Белки, связывающие тандемные повторы, и их участие в трехмерной организации хроматина

• Автор: Подгорная, Ольга Игоревна
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 173 с. : ил

Одной из первых гипотез о возможной структуре хромосом в интерфазном ядре была гипотеза Рабля , . Важнейшая часть ядра его оболочка. Вопрос о том, прикрепляются ли теломеры к ядерной оболочке, не получил однозначного решения за 0 лет существования модели. Попытки определить положение теломер в трехмерной структуре интерфазного хроматина предпринимаются постоянно. Результаты можно разделить на две основные группы случайное и неслучайное распределение. По мнению ряда исследователей, теломеры хромосом мыши распределены по всему объему ядра и не связаны с какойлибо специальной структурой, подобной ядерной оболочке. В культивируемых нервных клетках мыши ii, , и интерфазных лимфоцитах мыши ii, i, распределение теломер признано случайным. Проанализировано положение теломер в культуре эмбриональных фибробластов и показано их случайное распределение в ядре . С другой стороны, не меньше данных о том, что хромосомы в интерфазном ядре занимают определенные территории ii, , , i . Более детальное изучение синхронизированной культуры лимфоцитов мыши показало наличие закономерных, связанных со стадией клеточного цикла, колебаний локализации Тел, смысл которых еще не ясен V . В лимфоцитах человека теломеры тяготеют к центру ядра на стадии 1 и к периферии на сталии 2 , , . Следовательно, в нормальных дифференцированных свободноживущих клетках расположение теломер трудно считать абсолютно случайным. В соматических клетках животных и клетках культуры также часто наблюдают пары теломер и их кластеризацию i . В клетках слюнных желез дрозофилы хромосомы расположены в соответствии с модслью . То же справедливо для эмбриональных клеток при асфиксии , , i . В клетках дрожжей теломеры кластеризуются и расположены по периферии ядра у ядерной оболочки i . Недавно, с помощью флуоресцентной гибридизации i i I и конфокальной лазерной микроскопии было показано, что существует вполне определенная архитектура хроматина в сперматозоидах человека . Дольник и др. Вывод, который делают из этих наблюдений. Наиболее четко выраженную архитектуру удается наблюдать в половых клетках и клетках эмбрионов ранних стадий, в некоторых полностью дифференцированных соматических клетках, т. I . Таким образом, несмотря на противоречивость имеющихся данных, безусловно, что теломеры в интерфазном ядре моут прикрепляться к его оболочке. Хорошо изученный нуклеосомный уровень организации интерфазного хроматина свидетельствует о том, что в структурировании ДНК с неизбежностью принимают участие белки. При обработке ядра нуклеазами с последующей экстракцией высокой ионной силой, ядра дают на выходе трудно растворимый белковый комплекс с сетчатой структурой, во многом напоминающий структуру интактного ядра. Эта структура получила название ядерного матрикса ЯМ, или скелета, по аналогии с цитоплазматическим цитоскелстом. Классическая процедура получения ЯМ была описана Березней , , , и в этой же статье было высказано предположении о существовании ЯМ i viv. К настоящему времени показано, что большое число ядерных процессов ассоциировано с ЯМ. Несмотря на то, что существование ЯМ i viv вызывает все больше сомнений , , , , процедура выделения ЯМ остается удобной для получения препарата, в состав которого входят белки, участвующие в организации более высоких, чем нуклеосомный, уровней хроматина. Биохимический и цитологический анализ ЯМ показал, что он является преимущественно сетью рибонуклеопротеинов, обогащенной сателлигной ДНК сатДНК и белками промежуточных филаментов Яровая, Разин, , i, , , . ЯМ состоит из трех частей ядерной пластины л амины, внутриядерного матрикса и остаточного ядрышка i , . Ядерная пластина белковая оболочка ядра, основным компонентом которой являются л амины АС, В белки группы промежуточных филаментов ПФ i , , , . Существование промежуточнофиламентной ламииы i i и i viv не подвергается сомнению , , . Известно, что во внутреннем пространстве ядра располагаются белки, способные к полимеризации в филаментноподобные структуры ламины, ядерный актин, белок , белок порового комплекса i .