Цитохимическая и функциональная характеристика нейтрофильных лейкоцитов при хроническом комбинированном химическом отравлении

• Автор: Алиева, Умхаир Бадрутдиновна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Волгоград
• Количество страниц: 108 с. : 23 ил.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. Обзор литературы

ГЛАВА II. Материалы и методы исследования

ГЛАВА III. Результаты исследования

3.1. Цитохимические исследования клеток крови при отравлении солями свинца, меди и их комбинацией.
3.1.1.Исследование содержания гликогена, липидов и 8Нгрупп в клетках периферической крови

3.1.2. Изучение активности эстераз и СДГ циркулирующих нейтрофилов.

3.1.3. Исследование основных антимикробных систем миелопероксидазы и катионных белков циркулирующих нейтрофилов.
3.2. Исследование активности ЛДГ, лероксидазы и белков плазмы крови биохимическими методами.

3.2.1. Исследование активности ЛДГ

3.2.2. Дискэлектрофорез белков плазмы крови

3.2.3. Дискэлектрофорез пероксидаз крови.
3.3. Исследование функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов
ГЛАВА IV. Обсуждение полученных результатов.
ВЫВОДЫ
Приложение к разделу Исследование функциональной активности НЛ. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Список сокращений
НЛ нейтрофильный лейкоцит.
БН гр. сульфгидрильная группа.
КБ катионные белки.
МПО миелопероксидаза.
ЛДГ лактатдегидрогеназа.
сдг сукцинатдегидрогеназа.
сцп средний цитохимический показатель.
ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ
1. Снижение содержания гликогена в нейтрофильных лейкоцитах крови имеет место во всех трех вариантах экспериментов. Однако оно наиболее выражено при отравлении уксуснокислым свинцом и в варианте с комбинацией. Эти сдвиги являются показателем непосредственного влияния токсических веществ, особенно, уксуснокислого свинца, на синтетические процессы в нейтрофильных лейкоцитов, что подтверждается результатами исследования в клетках липидов и БНгрупп.
2. Стимуляция иммунной системы опытных животных эритроцитами баранов в определенной степени блокирует токсическое действие использованных веществ, что выражается заметным ростом в нейтрофильных лейкоцитах содержания гликогена, липидов и белков содержащих БНгруппы. ,
3. Хроническое отравление сернокислой медью, уксуснокислым свинцом и их комбинацией существенно подавляет активность окислительных ферментов в нейтрофильных лейкоцитах, в частности, ЛДГ4. При этом в наибольшей степени угнетается активность ЛДГ4 фракции, ответственной за анаэробный гликолиз основного поставщика энергии в НЛ, что, несомненно, снижает функциональные возможности клеток.
4. Отмеченный, при исследовании антимикробных систем миелопероксидазы и катионных белков нейтрофильных лейкоцитов дегранулирующий эффект использованных токсических соединений наряду с появлением в крови паралейкобластов следует рассматривать как результат их влияния не только на гранулогенез, но и на циркулирующие клетки.
5. Во всех выбранных вариантах экспериментов выявлены качественные и количественные сдвиги белкового состава сыворотки крови, особенно выраженные в зоне спектра у глобулинов и белков, ответственных за транспорт железа и меди гаптоглобулинов и церулоплазмина. Иммунизация животных в определенной степени
корригирует эти изменения, преимущественно за счет углобулиновых фракций.
6. Использованные токсические вещества при длительном использовании подавляет функциональную активность нейтрофильных лейкоцитов, что выражается снижением всех показателей фагоцитоза, и особенно миграционной активности, количества нейтрофильных лейкоцитов, участвовавших в фагоцитозе, и количества поглощенных кокков. Эти сдвиги следует объяснить, прежде всего, угнетением активности ферментов, ответственных за энергетическое и пластическое обеспечение фагоцитов.
Введение


Однако для более четкого представления о количественных и качественных изменениях отдельных белков и сдвигах активности различных ферментов, на наш взгляд, необходимо применение более современных методов микрохимического анализа. Результаты их позволили бы расшифровать некоторые детали сложного механизма развития патологического процесса при выбранных токсических воздействиях. В связи с этим нам представлялось актуальным комплексное исследование цитохимических показателей и функционального состояния нейтрофильных лейкоцитов НЛ крови в эксперименте при хроническом воздействии наиболее часто встречающихся токсических факторов окружающей среды соединений свинца и меди, а также их комбинации. При этом важно было рассмотреть и возможное корригирующее влияние стимуляции иммунной системы организма на выявленное сдвиги. Цито и биохимическая характеристика нсйтрофильных лейкоцитов крови, а также оценка их функционального состояния при хроническом отравлении солями тяжелых металлов и установление их связи с процессом иммунизации животных. Изучить цитохимическими методами содержание гликогена, липидов и БН групп, а также активность эстераз и сукцинатдегидрогеназы нейтрофильных лейкоцитов периферической крови экспериментальных животных при хроническом отравлении уксуснокислым свинцом, сернокислой медью и их комбинацией до и после их иммунизации. Рассмотреть состояние основных антимикробных систем нейтрофильных лейкоцитов, а также его связь с иммунизацией животных исследованием активности миелопероксидазы и содержания катионных белков при отравлении выбранными токсическими веществами. Исследовать при данных токсических воздействиях активность лактатдегидрогеназы, пероксидаз в гомогенате лейкомассы и в сыворотке крови. Изучить методом дискэлектрофореза в полиакриламидном геле белковый состав плазмы крови у опытных и контрольных животных. Определить при выбранных вариантах экспериментов основные показатели фагоцитарной активности нейтрофильных лейкоцитов и изучить их возможную взаимосвязь с процессом иммунизации. Впервые комплексно исследованы важные цитохимические и основные функциональные показатели нейтрофильных лейкоцитов крови при хроническом отравлении сернокислой медью, ацетатом свинца и их комбинацией. Установлено, что выбранные токсические соединения подавляют синтез компонентов, ответственных за энергетическое гликоген и пластическое липиды, 8Н группы обеспечение клеток на уровне миелопоэза. Показано коррегирующее влияние активации иммунной системы животных на токсическое воздействие выбранных солей тяжелых металлов. В работе впервые подвергнуто параллельному рассмотрению с использованием цитохимических и биохимических методов активность миелопероксидазы, являющейся компонентом основной антимикробной системы нейтрофильных лейкоцитов, что в значительной степени подтверждает достоверность полученных результатов Эти данные при совокупности с результатами исследований другой защитной системы клеток катионных белков, а также основных показателей фагоцитоза, позволяют утверждать о реальном снижении при использованных токсических воздействиях неспецифической противомикробной резистентности организма. Впервые методом дискэлектрофореза в полиакриамидном геле установлены конкретные белки плазмы крови, ответственные за гипопротеинемию при отравлении ацетатом свинца, сернокислой медью и их комбинацией 7 глобулины, липопротеины и церулоплазмин. Выяснено, что корригирующее влияние процесса иммунизации при этом связано прежде всего количественными и качественными сдвигами у глобулинов. Выявленные при воздействии указанных токсических веществ сдвиги ферментных систем и других химических компонентов нейтрофильных лейкоцитов имеют значение для клиникодиагностической практики. Они могут быть использованы как ранние критерии для диагностики и дифференциальной диагностики отравлений различного генеза. Установленный в работе факт реального снижения неспецифической противомикробной резистентности организма при хроническом отравлении солями свинца и меди должны быть учтены при выборе препаратов с лечебной целью и при проведении профилактических мероприятий.