Индукция апоптоза в анеуплоидных клетках

• Автор: Александрова, Екатерина Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 191 с. : ил.

содержание
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Апоптоз

Понятие апоптоза

Функции апоптоза

Модели изучения апоптоза

Морфология, биохимия и генетика апоптоза

Индукция апоптоза

Внутриклеточное развитие программы апоптоза

Завершение апоптоза

Защита от ПКС
Некроз и апоптоз
Циклогексимид
Анеуплоидия
Получение анеуплоидных клеток
Многополюсные митозы и анеуплоидные клетки
Распространенность в природе
Анеуплоидия и апоптоз
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Культивирование клеток
Индукция апоптоза
Выявление апоптотических клеток
Получение патологических митозов
Электронная микроскопия
Иммунофлуоресцентные исследования
Постановка экспериментов
Статистика

РЕЗУЛЬТАТЫ
ЦГИ индуцирует апоптоз и блокирует пролиферацию
СПЭВ
Морфологические изменения клеток при действии ЦГИ
СПЭВ
Ультраструктура апоптотических клеток РАР СПЭВ
Изменения митохондрий в культуре СПЭВ Действие колцемида
Накопление Кмитозов
СПЭВ
Получение МНОГОПОЛЮСНЫХ митозов
СПЭВ
Прижизненные наблюдения за клетками, возникшими путем многополюсного митоза Контроль 1 Контроль 2 Опыт ОБСУЖДЕНИЕ
ЦГИ индуцирует апоптоз и блокирует пролиферацию Морфологические изменения клеток при действии ЦГИ Ультраструктура апоптотических клеток СПЭВ РАР
Действие колцемида
Накопление Кмитозов
Получение МНОГОПОЛЮС1П1Х МИТОЗОВ
Прижизненные наблюдения за клетками, возникшими путем многополюсного митоза
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Активация проэнзима протеолитичсский процессинг, сопровождающийся ассоциацией большой и малой субчастиц в гетеродимер. Показано по крайней мере на двух каспазах каспазе1 и каспазе3, что гетеродимеры образуют тетрамер с двумя каталитическими центрами, действующими независимо . i . Функционально каспазы бывают эффекторными каспазы3,6,7,, и инициаторными каспазы1,2,4,5,8,9,. Инициаторные каспазы являются передатчиками апоптотического сигнала и активаторами эффекторных каспаз. Причем различные инициаторные каспазы участвуют в различных сигнальных путях. Например, каспаза8 связана с запуском апоптоза через рецепторы смерти i, ixi, . А каспаза9 вовлечена в митохондриальный путь. Эффекторные каспазы, повидимому, одни и те же во всех случаях. Для активации инициаторных каспаз необходимо их связывание со специфическими кофакторами для каспазы8, 1 и АТФ для каспазы9. После того, как проапоптотический сигнал активирует инициаторную каспазу, она в свою очередь активирует эффекторную каспазу, что завершается в итоге разрушением клетки. ДНК, конденсация хроматина, распад цитоплазматических компонентов, блсббинг клеточной мембраны , i, . Полагают, что во всех этих изменениях прямо или косвенно участвуют каспазы. Мишенями каспаз являются белка структурные белки, сигнальные белки, белкирегуляторы транскрипции, трансляции, репарации и др. i . i . X, vi, . Гибнущая путем апоптоза клетка в итоге распадается на апоптотические тельца, содержащие остатки оргапелл и окруженные плазматической мембраной, так что цитоплазматический материал не попадает в межклеточное пространство и не вызывает повреждений соседних структур. Апоптотические тельца впоследствии поглощаются другими клетками организма ii . Большую роль при этом играют поверхностные изменения, происходящие с апоптотической клеткой, ведущие в итоге к узнаванию и уничтожению гибнущих клеток макрофагами. Уже на начальных этапах ПКС клетка отделяется от субстрата и соседних клеток, округляется, утрачивает специализированные поверхностные структуры и начинает производить специальные наружные маркеры. Один из них аРз витронекгиновый рецептор способен взаимодействовать с СОЗблигандом на макрофаге i . i . Еще один способ сигнализирования для макрофага карбогидратлектиновые взаимодействия i . ii . Кроме того, фагоцитирующие клетки могут узнавать апоптотические клетки по изменившемуся липидному составу на наружной стороне плазматической мембраны. Алберте и др. Такая асимметрия поддерживается АТФзависимыми ферментами, которые связывают фосфатидилсерин с цитоскелетными белками клетки и исправляют неверную встройку липидов. Апоптоз сопровождается потерей этой асимметрии. Фосфатидилсерин начинает встраиваться в наружную часть бислоя . i . В утилизации апоптотических клеток могут участвовать не только профессиональные макрофаги . . В лабораторных условиях остановить программу гибели можно, используя ингибиторы каспаз V. . i . В некоторых случаях блокаторы транскрипции и белкового синтеза также останавливают ПКС, подтверждая, что в определшшх видах апоптоза необходим синтез v белка и РНК . Но помимо этих искусственных агентов, известны и физиологические блокаторы ПКС. Иначе бесконтрольный апоптоз в различных органах мог бы нанести серьзный вред организму. У . ПКС является белок 9 . Механизм действия 9 установлен Vx, . Он ингибирует белок 4, который, хотя и не принимает активного участия в апоптозе, но является активатором другого белка 3, а это уже основной эффектор в ПКС у . i, vi, . У млекопитающих известен гомолог 9 белок Вс12 . , vi, . Более того, существует целое семейство 2родственных белков , x , Вах, Вак и другие i . i .