Исследование внутривидового полиморфизма штаммов Ganoderma lucidum (W. Curtis: Fr.) P. Karst.

• Автор: Постнова, Евгения Леонидовна
• Шифр специальности: 03.00.24
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 с. : ил.

Оглавление
Введение

Обзор литературы

Вид i . i. . .

Систематическое положение

Медицинское применение

Методы культивирования i

Морфологическое описание

Таксономия и номенклатура

Особенности вегетативной мицелиальной стадии штаммов . i

Генетический анализ внутривидовой структуры высших базидиомицетов

Вегетативная несовместимость
Половая несовместимость
Анализ ДНКполиморфизма
Анализ изозимных спектров
Материалы и методы
Объкты исследования
Хранение культур
Исследование морфологии мицелиальной стадии штаммов . i
Макро и микроморфология
Сканирующая электронная микроскопия
Окраска ядерного аппарата
Исследование атипичных плодовых тел . i i vi
Определение скорости роста
Культивирование
Получение споровых отпечатков
Анализ вегетативной несовместимости
Анализ половой несовместимости.
Выделение монобазидиоспоровых тесгерных штаммов и проведение
скрещиваний
анализ
Выделение ДНК
Условия амплификации
Изоферментный анализ
Кластерный анализ
Результаты и обсуждение
Исследование морфологии, условий роста вегетативной стадии
дикариотических природных изолятов . i и особенностей, связанных с плодообразованием
Получение моноспоровых изолятов из хламидоспор
Анализ скорости роста и установление температурных оптимумов и
максимумов
Исследование атипичных плодовых тел
Культивирование
Вегетативная несовместимость изолятов . i
Репродуктивная изоляция
Молекулярный и биохимический анализ штаммов . i
Заключение
Список литературы


. , объединяет внутривидовые группы, филогенетическая концепция которых до сих пор не разработана v, . Значительные трудности при описании штаммов данного вида гриба по морфологии и культуральным свойствам вызваны их высокой степенью вариабельности в зависимости от условий культивирования , i, . Представители данной группы грибов являются объектом пристального внимания многих исследователей. Прежде всего, это связано с поиском биологически активных веществ, нашедших широкое применение в медицине и фармакологии. i безусловный лидер среди целебных грибов Востока. В Китае тысячи лег его эффективно используют для лечения различных заболеваний , , i, . В нашей стране также предпринимаются попытки создания биологически активных добавок на основе базидиом и мицелия, полученного методом погруженного культивирования Краснопольская с соавт. Автономова, . Использование агарикоидных базидиомицетов в масштабах промышленного культивирования подразумевает строгий биологический контроль материала. Однако многие авторы отмечают, что большой процент штаммов, применяемых в народной медицине стран Азии и Востока и описанных как . . , . Высокая гетерогенность комплексного вида . v , . , . . i с использованием маркеров рДНК позволил выделить несколько внутривидовых групп . . i x , . . i x v, . Однако отсутствие корреляции между филогенией по рДНК и разделением комплекса . Исследовать штаммы комплексного вида i с использованием различных подходов и выявить признаки, значимые для характеристики внутривидовых групп. Изучить морфологию вегетативной стадии штаммов . Исследовать способность штаммов . Провести анализ вегетативной несовместимости и репродуктивной изоляции штаммов . Изучить изоферментный и полиморфизм штаммов . Оценить значимость использованных методов для характеристики внутривидовых групп . Впервые проведен детальный сравнительный анализ внутривидового разнообразия штаммов . Показано, что культуральноморфологические признаки штаммов . Использованный в анализе набор праймеров подтвердил правомочность выделения интерстерильных групп внутри вида . С помощью маркеров впервые был выявлен ДНКфрагмент, специфичный для вида . Показано, что модификация субстрата для культивирования . Полученные в настоящем исследовании результаты важны для понимания внутривидовой структуры комплексного вида . Поскольку использованные в данной работе штаммы . Краснопольская с соавт. Автономова, , выяснение внутривидового статуса данных штаммов . Обнаружена и исследована способность некоторых штаммов к образованию атипичных плодовых тел, формирующих жизнеспособные базидиоспоры. Петри имеет немаловажное прикладное значение. Предложен состав субстрата, позволяющий сократить сроки плодообразования. С. i. Результаты исследований были доложены на конференциях конференция, посвященная летию кафедры микологии и альгологии МГУ имени М. В.Ломоносова Москва, Юбилейная конференция, посвященная 0летию со дня рождения М. В. Горленко Москва, Современная микология в России Второй съезд микологов России Москва, на заседаниях кафедры микологии и альгологии МГУ имени М. В.Ломоносова. По теме диссертации опубликовано семь работ, из них 2 в журналах, рекомендованных ВАК. Работа выполнена на кафедре микологии и альгологии биологического факультета Московского государственного университета имени М. В. Ломоносова. Автор выражает искреннюю благодарность научному руководителю к. Инсаровой И. Д. за внимание и общее руководство работой. Сотрудникам кафедры микологии и альгологии к. Сколотневой Е. С. за помощь, оказанную при проведении ИАРОанализа, н. Завьяловой Л. А. и д. Камзолкиной О. В. за помощь и советы в работе, Гололобовой М. А, Ворониной Е. Ю. Глубокая признательность всему коллективу кафедры микологии и альгологии за постоянную поддержку и внимание.