Оценка генотоксического действия ряда лекарственных препаратов в тест-системах Drosophila melanogaster и млекопитающих (Mammalia)

• Автор: Чшиева, Фатима Таймуразовна
• Шифр специальности: 03.00.32
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Владикавказ
• Количество страниц: 182 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Индуцированный мутагенез.

1.2. Инфекционный кластогенез, как форма проявления биологического мутагенеза.

1.3. Окислительный стресс и модификация мутационного процесса

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследований.

2.2. Изучение мутагенов в тестсистемах.

2.3. Влияние антимутагенов на стабилизацию генома.

2.4. Метод учета ДЛМ в тестсистеме i

2.5. Учет ХА в клетках костного мозга млекопитающих.
2.6. Метод инверсионной дифференциальной импульсной полярографии
2.7. Определение уровня церулоплазмина в сыворотке крови
методом Равина.
2.8. Унифицированный метод подсчета эритроцитов в счетной
камере
2.9. Определение активности каталазы
, 2 Учет ХА в лимфоцитах периферической крови человека
2 Математическая обработка результатов
ГЛАВА 3. МУТАГЕННОЕ ДЕЙСТВИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ, ПРИМЕНЯЕМЫХ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ДЕТЕЙ С
ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНЬЮ ЖЕЛУДКА, В ТЕСТСИСТЕМЕ I И ЕГО МОДИФИКАЦИЯ АНТИОКСИДАНТАМИ ДИМЕФОСФОНОМ, АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТОЙ И ВЕТАРОНОМ
3.1. Выход доминантных лсталий, как показатель мутагенной активности лекарственных препаратов
3.2. Комбинированное действие омепразола, декола, амоксициллина и метранидазола в тестсистеме i
3.3. Метод учета доминантных леталий, вызванных увеличением терапевтической дозы изучаемых лекарственных препаратов
3.4. Влияние димефосфона на индуцированный мутагенез в тестсистеме i .
3.4.1. Действие димефосфона на выход ДЛМ и плодовитость мух .
3.4.2. Модификация мутагенного действия омепразола, денола, амоксициллина и метранидазола с помощью димефосфона
3.4.3. Модификация мутагенного эффекта димефосфоном при комплексном воздействии лекарств.
3.5. Модификация аскорбиновой кислотой индуцированного
мутагенеза в тестсистеме i
3.5.1. Влияние витамина С на доминантные летали, вызванные омепразолом, денолом, амоксициллином и метранидазолом
3.5.2. Модификация мутагенного эффекта комплексного приема препаратов витамином С.
3.6. Модификация доминантной летальности дрозофил ветароном.
3.6.1. Влияние ветарона на индукцию мутаций у i
омепразолом, денолом, амоксициллином и метранидазолом.
3.6.2. Влияние ветарона на индукцию мутаций у i при комплексном введении препаратов.
Выводы.
ГЛАВА 4. АНАЛИЗ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
ПРЕПАРАТОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫХ С ЦЕЛЫО ЭРАДИКАЦИИ
I I, В КОСТНОМ МОЗГЕ КРЫС И
СПОСОБНОСТИ ВИСМУТА СУБЦИТРАТА К
БИОНАКОПЛЕНИЮ
4.1. Генотоксическое действие препаратов омепразола, денола, амоксициллина, метранидазола и дерината в костном мозге млекопитающих
4.2. Зависимость цитогенетической активности препаратов от схемы введения
4.3. Анализ зависимости генотоксического действия препаратов и комплексов от дозы
4.4. Модификация кластогепного процесса в костном мозге млекопитающих с помощью витаминных препаратов ветарона и витамина С.
4.5. Накопление висмута в органах млекопитающих в зависимости от схемы введения
4.6. Анализ накопления висмута в органах при увеличении дозы.
4.7. Модифицирующее действие ветарона, витамина С и димефосфона на накопление висмута в органах
4.7.1. Влияние антиоксидантов на содержание висмута в органах
4.7.2. Влияние встарона и витамина С на накопление в органах крыс висмута при введении денола в комплексе с другими
лекарственными веществами
4.8. Анализ остаточных концентраций висмута в органах крыс.
Выводы.
ГЛАВА 5. БИОЛОГИЧЕСКИЙ МУТАГЕНЕЗ У ДЕТЕЙ,
ИНФИЦИРОВАННЫХ I I
5.1. Анализ кариотипа детей до эрадикационной терапии
5.1.1. Спонтанный мутагенез.
5.1.2. Биологический мутагенез у детей, инфицированных
5.2. Характеристика генотипа детей после антихеликобактерной терапии.
5.3. Модификация биологического мутагенеза антихеликобактерной терапией на фоне антиоксидантов
5.4. Ферменты антиоксидантной системы, как показатель дестабилизаии организма детей
5.4.1. Активность ферментов антиоксидантной системы у здоровых детей и инфицированных i i в период обострения.
