Влияние трансгенеза на неопластический рост и количественные полигенные признаки у мышей

• Автор: Гинкул, Любовь Борисовна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 156 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Фенотипические изменения у трансгенных мышей 9 в эмбриогенезе и в перинатальном периоде

1.2. Неопластические изменения у трансгенных мышей

1.2.1. Канцерогенез у трансгенных мышей с генами семейства туе

1.2.2. Опухоли разного гистогенеза у трансгенных мышей

1.2.3. Динамика кащерогснсза в ряду поколений трансгенных мышей

1.3. Гомологичная рекомбинация

1.4. Трансгениые мыши с автономно реплицирующимися трансгенами

1.5. Изучение количественных полигенных признаков у трансгенных
1.5.1. Изучение ростовесоных параметров у трансгенных мышей
1.5.1.1. Изменения веса тела у трансгенных мышей
1.5.1.2. Изменения роста у транс генных мышей
1.6. Наследуемость количественных полигенных признаков
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
2.1. Получение трансгенных мышей
2.2. Микроинъекции плазмид в одноклеточные эмбрионы
2.3. Выявление трансгенных мышей
2.4. Изучение неопластического роста у трансгенных мышей
Катус Гзр4
2.5. Выявление гомологичной рекомбинации ДНК в геноме трансгенных
мышей пео
2.6. Изучение количественных полигенных признаков у трансгенных
2.7. Изучение наследуемости количественных полигенных признаков
у трансгенных мышей
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Нарушения нормального эмбриогенеза у трансгенных мышей катус
3.1. Гиперпластические и неопластические изменения у трансгенных
мышей 34
3.3. Изучение гомологичной рекомбинации ДНК в геноме трансгенных мышей пео
3.4. Изучение количественных полигенных признаков у
трансгенных мышей
3.4.1. Количественные полигонные признаки у трансгенных
мышей 3
3.4.2. Количественные полигенные признаки у трансгенных
мышей пео
3.4.3. Количественные полигенные признаки у трансгенных
мышей
3.5. Наел еду см ость количественных полигенных признаков у
трансгенных мышей
4. ОБСУЖДЕНИЕ
5. ВЫВОДЫ
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Список используемых сокращений
дов. инт. доверительный интервал МТ металлотионеин нед неделя
НТМ нетрансгенные мыши мес месяц сут сутки
V коэффициент вариации ТМ трансгенные мыши
ТМ трансгенные мыши с автономно реплицирующимся веюором
ТМ шус трансгенные мыши с геном
ТМ псо трансгенные мьпии с геном
аминогликозидфосфорибозилтрансферазы
диметилсульфоксид
I инсулиноподобный фактор роста
длинный концевой повтор
V вирус опухоли молочной железы мыши
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Трансгенные самки, экспрессирующие ген гормона роста, могут служить многообещающей генетической моделью для экспериментов по изучению влияния материнского организма с нарушением функционирования поджелудочной железы и других желез, зависимых от гипофизарной активности, на проявление или усиление эмбриотоксического эффекта различных экзогенных факторов, а также коррекции этих эффектов. Онкологические и вирусологические исследования, проводимые на ТМ с вирусными онкогенами, позволили выявить важную роль вирусных онкогонов в злокачественной трансформации клеток. Множество интересных моделей изучения онкогенеза в различных органах и тканях было создано при использовании ТМ, в геном которых были введены различные клеточные и вирусные онкогены под регуляцией различных промоторов. Работы на ТМ с активированными онкогенами позволили выяснить связи между отдельными этапами онухолсобразования пролиферации, апоптоза, ангиогенеза и мстастазирования и функционирования этих генов , , . Литература по данной проблеме настолько обширна, что мы вынуждены ограничить себя рассмотрением литературных данных, касающихся тех задач, которые были поставлены в настоящей работе. ТМ с v были получены Смолом с соавторами . В этой работе ген туе вируса миелоцитоза птиц МС был слит с геном Тантигена вируса V . Была исследована одна мышь с папилломой сосудистого сплетения мозга, что характерно для ТМ с Тантигеном V . У с геном серинтреониновой киназы i1 и Ер трансген экспрессировался как в В, так и в Тклстках, но лимфомы имели только Тклсточное происхождение V . У гибридов Еxi с мышами Ер или туе развивались прсВклеточные лейкемии. Как показало проведенное исследование, в опухолях дважды трансгениых мышей экспрессия или туе трансгснов достигала высокого уровня, в то время как экспрессия эндогенных или стус генов не выявлялась, что указывает на участие именно трансгенов в процессе опухолеобразования у этих мышей. Высокозлокачественные лимфомы из преВлимфоцитов, зрелых Влимфоцитов и их промежуточных форм были обнаружены у ТМ с генами стус человека или мыши и энхансером тяжелой цепи иммуноглобулина р x . Изучение экспрессии трансгсна показало, что она начинается задолго до появления опухолей у мышей. Исследование перестроек иммуноглобулина в клетках злокачественной лимфомы позволило авторам сделать вывод о том, что несмотря на значительную пролиферацию и блокирование дифференцировки клеток, опухоли имели моноклональное происхождение. Для того, чтобы выявить гены, которые вносят вклад в образование лимфом, ТМ с геном стус под регуляцией его проксимального промотора и энхансера Ер были инфицированы вирусом мышиной лейкемии Молони i . У ТМопухоленосителей образовались Вклеточные лимфомы, у остальных Тклсточные. Анализ мест провирусной инсерции позволил обнаружить, что ряд лимфом несут провирусную инсерцию в промоторной области Е2а. Фактор транскрипции Е2а играет важную роль в развитии как В, так и Тлимфоцитов и, к тому же, ген Е2а обладает супрессорной опухолевой активностью, поскольку у мышей, нокаутных по Е2а, образуются Тклеточные лимфомы. Образование гибридной мРНК вирусЕ2а привело к увеличению содержания Е2а белка. Первичный онкогенный эффект Е2а, вероятно, связан с усилением транскрипции сшус трансгена посредством связывания Е2а с регуляторными иммуноглобулиновыми энханссрами. В лимфомах не была обнаружена эндогенная сшус мРНК. Результаты этого исследования привели авторов к заключению, что повышенная экспрессия Е2а вносит вклад в образование Тклеточных лимфом. Это означает, что Е2а обладает не только супрессорной, но и онкогенной активностью. Тклсточныс лимфомы наблюдались у ТМ с двумя транс генам и i2 и стус . . При скрещивании и i2 было получено потомство, в котором были выявлены также прсВ или Влимфомы. В тимусах мьппейопухоленосителей была утрачена кортикомедуллярная структура. По перестройкам, выявленным в рецепторах Некоторые мыши умирали от лейкемии на 34ой неделе.