Изменчивость Trichoderma asperellum и отбор штаммов для создания биопрепаратов на гидролизном лигнине

• Автор: Садыкова, Вера Сергеевна
• Шифр специальности: 03.00.24
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва, Красноярск
• Количество страниц: 198 с. : ил

1 Таксономическое положение и биология рода i

1.1 Таксономическое положение рода i

1.2 Внутривидовая и популяционная изменчивость грибов рода i

1.3 Исследование популяционной структуры грибов

1.4 Виды рода i, использующиеся в мировой практике защиты растений

1.5 Взаимоотношения грибов рода i с фитопатогенами в биоценозах

1.6 Поиск и критерии отбора перспективных видов i, использующихся в различных отраслях практической деятельности
1.7 Система интегрированной защиты растений. Экологобиологические основы применения органических удобрений на основе гидролизного лигнина в сельском и лесном хозяйстве

2 Материалы и методы

2.1 Выделение и идентификация штаммов вида i

2.2 Получение моноспоровых культур грибов

2.3 Оценка нестабильности исходных и моноспоровых штаммов i
2.3.1 Оценка типов и реакций вегетативной совместимости
2.3.2. Определение антибиотической активности изолятов в отношении грибов рода i
2.4 Определение чувствительности и степени устойчивости штаммов i к фунгицидам
2.5 Культивирование грибов рода i на гидролизном лигнине
2.6 Методы определения химического состава субстратов после биодеструкции
2.7 Оценка действия внесения моноспорового штамма М.Г6 i и гидролизного лигнина на пространственное заселение ризопланы и ризосферы сеянцев
2.8 Определение влияния биопрепаратов на основе грибов рода i на биогенные процессы в почве
3 Экспериментальная часть
3.1 Гетерогенность сибирских изолятов вида i и скрининг продуктивных штаммов
3.2 Антибиотическая активность моноспоровых клонов i i в отношении возбудителей фузариозов сеянцев хвойных
3.3 Вегетативная совместимость моноспоровых штаммов i
3.4 Оценка моноспоровых и исходных штаммов i на устойчивость к фунгицидам
3.5 Исследование фенолоксидазной и антибиотической активности моноспоровых штаммов i при культивировании на гидролизном лигнине
3.6 Утилизация лигноуглеводного комплекса растительных отходов штаммами гриба i
.1 Влияние фракционного состава сырья гидролизного лигнина различной степени обработки на биодеструкцию штаммами рода i
3.7 Оценка действия гидролизного лигнина и i МГ6 на рост лиственницы сибирской
3.7.1 Колонизация ризопланы сеянцев лиственницы сибирской грибами i x, .iii и i и их влияние на выпад сеянцев ix iii .
3.8 Влияние гидролизного лигнина и i штамма МГ6 на биогенные процессы в почве
Выводы
Литература
Приложения
ВВЕДЕНИЕ


Исследование 5 изолятов этого рода секции ii и связанных с ними видов i, i, , а также типовых изолятов с использованием анализа ДНК показало, что они связаны с определенными географическими областями. Результаты анализа морфологии, культуральных признаков и состава изоферментов у изолятов . Так, Нiiii обнаружен в Северном Полушарии, Я. Американском континенте. Выявлена также обособленная группа изолятов из Китая , . Географические области встречаемости Г. Т. iivii перекрываются в значительной их части в умеренной зоне Европы и Америки. Африканские изоляты Т. Т. i , ii i . I i . V и . Колумбии описали новый вид Т. V , имеющий признаки как Т. Т. . В дальнейшем этот вид признан синонимом Т. Внутривидовые различия в проявлении биологических особенностей у видов триходермы проявляются при влиянии различных физических факторов температуры, влажности почвы и биохимического состава субстрата. Комышко, Сычев, Шкляр, , , , ,, . Анализируя внутривидовое разнообразие агрегата . М. ii , некоторые исследователи указывали на большую вариабельность изолятов из разных коллекций по культуральноморфологическим признакам, температурному оптимуму, формированию конидиеносцев и очертанию конидий, что, в конечном счете, привело к сомнению в принадлежности этих культур к одному виду , , vvi, , . Молекулярный анализ генома выявил отличия в рибосомальной РНК и I 1, I 2 ДНК участках хромосомы и позволил описать Г. Самуельсу с соавторами в году новый вид Т . Анализ изолятов i ii на основе морфологических, физиологических, и биохимических характеристик и электрофоретический анализ ферментов показал, что этот вид разбивается на четыре четких группы. Анализ рибосомальной ДНК подтвердил это деление . Согласно последовательности ДНК на основании электрофоретического изучения вида хромосом, выявили шесть четко отличающихся кариотипов. Их размер меняется от . Вегетативная совместимость изолятов коррелирует с этими кариотипами , . ДНК . ДНК, выявил две группы штаммов . Оценка генетического разнообразия изолята видов Т. Выделена группа, состоящая из наиболее агрессивных изолятов, отличающаяся сильнее всего i, . При изучении штаммов Т. ДНК I1 и I2 из 5. Особенности группы ТЬЗ от других позволили авторам предположить принадлежность изолятов к Т. Т. i ii, . Т. i, Т. Т. vii, а также сделали сравнение с другими видами и показали, что Т. Т. i и Т. На основании этого сделан вывод, что Т. Т. i. Т. vii, Г. Эти данные подтверждают точку зрения . Т. vii и Т. Изменчивость грибов является серьезным препятствием при использовании штаммов в биотехнологии и разработке биометода. Многие активные штаммыпродуценты и культуры грибов при неблагоприятных условиях хранения и культивирования теряют свои свойства, приближаясь к дикому типу, и вытесняются низкопродуктивными формами. Популяции грибов представляют собой мозаику клонов, биологические особенности которых определяют эволюционное развитие, доминирование или элиминацию некоторых из них, что в итоге определяет характеристику вида, процессы внутривидового разнообразия и нового формообразования. Одним из механизмов перегруппировки или обособления клонов в популяциях грибов являются типы половой и вегетативной совместимости, выявленные у представителей из разных таксонов Портенко, Дьяков, Долгова, . Индивидуумы, имеющие общие гены вегетативной совместимости, способны к генетическим обменам и образуют вегетативно совместимые viv iii v группы, эволюционирующие и при бесполой фазе развития независимо друг от друга, что обеспечивает внутрипопуляционную и внутривидовую дивергенцию отдельных клонов. Природные популяции представляют собой мозаики генетически изолированных в вегетативной фазе клонов, индивидуальность которых часто обеспечивается вегетативной несовместимостью неспособностью формировать гетсрокарионы вследствие отсутствия анастомозов, гибели слившихся клеток или элиминации одного типа ядер из смешанной цитоплазмы Дьяков, . Явление вегетативной совместимости детально изучали у многих фитопатогенных видов грибов, представляющих хозяйственную значимость Васин, Дьяков, Долгова, Дьяков, Лихачев, Максимова и др, Шарикадзе, .