Молекулярная характеристика и генетические особенности плюрипотентных клеток человека и их производных

• Автор: Лагарькова, Мария Андреевна
• Шифр специальности: 03.02.07, 03.03.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 203 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СОДЕРЖАНИЕ.

БЛАГОДАРНОСТИ.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

В ряде случаев трисомия по хромосоме появляется на фоне других аномалий кариотипа, таких как трисомия по хромосоме . Эта же особенность характерна для третьей по частоте встречаемости в долговременных культурах ЭСК аномалии кариотипа. Это касается анеунлоидии по хромосоме X. В работах iiv . В качестве единственной аномалии кариотипа ЭСК линии ансуплоидия по хромосоме X была описана в нескольких публикациях. В работе i . XX линии . Синдром Клайнфельтера . От момента получения линии I6 до проведения карнотипирования ЭСК культивировались в течение 4 месяцев. Поэтому останется неизвестным, была ли анеуплоидия по хромосоме X приобретена в ходе культивирования ЭСК или же была представлена уже в ВКМ. Формирование v в ходе культивирования ЭСК дополнительной копии хромосомы X в качестве единственной аномалии кариотипа было выявлено также в нескольких исследованиях . i . Помимо описанных выше аномалий кариотипа, встречаются более редкие случаи ансуплоидии. В исследованиях линий ЭСК описаны трисомии но хромосомам 1, 3, 7, 8, 9, , и . i . i . i . Главным образом, эти аномалии выявлялись в клетках, которые были отягощены также наличием трисомии по хромосомам иили . Описан единственный пример моносомии, при этом, помимо выявленной моносомии по хромосоме , в кариотипс данной сублинии ЭСК была выявлена амплификация небольшого района хромосомы 8. Обе эти хромосомные аномалии были обнаружены после проведения 5 пассажей, что является одним из наиболее длительных примеров культивирования ЭСК человека на сегодняшний день i . Структурные перестройки хромосом, выявленные в некоторых сублиннях ЭСК, чаще всего затрагивают материал хромосом и , вовлекая участки этих и некоторых других хромосом, главным образом, в различные транслокации. Кроме перестроек такого типа описаны единичные случаи амплификации небольших районов хромосом и района 8. В состав последнего входит ген . Известны также редкие случаи делений отдельных участков хромосом 2, 7, и и частичных трисомий по различным районам хромосом 1 и . Кроме того, была описана частичная трисомия и частичная моноеомия но районам хромосомы X. К сожалению, авторы не приводят данных о том, сколько процентов от всех проанализированных ими клеток несли описанную аномалию , . Несомненно, что генетическая нестабильность и связанное с ней изменение паттерна экспрессии генов могут вносить свой вклад как в потенциал дифференцировки клеток соответствующих линий, так и приводить к проявлению ЭСК человека опухолевого фенотипа. Это потенциально осложняет практическое применение клеточных технологий на основе ЭСК человека. Использование ЭСК требует проведения тщательного контроля их хромосомного состава и отбраковку культур клеток с аномальным кари оптом. В го же время анализ изменения свойств ЭСК человека, несущих детально описанные хромосомные перестройки, может оказаться хорошим инструментом для выяснения роли конкретных районов хромосом в поддержании статуса плюрнпотентности ЭСК. Точность и надежность описания таких хромосомных перестроек является необходимым условием использования линий ЭСК в этих целях. Сходства и различия линии чЭСК. Все группы исследователей, работающих с ЭСК, стремятся к тому, чтобы условия культивирования позволяли поддерживать те свойства этих клеток, которыми обладали их непосредственные предшественники i viv в составе ВКМ. Однако в настоящее время не существует не только строго определенных условий культивирования ЭСК человека, но и сам набор стандартных характеристик, которыми должны обладать ЭСК, является предметом обсуждения vv. Проблема выработки единых требований к качеству ЭСК существенно осложняется тем, что условия их культивирования варьируют от лаборатории к лаборатории и даже внутри одной и гой же группы исследователей . Среди варьирующих параметров культивирования клеток следует выделить наиболее существенные, фидер или его отсутствие, среда и способ пересева.