5.4.2. Влияние эрадикационной терапии на активность церулоплазмина, каталазы и состояние ферментативной активности через год после курса антихеликобактерной терапии
Выводы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
ОБЩИЕ ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Авторы приводят многочисленные данные, однозначно свидетельствующие о способности метронидазола индуцировать генные мутации у прокариот, а также отдельные сведения о его способности индуцировать хромосомные аберрации в культуре клеток китайского хомячка в анаэробных условиях. В указанном обзоре не приводятся, какие либо позитивные результаты, свидетельствующие о генотоксичности метронидазола для млекопитающих i viv. СХО и микроядра в соматических клетках мышей и крыс. Однако этот анализ нельзя признать полным, поскольку из рассмотрения исключена, по крайней мере, одна работа, свидетельствующая о кластогенных эффектах метронидазола в дозах 2 и мг на одну мышь . В этой связи особое значение приобретает анализ результатов, полученных при цитогенетическом обследовании лиц, применявших метронидазол в терапевтических или исследовательских целях. У пациентов с болезнью Крона, получавших метрнонидазол в течение нескольких месяцев, выявлено повышение средней частоты клеток периферической крови с хромосомными аберрациями до 2,, при 0,8 в контроле 9. При анализе уровня СХО повышение этого показателя было зарегистрировано в одном случае у пяти из шести наблюдаемых пациентов, в другом случае у пяти из шестнадцати больных. Результаты клинических цитогенетических исследований вместе с отдельными свидетельствами о кластогснном действии метронидазола на млекопитающих и его ДНК повреждающих свойствах является достаточным основанием для проведения специальных дополнительных исследований генотоксичкных свойств препарата с использованием современных методологических подходов 9. В настоящее время в качестве высокоэффективных антибактериальных средств, применяют различные хинолоновые производные. Основные представители этой группы лекарств способны индуцировать повреждения ДНК в про и эукариотических клетках и генные мутации у микроорганизмов . Однако пока нет полной ясности в представлениях о кластогснных свойствах этой группы фармокологических средств. Только в последнее время появились сведения, демонстрирующие, что некоторые хинолоны обладают способностью к повреждению хромосом эукариот i vi. Например, ципрофлоксацин может индуцировать образование микроядер и хромосомных аберраций в культивируемых клетках V, микроядер в клетках . Вместе с этим детальное исследование генотоксических свойств левофлоксацина в дозах вплоть до максимально переносимых не выявило способности препарата индуцировать образование микроядер в клетках костного мозга мышей, внеплановый синтез, ДНК i vi и i viv, а также доминантные летальные мутации. Прулифлоксацин 5мгкг также оказался не способным к индукции формирования микроядер у мышей. Норбактин норфлоксацин в сравнительно низких дозах мгкг дозозависимо индуцировал появление аномалий головок спермиев, микроядер и хромосомных аберраций у мышей . V. Несмотря на существование отдельных данных, свидетельствующих о наличии у некоторых производных хинолона норбактин кластогенных свойств в экспериментах на животных, в целом вопрос о кластогенном влиянии препаратов этой группы i viv пока остается открытым и требует дальнейшего изучения 9. Генотоксические свойства диоксидина, высокоэффективного антибактериального средства широкого спектра действия, хорошо известны. В частности, показано, что он в концентрациях, равных или превышающих 5 мкгмл, вызывает хромосомные аберрации в культивируемых клетках периферической крови человека при однократном введении в дозах более мгкг индуцирует хромосомные аберрации в соматических клетках, а в дозах и 0 мгкг, но не 0 мгкг, доминантные летальные мутации в зародышевых клетках мышей . Результаты исследований генотоксических свойств нитрофурановых производных характеризуют этот класс химических соединений как потенциально мутагенный, но также указывают, что их мутагенное действие, регистрируемое в подавляющем большинстве тестов на микроорганизмах, специфично для даного тестобъекта. Отмечено, что фурадонин нитрофуран обладает мутагенными свойствами в тестах на микроорганизмах, а в культивируемых клетках млекопитающих проявляет как позитивное, так и негативное действие, в дозе 0,0 мгкг не индуцирует образование микроядер у крыс.