Морфофункциональные изменения иммуной системы мышей Balb/c и C57Bl/6 при введении липополисахарида

• Автор: Диатроптов, Михаил Евгеньевич
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Количество страниц: 188 с.

Введение.
Обзор литературы. Морфофункциональные изменения иммунной системы при воздействии липополисахарида в дозах, вызывающих адаптивные и дизадаптивные реакции.
1. Определение понятий эндогенная интоксикация, эндотоксикоз, эндотоксины и липополисахарид

2. Структура липополисахарида

3. Экспериментальные модели эндотоксинемии.

4. Системные реакции организма в ответ на введение липополисахарида.

5. Механизмы повреждающего действия липополисахарида на органмишень печень

6. Роль липополисахарида в развитии адаптивных реакций организма

7. Морфофункциопальные изменения иммунной системы при воздействии липополисахарида.

Материалы и методы

Результаты собственных исследований.

1. Морфофункциональные изменения иммунной системы у мышей ВАЬВс и СВЬ6 при адаптивной реакции, развивающейся при введении липополисахарида в дозе 0 мкгкг.
1.1. Содержание кортизола в сыворотке крови мышей ВАЬВс и СВЬ6 в разные сроки после введения липополисахарида
1.2. Показатели уровня перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты в печени мышей ВАЬВс и СВЬ6 после введения липополисахарида.
1.3. Количественная и функциональная характеристика нейтрофилов периферической крови мышей и 6 в разные сроки после введения липополисахарида.
1.4. Морфологическая характеристика печени мышей и 6 в разные сроки после введения липополисахарида
1.5. Морфологическая характеристика функциональных зон тимуса и селезенки мышей и 6 в разные сроки после введения липополисахарида
1.6. Содержание эндотоксина в сыворотке крови мышей и 6 в разные сроки после введения липополисахарида
1.7. Содержание антител к эндотоксину . i в сыворотке крови мышей и 6 в разные сроки после введения
липополисахарида
1.8. Сравнительная характеристика продукции цитокинов
активированными конканаквалином А спленоцитами мышей и 6 в разные сроки после введения
липополисахарида
2. Морфофункцнональные изменения, иммунной системы у
мышей и 6 при дизадаптивной реакции,
развивающейся при введении сефарозы с липополисахаридом в дозе
мгкг.
2.1. Морфологические изменения в зоне подкожного введения сефарозы и сефарозы с липополисахаридом у мышей линий и 6.
2.2. Содержание кортизола в сыворотке крови мышей и 6 в разные сроки после введения сефарозы и сефарозы с липополисахаридом.
2.3. Количественная и функциональная характеристика нейтрофилов периферической крови мышей и 6 в разные сроки после введения ссфарозы и сефарозы с лииополисахаридом
2.4. Содержание эндотоксина в сыворотке крови мышей и 6 в разные сроки после введения сефарозы и сефарозы с липополисахаридом.
2.5. Содержание антител к эндотоксину . i в сыворотке крови мышей и 6 в разные сроки после введения сефарозы и сефарозы с липополисахаридом
2.6. Морфологические изменения в печени мышей и 6 в разные сроки после введения сефарозы и сефарозы с липополисахаридом.
2.7. Сравнительная характеристика морфофункциональных изменений тимуса у мышей и 6 в разные сроки после введения сефарозы и сефарозы с липополисахаридом
2.8. Сравнительная характеристика морфофункциональных изменений селезенки у мышей и 6 в разные сроки после введения сефарозы и сефарозы с липополисахаридом .
2.9. Сравнительная характеристика продукции цитокинов активированными конканаквалином А спленоцитами мышей и 6 в разные сроки подкожного введения сефарозы и
сефарозы с липополисахаридом
Обсуждение результатов исследования.
Список литературы.
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


