Паспортизация сортов люпина методами ISSR-PCR и RAPD-PCR для биотехнологических исследований

• Автор: Артюхова, Анастасия Валентиновна
• Шифр специальности: 03.01.06, 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 144 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список использованных сокращений

Введение

Г лава 1. Обзор литературы

1.1. Характеристика объекта исследования

1.2. Современные методы исследования генетического полиморфизма растений

1.2.1. Молекулярногенетический анализ ДНК с помощью маркеров

1.2.2. Молекулярногенетический анализ ДНК с помощью

I и маркеров

1.2.3. Другие молекулярногенетические мультилокусныс методы анализа полиморфизма растений

1.3. Методы паспортизации сортов растений

1.4. Маркирование видов и сортов люпина
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Исходный материал
2.2. Выделение геномной ДНК люпина
2.3. Определение качества и количества ДНК
2.4. Полимеразная цепная реакция
2.5. Электрофоретический анализ ДНК
2.6. Обработка результатов генетического анализа
Глава 3. Результаты и обсуждение
3.1. Выбор метода выделения ДНК люпина
3.2. Оптимизация условий
3.3. Характеристика праймеров для и 1
3.4. Характеристика полиморфных фрагментов, амплифицируемых при

3.4.1. Межвидовой полиморфизм
3.4.2. Внутривидовой полиморфизм
3.5. Генетическое сходство сортов люпина но Ямаркерам
3.6. Разработка системы паспортизации сортов люпина
3.7. Дихотомический ключ определения сортов люпина
Выводы
Рекомендации производству
Список использованной литературы


Впервые в России разработан метод паспортизации сортов люпина трех видов на основе 8КРС1С Метод паспортизации сортов люпина включает протокол выделения ДНК, набор праймеров и условия проведения 8КРСЯ. Составлены паспорта сортов трех видов люпина, возделываемых в России, установлено генетическое сходство сортов люпина узколистного. Установлены уровни внутривидового разнообразия, степень генетической дифференциации сортов. Практическая ценность исследований. Полученные в данной работе паспорта сортов люпина белого, желтого и узколистного будут использованы в селекции люпина, а также для поиска маркеров хозяйственноценных признаков при разработке биотехнологий получения высокопродуктивных сортов этого ценного растения. Составленные паспорта могут быть использованы при передаче сортов в Госкомиссию и для контроля чистоты посевного материала. Основные положения, выносимые на защиту. Метод паспортизации сортов трех видов люпина. Паспорта сортов люпина узколистного, желтого и белого. Дихотомический ключ идентификации сортов люпина. Генетическое сходство сортов люпина узколистного. ГЛАВА 1. Род i относится к отделу Покрытосеменные . i, порядку Бобовые , семейству мотыльковые . Род представлен однолетними и многолетними травами, полукустарничками, полукустарниками и кустарниками Еленевский, Генофонд и селекция зернобобовых культур, . Род люпин является строго монофилитичным, четко отделен от остальных групп бобовых iiii . Количество видов точно не определено, но предполагается, что их более 0 Мироненко, iiii . По происхождению все виды люпина разделяются на две основные группы, имеющие самостоятельные ареалы средиземноморскую Старого света и американскую Нового света. Род охватывает несколько климатических зон, включая как дикие, так и одомашненные формы. Люпины Старого света представлены видами и состоят из двух групп i с шероховатыми семенами, и с гладкими семенами Мироненко, i . , iiii . Набор хромосом шероховатосемянных видов варьирует от 2п у . . i и . Набор хромосом гладкосемянных видов в среднем выше и варьирует от 2ц у . . и 2п у . . i и . , . Предполагается, что такое количество хромосом у этих видов сложилось в результате анеуилоидизации и полиплоидизации . , i, . Различия в хромосомных наборах разных видов вызывают трудности для селекционеров, пытающихся создать межвидовые гибриды люпина. Генофонд и селекция. Для американских видов характерно широчайшее многообразие по экологическому распространению и особенностям адаптации. У большинства американских видов 2п , за исключением некоторых восточноамериканских видов, которые являются полиплоидами iiii аЦ . Корневая система у люпина стержневая. На корнях расположены клубеньки бактерий ii ii, фиксирующие азот из воздуха, переводя его в связанное состояние Генофонд и селекция. В работе Майсурян приводится исчерпывающее морфологическое описание люпина. Стебли люпина травянистые или деревянистые, в различной степени облиственные, в поперечнике в основном круглые. Ветви прямостоячие, оттопыренные или стелющиеся. Листья очередные, пальчатосложные, на длинных черешках, сочлененных со стеблем мясистой листовой подушечкой с удлиненными прилистниками. Поверхность листьев чаще опушенная. Соцветие многоцветковая верхушечная кисть, на которой цветки расположены очередно, полумутовчато или мутовчато. Цветок зигоморфный Генофонд и селекция. Хозяйственное значение имеют видов люпина, а в земледелии используются лишь некоторые из них узколистный, или синий . ., желтый . I . . . i. ii . Генофонд и селекция. Мироненко, . Остальные виды применяются как декоративные растения Мироненко, . В Австралии окультурены и возделываются также . , i , . Генофонд и селекция. Например, . Мироненко, .