Механизмы модулирования медленных натриевых каналов (Nav1.8) сердечными гликозидами и производными гамма-пиридонов

• Автор: Шелых, Татьяна Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 141 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. ПОТЕНЦИАЛОЗАВИСИМЫЕ НАТРИЕВЫЕ КАНАЛЫ

1.2. ПОТЕНЦИАЛОЗАВИСИМЫЕ НАТРИЕВЫЕ КАНАЛЫ Иау1.8

1.3. Ыа,КАТФаза

1.4. СЕРДЕЧНЫЕ ГЛИКОЗИДЫ.

ОУАБАИН СПЕЦИФИЧЕСКИЙ ЛИГАНД Иа, КАТФазы.

1.5. уПИРИДОНЫ

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МЕТОД КРАТКОСРОЧНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ДИССОЦИИРОВАННЫХ СЕНСОРНЫХ НЕЙРОНОВ

2.2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ РАСТВОРЫ
2.3. РЕГИСТРАЦИЯ ИОННЫХ ТОКОВ И УПРАВЛЕНИЕ ПРОГРАММОЙ ЭКСПЕРИМЕНТА.
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ 51ИДРОКСИ2ГИДРОКСИМЕТИЛ уПИРИДОНА И 5ГИДРОКСИ1 МЕТИЛуПИРИДОН2КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ НА МЕДЛЕННЫЕ НАТРИЕВЫЕ КАНАЛЫ
3.2. ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ СЕРДЕЧНЫХ ГЛИКОЗИДОВ НА МЕДЛЕННЫЕ НАТРИЕВЫЕ КАНАЛЫ
3.2.1. ДЕЙСТВИЕ ОУАБАИНА.
3.2.2. ЭФФЕКТ ОУАБАГЕНИНА
3.2.3. ДЕЙСТВИЕ ДИГОКСИНА
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ
4.1. МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ уПИРИДОНОВ
4.2. МЕХАНИЗМЫ ДЕЙСТВИЯ СЕРДЕЧНЫХ ГЛИКОЗИДОВ.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ
ДИССЕРТАЦИИ.
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Учитывая тот факт, что специфическое рецепторопосредованное или трансдукторопосредованное модулирование характеристик медленных натриевых каналов остается малоизученным, можно предположить, что результаты, полученные в этой области, окажутся востребованными при разработке новых фармакологических подходов к решению проблемы хронической периферической боли , . Целью работы было исследование механизма системы мембранной сигнализации опиоидоподобный рецептор ,КАТФаза медленные натриевые каналы v1. Выяснить возможные молекулярные механизмы действия упиридонов на медленные натриевые каналы v . Изучить возможные механизмы воздействия ряда представителей сердечных гликозидов на модулирование возбудимости медленных натриевых каналов v1. С помощью метода локальной фиксации потенциала получены доказательства, свидетельствующие о рецепторопосредованном действии упиридонов на мембрану сенсорного нейрона. v . КАТФазы присутствует еще один сайт, специфическое связывание гликозидов с которым модулирует трансдукторную функцию ,КчАТФазы. Научная новизна. Впервые было показано, что 5гидрокси2гидроксиметилупиридон АК1 и 5гидрокси1метилупиридон2карбоновая кислота АК2 способны уменьшать потенциалочувствительность натриевых каналов у1. Ыа,КАТФазы оуабаина в концентрации 0 мкмольл. Это свидетельствует о возможном участии опиодоподобных рецепторов в специфическом связывании этих сигнальных молекул и также подтверждает важную роль Ыа,КАТФазы в процессе передачи ноцицептивного сигнала на активационное воротное устройство Кау1. Нами впервые было показано, что приложение оуабаина в низких эндогенных концентрациях способно модулировать возбудимость медленных натриевых каналов у1. Указанный эффект не устранялся при предварительном приложении в наружный раствор блокатора опиоидных рецепторов налтрексона в концентрации мкмольл. В данном случае, вероятно, мишенью атакующей молекулы служит дополнительный сайт связывания оуабаина, являющийся частью аминокислотной последовательности молекулы Ыа,КАТФазы. АТФазы, что должно приводить, в свою очередь, к аналгетическому эффекту на системном уровне. Теоретическое и практическое значение работы. Полученные данные представляются важными для понимания молекулярных механизмов действия упиридонов и сердечных гликозидов на мембрану сенсорных нейронов. Результаты и выводы работы моуг быть использованы для чтения учебных курсов но молекулярной биологии и нейробиологии, а также в медицине и фармакологии при создании новых аналитических лекарственных препаратов. Апробация работы. СевероЗападного региона СанктПетербург, , Всероссийском форуме студентов, аспирантов и молодых ученых Наука и инновации в технических университетах СанктПетербург, , конференции Механизмы регуляции и взаимодействия физиологических систем организма человека и животных в процессах приспособления к условиям среды СанктПетербург Колтуши, , конференции с международным участием Нейрохимические механизмы формирования адаптивных и патофизиологических состояний мозга СанктПетербург Колтуши, , 2ой СанктПетербургской конференции фонда А. Гумбольдта Технологии го века биологические, физические, информационные и социальные аспекты СанктПетербург, . Глава 1. Потенциалозависимые натриевые каналы играют ведущую роль в генерации и проведении потенциалов действия в различных типах возбудимых клеток, в том числе в нервных, мышечных и нейроэндокринных клетках. С помощью клонирования, а также электрофизиологических и биохимических методов были идентифицированы разнообразные натриевые каналы. В отличие от различных классов калиевых и кальциевых каналов функциональные свойства натриевых каналов похожи. Натриевый канал представляет собой трансмембранный белок. В его состав входит высокопроцессионная а субъединица 0 кДа, которая связана со вспомогательными 3 субъединицами , . Натриевые каналы в центральной нервной системе и сердце содержат i р4 субъединицы, тогда как в скелетной мышце в их структуре присутствует только i I, . Формирующая пору а субъединица необходима и достаточна для функциональной экспрессии, но кинетика и потенциалозависимость воротного устройства канала определяются Р субъединицами.