Сравнительная характеристика природных и клинических изолятов Cruptococcus neoformans

• Автор: Босак, Илья Алексеевич
• Шифр специальности: 03.00.24
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 129 с. : 22 ил.

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. Возбудители криптококкоза. Естественные экониши криптококков.

1.1 История открытия и таксономия возбудителей криптококкоза

1.2. Ссротипы и молекулярные типы С. и С. ii

1.3. Основные клинические варианты криптококкоза и факторы риска

1.4. Экологические ниши С. и С. ii

1.5. Методы выделения С. и С. ii из окружающей среды Глава II. Морфобиологические особенности клинических и природных нзолятов С.

2.1. Морфология и ультраструктура

2.2. Факторы патогенности С.

2.3. Вирулентность изолятов С. на экспериментальных

моделях
2.4. Чувствительность к аитимикотическим препаратам
2.5. Ассоциативные взаимодействия С.
с другими микроорганизмами
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава III. Объекты и методы исследования
3.1 Объекты исследования
3.2 Методы исследования
3.2.1 Среды для выделения криптококков из окружающей среды
3.2.2 Морфология культур С.
3.2.3 Исследование ультраструктуры
3.2.4 Ассоциативные взаимодействия С. с другими микромицетами и бактериями i vi
3.2.4.1 Ассоциативные взаимодействия С. с другими грибами i vi
3.2.4.2 Ассоциативные взаимодействия С.
с бактериями i vi
3.2.5 Ассимиляция источников углерода и азота культурами криптококков
3.2.6 Изучение патогенности криптококков в опытах
на лабораторных животных
3.2.7 Способность клеток С. расти при
повышенных температурах
3.2.8 Определение уреазной активности
3.2.9 Определение фенолоксидазной активности.
3.2. Определение внеклеточной фосфолипазной активности
3.2. Изучение молекулярногенетического профиля природных и клинических изолятов С. методом анализа
3.2. Исследование чувствительности криптококков к флуконазолу и вориконазолу
3.3 Статистическая обработка результатов
Глава IV МОРФОЛОГОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА КРИПТОКОККОВ
4.1 Результаты микологического исследования биопроб из объектов окружающей среды
4.2 Изучение ассоциативных взаимодействий природных изолятов С. другими микроорганизмами
4.2.1 Ассоциативные взаимодействия С. с другими микромицетами i vi
4.2.2 Ассоциативные взаимодействия С. с
бактериями i vi
4.3 Происхождение клинических штаммов криптококков
4.4 Морфологическая характеристика культур природных и клинических изолятов С. , выращенных на агаре Сабуро
4.5 Ультраструктура клеток природных изолятов и штамма С. , выращенных i vi
4.5.1 Размеры и форма клеток
4.5.2 Ультраструктура дифференцирующихся клеток
4.5.3 Ультраструктура стенки и капсулы зрелых клеток изолятов
С.
4.6 Ассимиляция различных источников углерода и азота
4.7 Определение патогенности криптококков при внутривенном введении мышам Глава V. ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ С.
5.1 Исследование способности к росту при повышенных температурах
5.2 Уреазная активность природных и клинических изолятов
С.
5.3 Образование меланина природными и клиническими изолятами
С.
5.4 Фосфолипазная активность природных и клинических изолятов
С. пеоогтеш
5.5 Исследование молекулярногенетического профиля культур природных
и клинических изолятов С. пеоогтат методом ЯАРЭ анализа
5.6 Чувствительность изолятов криптококков к флуконазолу
и вориконазолу
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


В постановке и решении конкретных задач, организации и выполнении экспериментальных исследований автору принадлежит ведущая роль. Доля участия автора в сборе проб из окружающей среды и выделении штаммов криптококков 0 в разработке и исполнении программ разделов исследований доля участия в обработке данных 0 в анализе и обобщении экспериментального материала 0. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 1 странице машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, результатов работы и их обсуждения, выводов и списка литературы, содержащего 6 источников, и приложений. Текст диссертации иллюстрирован таблицами, 3 схемами, рисунками и микрофотографиями. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Глава I. Возбудители криптококкоза. О. и . Германии, которые обнаружили аналогичные дрожжи у пациентки с саркомоподобным поражением большеберцовой кости , . Однако свое настоящее название возбудитель получил в году благодаря исследованиям ботаника и миколога Ж. П. Вийемина Vii. X. Л. Фротингем в году описал заболевание лгких у лошади в США, при котором возбудителем был тот же организм. Таким образом, уже в начазе XX века было известно, что С. Для С. Заболевание, вызванное этим дрожжеподобным грибом, называли торулозом, европейским бластомикозом и торулозньш менингитом. В г. Лоддер и Крегер ваи РиЙ включили криптококк в определитель дрожжевых организмов как С. Это название стало общепризнанным в мире и используется в научной, и медицинской литературе по сей день. В году Гатти, в Заире, из ликвора ребенкаафриканца был выделен новую разновидность возбудителя криптококкоза, который в году, Ванбрезгемом и Такашио был определен как С. Долгое время . Н.П. Блинов, . Переворот в представлениях о систематическом положении возбудителя криптококкоза совершила открыв в году половой способ размножения криптококков. Таким образом, гриб занял место среди базидиомицетовых грибов iii . В году она же, показала наличие двух вариантов . В настоящее время оба представителя патогенных крипгококков, . Серотипы и молекулярные типы . В году Е. Е. v определил три серотипа А, В и С свойственных для . Четвертый, серотип , был добавлен спустя лет после открытия Уилсоном и Беннеттом различий в антигенной структуре полисахаридной капсулы криптококков 9. Исторически значимый штамм . Буссе, оказался криптококком серотипа А самым распространенным в мире, в то время как гриб Санфеличе был отнесен к серотипу , впоследствии часто выявляемый в Италии и Франции , . Серотип был предложен в году Д. Е. Уилсоном, Дж. Е. Беннеттом и Дж. У. Бэйли, поскольку некоторые штаммы . А, и , . В настоящее время С. А выделен в самостоятельный v. Серотипы В и С относят к самостоятельному виду . С . Благодаря работе большого числа исследователей и применению молекулярногенетических методов, таких как ДНК гибридизация, определение содержания Г Ц Моль в ДНК, оценка ДНКотпечатков ДНКiii, видоспецифическая ПЦРамплификация, анализ определение полиморфизма длины рестриктов, анализ случайно амплифицированных полиморфных фрагментов ДНК, метод мультилокусного секвенирования , мультилокусный ферментный электрофорез и др. С. VI серотип v. VII серотип А v. VI серотип гибрид между v. VIV серотип v. V1, VII, VI1I и VIV соответствующие серотипам В и С . Международная рабочая группа по изучению . Указанная выше номенклатура VI V1V и VI V1V предложена для основных генотипов. Стандартные штаммы для основного генотипа хранятся в коллекциях АТСС, , . Выбраны 7 генов для секвенирования САР , 1, 1, 1, 1, I 5 и 1регион как часть стандартной схемы. В настоящее время найдены генотипические вариации для различных гаплоидных типов. Эти типы принято обозначать как 1 1 1 1 1 5 . Первый консенсус по мультилокусному секвенированию опубликован в году. Штаммы С. VI встречаются во всем мире и наиболее часто вызывают заболевания у представителей всех групп риска. Штаммы серотнла VV встречались чаще в отдельных регионах Европы их обнаруживали во Франции , в Италии и в Дании. До недавнего времени штаммы С. США 3, 0, 9.