Клеточная культура княжика сибирского (Atragene speciosa weinm.) in vitro

• Автор: Дорофеев, Вячеслав Юрьевич
• Шифр специальности: 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 142 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Оглавление

Список сокращений.

Введение

Актуальность проблемы

Цель и задачи исследования.

Научная новизна

Практическая значимость работы.

Положения, выносимые на защиту.

Апробация работы.

Публикации по теме диссертации.

Глава 1. Культура растений i vi продуцент физиологически активных веществ
1.1. Вторичный метаболизм клеточных культур растений семейства i vi
1.2. Тритерпеновые гликозиды
1.3. Суспензионные культуры растений продуценты биологически активных веществ
1.4. Влияние экзогенных гормонов и ростстимулирующих веществ на рост и накопление биологически активных веществ i vi
1 .4. 1. Жасмоновая кислота.
1.4.2. Брассиностероиды.
1.4.3. Гуминовые кислоты и препарат Силк
Глава 2. Материал и методы исследования
2.1. Ботаническая характеристика княжика сибирского
i i..
2.2. Фармакологическое описание i i.
2.3. Культивирование клеточных культур и оптимизация режима выращивания.
2.4. Исследования вторичных метаболитов
2.4.1. Сапонины
2.4.2. Флавоноиды
2.5. Фотосинтетические пигменты каллусиой культуры
i i.
2.6. Морфометрические исследования клеточной культуры
i i.
Глава 3. Ростовая активность каллусной и суспензинной культур i i.
3.1 Динамика роста каллусной культуры i i.
и оптимизация условий культивирования
3.2 Введение в суспензионную культу ру i i.
и его рост на модифицированных питательных средах
Глава 4. Влияние физиологически активных веществ на рост клеточных культур i i.
4.1. Жасмоновая кислота
4.2. Эпибрассинолид.
4.3. Гуминовые кислоты и препарат Силк.
Глава 5. Физиологически активные вещества каллусной и суспензионной культур i i.
5.1. Тритерпеновые гликозиды
5.2. Флавоноиды.
Заключение.
Выводы.
Список используемой литературы


Эти соединения обладают уникальным фармакологическим эффектом, будучи в суммарном состоянии, нежели действие каждого ингредиента в отдельности. Некоторые вещества могут встречаться только в данной культуре и не находятся в интактном растении. Первая культура ткани лекарственного растения была получена в году Уайтом. Это была ткань галлов барвинка розового Vi . и впервые показали, что культура ткани белены чрной i . В конце х годов за рубежом был предложен метод массового выращивания клеток и тканей в ферментрах для получения больших количеств материала. Множество работ посвящено изучению культуры тканей растений, производящих алкалоиды. Наиболее многочисленными являются работы, в которых указывается на синтез культурами тропановых алкалоидов Березнеговская Л. Н. и др. Каранова Л. С. . По данным Л. И. Слепиан г. Слепиан Л. И., Бутенко Р. Г. и др. Интересно сообщение зарубежных авторов о том, что в суспензионной культуре наперстянки шерстистой и пурпурной, а также в среде, на которой росли эти культуры, было отмечено присутствие гликозидов М. i . По более поздним данным, характерные гликозиды А, В и С в изолированной культуре не образуются, хотя синтезируются другие вещества, дающие положительную реакцию на сердечные гликозиды. Подобное явление отмечается и для культуры ткани кендыря коноплвого, в которой синтезируются те же сахара глюкоза и цимароза, что и в интактном растении, но генины отличаются Бутенко Р. Г., . Сообщается о том, что в каллусной культуре наперстянки шерстистой, полученной от семядолей на среде , были обнаружены карденолидов. А из каллусной культуры, полученной от листа карденолидов, в их числе дигитоксигенин и другие. Отечественными исследователями доказана способность образования в культуре ткани диоскореи стероидных сапонинов Бутенко Р. Г., . Кроме алкалоидов и сапонинов в культурах тканей лекарственных растений доказан биосинтез и многих других лекарственных веществ Бычкова С. В., Бутенко Р. Г., Трофимова . ., Карначук . . и др. Кунах В. А. и др. Болдырева Я. А., Величко . ., , . Установлено, что в культивируемых изолированных тканях в одних случаях продуцируются те же вещества, что и в интактных растениях, а в других близкие к таковым, часто со сходным спектром действия. Изменяя состав питательной среды и подбирая условия культивирования, можно воздействовать на синтетические способности культуры i Т. Т. Поэтому культуры тканей и клеток высших растений имеют большие возможности и для использования их в качестве источника сырья в медицинской промышленности Кунах В. А. и др. Решетняк О. В. и др. Р. Т., . Одним из богатых биологически активными метаболитами семейств, является . В данном семействе хемотаксономическим признаком можно считать присутствие в растениях алкалоидов дитерпенового ряда, а также тритерпеновых гликозидов. Широко исследуются представители данного семейства i . i . Впервые культуру i . I. vi в году методом микроразмножения от сегмента листа . Каллусная культура . содержащей 2,4Д 5 мгл и кинетин 1мгл в условиях темноты при С в течение недель. Поскольку известно, что корни А. . Были получены клеточные культуры растений i . В видах рода i проанализирован состав БАВ, включающий алкалоиды и сапонины. Для эффективной пролиферации каллусная культура может быть получена из эксплантов ткани молодых сеянцев. Листовые сегменты предпочтительнее использовались для быстрого каллусогенеза. Скорость каллусогенеза от эксплантов усиливалась добавлением в основную среду сравнительно высокой концентрации ауксина 2 4 мМ 2,4Д или ПУК Н. Р., Р. Характеристика ступени организации каллусной культуры i разнообразна от недифференцированных паренхимных клеток до организованной клеточной массы с характерными органоидами. Замечено, что источник экспланта влиял на тип организованного развития.