Липопротеид(а) и полиморфизм апобелка(а) как факторы риска атеросклероза и его осложнений

• Автор: Афанасьева, Ольга Ильинична
• Шифр специальности: 03.01.04, 14.01.05
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 296 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

I ВВЕДЕНИЕ

II ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Открытие и первые годы изучения Лпа.

2. Структура и полиморфизм Лпа и апобелкаа.

3. Предполагаемый метаболизм апоа

4. Возможная физиологическая и патофизиологическая роль

5. Лпа как фактор риска атеросклероза

6. Концентрация Лпа, полиморфизм апоа и коронарный

атеросклероз.

7. Лпа и атеросклероз сонных артерий.
8. Связь Лпа и изоформ апоа с атеросклерозом артерий
нижних конечностей.
9. Методы количественного определения концентрации
Лпа как потенциальный источник противоречий результатов клинических исследований.
. Методы коррекции уровня Лпа.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
III МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
1. Выделение липопротеидов.
2. Получение антител.
3. Синтез аффинных сорбентов.
4. Определение сорбционной емкости иммуносорбентов
5. Анализ чистоты и специфичности белков 1.
6. Методы определения концентрации белков и липидов
7. Клинические исследования
8. Проведение процедур терапевтического афсреза, с
использованием колонок Лпа Липопак.
9. Статистические методы.
IV РЕЗУЛЬТАТЫ II ОБСУЖДЕНИЕ
1. Разработка препаративных методов выделения Лпа и
получения антител к Лпа
1.1. Разработка методов выделения Лпа
1.2. Разработка препаративных методов получения
специфических антител барана к Лпа человека
2. Разработка методов определения концентрации Лпа и
изоформ апоа в плазме или сыворотке крови человека
2.1. Разработка методов определения концентрации Лпа в
плазме и сыворотке крови человека
2.2. Разработка метода фенотипирования апобелкаа.
3. Распределение изоформ апоа и концентрации Лпа у
здоровых доноров и больных сердечнососудистыми заболеваниями 9
4. Связь полиморфизма апобелкаа и концентрации Лпа с
атеросклерозом различных локализаций.
4.1. Связь Лпа с атеросклерозом коронарных артерий
4.2. Полиморфизм апоа и осложнения коронарного атеросклероза.
4.3. Связь Лпа с атеросклерозом сонных артерий
4.4. Связь Лпа с поражением периферических артерий 9
4.5. Связь Лпа с мультифокальным атеросклерозом.
Исследование влияния полиморфизма апобелкаа и
концентрации Лпа на прогноз больных ИБС
Лпа и полиморфизм апоа у больных после операции
аортокоронарного шунтирования.
Влияние концентрации Лпа и полиморфизма апоа на
прогноз больных ИБС
Разработка методов коррекции повышенной концентрации
Снижение Лпа медикаментозными методами.
Снижение Лпа методами терапевтического афереза.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
БЛАГОДАРНОСТИ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


При этом время удержания предшественника в эндоплазматическом ретикулуме положительно коррелирует с размером апоа изоформ. После достаточно продолжительного процесса созревания апоа, происходит секреция свободного апоа в кровоток С. Е. Сборка частицы Лпа, согласно данным i vi. Вервый, нековалентный по своей природе этап, вовлечен участок апоа, расположенный между кринглами К. IV5. 0 Стерминального участка домена апоВюо, . На следующем этапе дисульфидная связь образуется между , расположенном в К IV9 апоа и из апоВюо ii Н, , . Что касается экспериментов на животных моделях, то в данном случае не удалось точно определить ни четкую последовательность, ни место одно или несколько, где происходит собственно образование Лпа. ЛНП привело к быстрому формированию Лпа, что позволило предположить, что сборка Лпа происходит именно в плазме i , , . Интересно, что согласно результатам экспериментов на трансгенных мышах, продуцирующих человеческие апоВ и апоа, практически весь пул апоа присутствует именно в форме Лпа . . Кроме того было показано, что сборка Лпа может ингибироваться пирролидинальфакарбоновой кислотой и аналогами лизина, замедляющиминековалентную ассоциацию апоа и апоВ. Используя меченные ЛНП, американские ученые нашли, что никотиновая кислота и каптоприл также способны ингибировать ассоциацию апоас апоВюо i . . , . Исследования, проведенные на гепатоцитах павиана и гепатоцитах человека линии 2 в культуре не сумели продемонстрировать внутриклеточную ковалентную связь между апоа и апоВюо Е. М. , . Вместе с тем, i и i . . , показали, что в. Однако, результаты других исследований не подтверждают исключительный внеклеточный механизм. Показано, что первичные культуры человеческих гепатоцитов производят и свободный апоа, и комплекс апоВ0апоа, который преимущественно присоединяется к триглицерид обогащенным частицам ,6 гсм3. Образующийся липопротеидный комплекс, в свою очередь, может быть подвергнут метаболическому превращению в культуре гепатоцитов. i . Подобное наблюдение было сделано в II2 клетках с использованием культур, продуцирующих 2 изоформы человеческого апоа. Данные свидетельствуют о том, что секреция апоа клетками гепатомы может быть связана с элементами секреции триглицеридов и их сборки. При этом наблюдались различия в синтезе и сборке частиц с изоформами апоа различных размеров i . Лпа показывая, что скорость синтеза апоа и апоВюо в Лпа сопоставимы,, но отличаются от скорости синтеза апоВ в ЛНП i . Еще в х годах было показано, что введенный крысам человеческий меченный Лпа катаболизируется преимущественно . Однако Основываясь на фактах повышения уровням Лпа у больных с почечной иедостатотшостыо можно предположить, что почки Лпа i . . , . Несмотря на присутствие в составе Лпа ЛНПподобной частицы, участие ЛНП рецептора в катаболизме Лпа достаточно, спорно . i . В году эксперименты по взаимодействию Лпа с культурами клеток, фибробластов человека, проводимые i,, продемонстрировали специфическое связывание частицы Лпа с ВЕ рецептором на фибробластах, которое составляло только от связывания частиц ЛНП с этими же клетками i . Позже, в опытах i vi с человеческими фибробластами было показано,, что ЛНП рецептор участвует в интернализации предпочтительно низкомолекулярных изоформ Лпа,. ЛНП рецептор и может, играть роль в клиренсе высокомолекулярных Лпа . Опыты с рекомбинантным апоа подтвердили участие ЛНП рецептора в захвате Лпа нормальными фибробластами, в отличие от фибробластов, полученных у больных гомозиготной формой семейной гиперхолестеролемии . . , . В опытах с трансгенными животными было показано, что мыши с оверэкспрессиеи гена, кодирующего ЛНП рецептор, демонстировали повышенный клиренс Лпа . Лпа О.