экспрессоценка при проращивании семян Т на фоне канамицина
Экспрессоценка при проращивании семян Т, капусты белокочанной сорта Малайка на фоне фузариевой кислоты Экспрессоценка капусты белокочанной сорта Малайка поколения на устойчивость к киле i i .
Молекулярнобиологический анализ трансгенных растений капусты белокочанной поколения Т1э выделившихся при экспрессоценке на селективных фонах фузариевая кислота, i i .
Характеристика трансгенных растений капусты белокочанной
по морфологическим признакам
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКЕ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Оптимизированы условия регенерации и агробактериальной трансформации капусты белокочанной сочетание и концентрация регуляторов роста, плотность суспензии агробактерий, способ поранения эксплантов, длительность инокулирования и сокультивирования эксплантов с агробактерией, оптимальный возраст экспланта и длительность его прекультивирования, которые могут быть использованы при размножении этой культуры в условиях i vi и для создания генетически модифицированных растений капусты белокочанной с определенными хозяйственноценными признаками. Получено . Малайка со встроенным геном , которые характеризуются повышенной на устойчивостью к киле i . Обоснование и достоверность научных положений. Исследования выполнены по методикам, рекомендованным научными учреждениями страны. Все выводы и предложения подтверждены экспериментальными исследованиями, статистической обработкой полученных данных. Апробация работы. Основные результаты экспериментальной работы по диссертации, выводы и предложения были доложены и представлены на II Всероссийском симпозиуме Физиология трансгенного растения и проблемы биобезопасности Москва, , IX Международной научной конференции Биология клеток растений i vi и биотехнология Звенигород, Международной научнопрактической конференции Актуальные проблемы биоэкологи Москва, , IX Молодежной научной конференции, посвященной памяти Г. С. Муромцева Москва, на Международной научнопрактической конференции, посвящнной памяти Б. В. Квасникова Верея, , V Российской научнопрактической конференции Актуальные проблемы нанобиотехнологии и инноваций с нетрадиционными природными ресурсами и создания функциональных продуктов Москва, . Т0 и Ть несущие целевой ген и маркерный ген II и отличающиеся повышенной устойчивостью к киле i . По результатам исследований по теме диссертации опубликовано 8 работ, в том числе одна в журнале Картофель и овощи, рекомендованном ВАК РФ. Зонтикова, С. А. Трансгенные растения овощных культур способы получения и перспективы использования А. В. Поляков, О. Ф. Чикризова, С. А. Зонтикова 2й Всероссийский симпозиум Физиология трансгенного растения и проблемы биобезопасности Москва, октября г. М. Отделение биологических наук РАН, . Зонтикова, С. А. Эмбриоидогенез капусты белокочанной i . А.В. Поляков, Д. Н. Зонтиков, С. А. Зонтикова Тезисы IX Международной конференции Биология клеток растений i vi и биотехнология Звенигород, 8 сентября г М. ИД ФБКПРЕСС, . С. . Зонтикова, С. А. Регенерационная способность капусты белокочанной i . С.А. Зонтикова, Поляков, О. Ф. Чикризова, Д. Н. Зонтиков, Т. Биология клеток растений i vi и биотехнология Звенигород, 8 сентября г М. ИД ФБКПРЕСС, . С. . Зонтикова, С. А. Наночастицы серебра i viv и i vi технологиях Л. В. Поляков, О. Ф. Чикризова, О. И. Ситникова, Егорова, Лебедева, С. А. Зонтикова, М. И. Иванова, Ж. В. Куршева, О. В. Бакланова, К. Л. Алексеева, М. А. Демидкина, Ревина Актуальные проблемы биоэкологи. Сб. Международной научнопрактической конференции, октября г. М. Диона, . Зонтикова, С. А. Влияние регуляторов роста на морфо и каллусогенную активность капусты белокочанной i . С.А. Зонтикова, Поляков, О. Ф. Чикризова, Д. Н. Зонтиков Сб. Б.В. Квасиикова. Верея, . С. . Зонтикова, С. А. Генетический и морфофизиологический полиморфизм овощных культур и использование его в селекции на устойчивость к стрессам А. В.Поляков, О. Ф. Чикризова, Д. Н. Зонтиков, С. А. Зонтикова, Давыдова, К. Рабей Сб. V Московского международного конгресса Биотехнология состояние и перспективы развития, часть 1 Москва, марта г М. ЗАО Экспобиохимтехнологии, РХТУ им. Д.И. Менделеева, . С. . Зонтикова, С. А. Генетическая трансформация капусты для повышения устойчивости к фигопатогенам С. А. Зонтикова, О. Ф. Шарафова, Поляков Картофель и овощи . Зонтикова, С. А. Получение трансгенных растений капусты белокочанной С. А. Зонтикова, О. Ф. Шарафова, Поляков Актуальные проблемы нанобиотехнологии и инноваций с нетрадиционными природными ресурсами и создания функциональных продуктов Материалы V Российской научнопрактической конференции. М. РАЕН, . С. . Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, 4 глав, выводов, предложений для использования в селекционной практике, списка использованной литературы, содержащего 5 наименований, в том числе иностранных авторов, приложений. Диссертационная работа изложена на 8 страницах машинописного текста, иллюстрирована таблицами, рисунками и 4 приложениями.