Миогенная дифференцировка личиночных клеток мидии Mytilus trossulus в условиях культуры

• Автор: Плотников, Сергей Викторович
• Шифр специальности: 03.00.30
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 110 с. : ил

Способность к двигательной активности характерна для большинства клеток. Более того, известно, что эволюционный прогресс многих групп живых организмов неразрывно связан с развитием локомоторной функции. В связи с этим многоклеточным животным потребовалось формирование особых клеточных типов, интегрированных в целую группу тканей, которые называют мышечными. В настоящее время достаточно подробно исследованы процессы миогенеза в первичных культурах клеток позвоночных. Показано, что образующиеся в культурах мышечных клеток высокодифференцированные структуры сохраняют все морфологические и функциональные особенности мышечной организации. Это и обусловливает широкое использование их для изучения механизмов миогенеза, а также для исследования общих процессов цитодифференцировки. Однако значительные отличия организации мышц беспозвоночных не позволяют механически перенести результаты, полученные на клетках позвоночных животных. Поэтому очень важно получение экспериментальных фактов, объясняющих закономерности перестройки немышечного цитоскелета клеток морских беспозвоночных в сократительные мышечные структуры. Известно немного работ, в которых описана дифференцировка миогенных клеток беспозвоночных животных I vi. Это исследования, выполненные на дрозофиле i . В них было показано, что в условиях культуры возможна дифференцировка мышечных клеток. Однако функциональные свойства мышечных клеток беспозвоночных животных, дифференцирующихся в культуре, до настоящего времени не исследованы. Кроме того, разнообразие условий культивирования и возможность их контроля позволят выяснить факторы, определяющие морфогенетические клеточные реакции и процессы шггодифференцировки. Культуры миогснных клеток мидии можно рассматривать как недостающее звено в исследованиях становления мышечного аппарата моллюсков. Цель и задачи работы Целью данной работы является разработка метода получения миогенной клеточной культуры эмбриональных клеток мадии и ее морфофункциональная характеристика. Разработать условия культивирования личиночных клеток мидии. Доказать миогекную природу клеток, дифференцирующихся i vi и установить степень полноценности их дифференцировки в условиях культуры. Исследовать изменения характера спонтанной двигательной активности клеток в процессе культивирования. Научная новизна и теоретическое значение работы Показано, что программа миогенной дифференцировки может быть реализована в ггропессе культивирования клеток личинок мидии премиогенных стадий развития. Впервые проведен комплексный анализ морфофункциональных свойств мышечных клеток мидии, дифференцирующихся i vi. Полученные нами первичные культуры являются первыми миотшыми клеточными культурами беспозвоночных, для которых доказана полноценность не только морфологической, но и физиологической дифференцировки. Впервые проведено исследование изменения характера сократительной активности клеток беспозвоночных в процессе миогенной дифференцировки. Па основании полученных результатов сделан вывод о том, что при дифференцировке в условиях культуры формируются функционально полноценные гладкомышечные клетки, обладающие тем же спектром двигательной активности, что и гладкомышечные клетки взрослой мидии, дифференцировавшиеся i viv. Такие культуры клеток могут стать модельным объектом в исследованиях процесса миогенеза у беспозвоночных. Практическая значимость работы Разработан комплекс условий, приводящих к миогенной дифференцировке клеток трохофоры мидии i vi. Возможность получения миогенно дифференцирующихся культур в бсссывороточных средах позволяет использовать их для поиска индукторов миогенеза и исследования механизмов их действия. Еще одна область возможного применения полученных клеточных культур биотесгирование. Показано, что личинки моллюсков являются удобной тестсистемой для идентификации медиаторных веществ Бузников, . Использование для этих целей миогенных клеточных культугр в сочетании с разработанной нами экспериментальной установкой позволяет, с одной стороны, сохранить высокую чувствительность метода, а с другой.