ЛПС была существенной для оптимальной продукции фактора некроза опухолиальфа ФНОа человеческими мононуклеарными клетками периферической крови. Другие авторы, напротив, показали, что тип ЛПС, выделенный из . ФНОа, по сравнению с типом i . Рецепторы к ЛПС. Несмотря на огромное внимание к ЛПС со стороны исследователей, до года не была изучена природа и локализация рецептора к этой молекуле на клеткахэффекторах. Существует ряд свидетельств того, что клетки имеют ЛПСрецепторы и что этот комплексный бактериальный продукт не активирует клетку по какомулибо неспецифичсскому механизму. Было показано, что липид X, биосинтетический моносахарид предшественник липида А,, выделенный из i и . ЛПС , . Стабильный антагонист Е способный ингибировать ЛПС индуцированную продукцию цитокинов и 0 человеческими моноцитами i vi при ингибирующей концентрации, также оказался эффективным ингибитором ЛПСиндуцированной продукции ФНО и ассоциированной с ней гибелью мышей i . Тот факт, что биологическое действие ЛПС может быть блокировано действием антагонистов, при том что эти антагонисты обладают структурным и функциональным сродством к ЛПС, доказывает, что окончательный этап взаимодействия ЛПС с клеткой осуществляется через рецепторное взаимодействие. Однако природа этой рецепторной системы крайне сложна В. С целью исследования рецепторной системы ЛПС проводились исследования, основанные на использовании перекрестносвязанных химических агентов, образующих ковалентно связанные комплексы радиоактивно меченых ЛПС или липида А и соответствующих рецепторов на клеточной поверхности. После образования ковалентного комплекса клеточная мембрана подвергалась растворению, клеточные белки фракционировались, а затем определялась молекулярная масса радиоактивно меченых комплексов. Таким образом был идентифицирован поверхностноклеточный белок с молекулярной массой кД, который, как полагают, выполняет роль рецептора для ЛПС на поверхности многих клеток, в том числе на Т и Влимфоцитах и макрофагах. Эритроциты не экспрессируют этот рецептор i , . В работе . ЛПС и пептидогликана, однако позже этот же автор сообщил о том, что роль этого рецептора выполняла молекула клеточносвязанного альбумина, поступающего из среды культивирования Альбумин связывается с мембраной многих клеток, но механизмы этой связи окончательно не установлены. Биологическое значение рецептора с молекулярной массой кД также до конца остается неясным. Аналогичная описанной выше методика позволила выделить другие белки, с молекулярной массой , , , и кД, которые также связываются, с радиоактивно меченым ЛПС vi , . Вероятно, истинный ЛПСрецептор является мультимерной молекулой подобно рецептору к интерлейкину2 ИЛ2 или набором взаимодействующих поверхностных рецепторов, или четко определенной группой нескольких белков распознающих различные формы ЛПС В. Точно установлены, по крайней мере, два поверхностноклеточных белка, связывающихся с ЛПС. Показано, что все эти белки р2интегринов способны к связыванию ЛПС, однако клетки, не имеющие , также отвечают на воздействие ЛПС i . Трансфекция в яйцеклетку китайского хомячка, которая в исходном состоянии не взаимодействует с ЛПС и не имеет интегринового рецептора, приводит к возникновению ответа этой клетки на ЛПС I . Важную роль в распознавании ЛПС i viv играет гликопротеин с молекулярной массой кД, описанный как ЛПСсвязывающий протеин ii ii i i . Данный гликопротеин является белком острой фазы и синтезируется в печени связывается с липидом А ЛПС и образует комплекс, который может быть в 1 ООО раз более активным, чем свободный ЛПС i . В норме уровень в сыворотке кролика находится в интервале от менее, чем 0. В сыворотке человека в острой фазе воспалительной реакции уровень составляет 0 vi . Основной функцией является опосредование взаимодействия ЛПС со специфическими мембранными рецепторами клеток миелоидного ряда i В. Комплекс ЛПС и усиливает примирующее действие ЛПС на гранулоциты. Установлено, что значительно повышает чувствительность лейкоцитов к субнанограммным концентрациям ЛПС . Кроме того, появились сообщения, что в комплексе с липопротеидами обладает способностью нейтрализовать ЛПС i viv М. М .