Факторы патогенности Cryptococcus Neoformans и их роль в патогенезе криптококкоза

• Автор: Васильева, Наталья Всеволодовна
• Шифр специальности: 03.00.24
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 340 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. Морфологобиологические особенности рода Сгурососсив

1.1. Род Сгурсоссив .

1.2. Ультраструктура клеток С. пеоКэгтапв

1.3. Молекулярногенетическая характеристика

Сгурсоссив пеогтапв

Глава II. Патогенность криптококков

2.1. Базовые характеристики патогенных свойств криптококков.

2.2. Ассоциативные взаимодействия С. пеогтапв с другими микроорганизмами.

2.3. Современные представления о патогенезе криптококкоза.
2.4. Факторы патогенности криптококков
2.4.1. Капсула
2.4.2. Уреаза.
2.4.3. Лакказа и меланиногенез
2.4.4. Фосфолипаза
2.4.5. Типы спаривания
2.4.6. Рост при повышенных температурах.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава III. Объекты и методы исследования.
3.1. Объекты исследования
3.2. Методы исследования
3.2.1. Морфологические характеристики изолятов
С. пеогтапэ
3.2.2. Изучение патогенности криптококков в опытах на
лабораторных животных.
3.2.3. Сравнительная ультраструктура клеток криптококков
3.2.4. Способность клеток С. пеогтапэ расти при
повышенных температурах.
3.2.5. Ассимиляция источников углерода и азота тесткультурами криптококков
3.2.6. Ферментативная активность криптококков фосфолипазная, уреазная, фенолоксидазная
3.2.7. Исследование чувствительности криптококков
к флуконазолу и вориконазолу.
3.2.8. Молекулярногенетическая характеристика
С.
3.2.9. Особенности патоморфогенеза криптококкоза.
3.2.9.1. Патоморфогенез криптококкоза у человека
3.2.9.2. Патоморфогенез экспериментального криптококкоза головного мозга и легких у белых мышей, вызванного различными
по патогенности штаммами криптококков
3.2 Иммуногистохимическое изучение локализации капсульного гетерогликана в тканях головного
мозга мышей при криптококкозе
3.2 Получение экзогликанов, образуемых С. РКПГ 9 и i ИБФМ 4.
3.2 Изучение влияния криптококковых экзогликанов на выживаемость зараженных мышей.
3.2 Ассоциативные взаимодействия С.
с другими микромицетами и бактериями i vi
3 Ассоциативные взаимодействия С. с другими грибами i vi
3 Ассоциативные взаимодействия С. с бактериями i vi.
3.3. Статистические методы.
Глава IV. Морфологобиологические свойства клинических изолятов
криптококков
4.1. Происхождение изучаемых штаммов криптококков
4.2. Морфология штаммов С. , выращенных на
питательных средах i vi.
4.3. Определение.патогенности криптококков при внутривенном введении мышам.
4.4. Ассимиляция различных источников углерода и азота
4.5. Ультраструктура клеток штаммов С. , выращенных i vi
4.6. Генетическая характеристика штаммов С. , выделенных от больных в России.
Глава V. Морфобиологические особенности С. i viv.
5.1. Патоморфология криптококкоза у человека
5.2. Экспериментальный криптококкоз.
5.2.1. Экспериментальный криптококкоз, вызванный различными по патогенности штаммами .
5.2.2. Экспериментальный криптококкоз головного мозга при внутривенном заражении мышей высоко патогенным штаммом С. .
5.2.3. Экспериментальный криптококкоз головного мозга при внутривенном заражении мышей менее патогенным штаммом С. .
5.3. Экспериментальный криптококкоз. Ультраструктура
клеток С. .
5.3.1. Ультраструктура клеточных стенок и капсул штаммов С. в легких и мозге белых мышей
через 7 дней после внутривенного заражения
5.3.2. Ультраструктура клеточной стенки и капсулы зрелых клеток С. штаммов и в мозге
белых мышей через дней после их заражения
5.4. Выявление антигена криптококка в головном мозге мышей, внутривенно зараженных различными штаммами.
Глава VI. Сравнительное изучение гомологичных экзогликанов в
экспериментах i viv
1 6.1. Влияние криптококковых экзогликанов из патогенных и
непатогенных криптококков на выживаемость мышей при экспериментальном криптококкозе
6.2. Патоморфологическое и иммуногистохимическое исследование головного мозга мышей после введения полисахаридов из патогенного и непатогенного криптококков.
6.3. Влияние криптококкового экзогликана, продуцируемого патогенным криптококком, на выживаемость мышей при экспериментальном криптококкозе
Глава VII. Факторы патогенности С. .
7.1. Рост и развитие С. при повышенных температурах.
7.2. Определение меланинообразующей способности
Ф криптококков.
7.3. Определение уреазной активности.
7.4. Определение фосфолипазной активности криптококков.
Глава VIII.Ассоциативные взаимодействия с
другими грибами и бактериями i vi
8.1. Ассоциативные взаимодействия с другими грибами i vi.
8.2. Ассоциативные взаимодействия с некоторыми бактериями i vi.
Глава IX. Чувствительность изолятов криптококков к флуконазолу и
вориконазолу.
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


У гибридных изолятов обнаружили два типа паттернов 5 и 1, паттерн, полученный из гена 5 после двойной рестрикции эндонуклеазами I и для гибридного серотипа , разделили после клонирования на 3 паттерна, при этом образцы с 6ю и с 7ю рестриктами соответствовали VIII 1. I при рестрикции v, был разделен после клонирования на два отдельных паттерна, соответствующих VI и VIV. Этим подтвержден тот факт, что этот гибридный генотип возник в результате рекомбинации между вариантами ii и , сопровождающейся образованием диплоидных и триплоидных штаммов, у которых есть две или три различных копии соответствующих генов. Об аналогичных результатах сообщили авторы после секвенирования ПЦРотпечатков, полученных для молекулярных типов V3 и V4 . В настоящее время продолжается дискуссия ученых о количестве видов и вариантов в составе комплекса . Большинство ученых склоняется к тому, что следует признать самостоятельность видов . Очевидно, что с продолжением изучения патогенных криптококков представления о роде ещ будут дополняться новыми данными, однако несомненно и то, что значение патогенных криптококков заметно возросло в течение последних двух десятилетий, особенно на фоне роста в мире числа пациентов с иммунодефицитами, в том числе ВИЧинфицированных и больных СПИД людей. ГЛАВА II. Систематики выделяют вида криптококков, хотя классификации меняются по мере накопления новых фактов. В настоящее время криптококки относят к базидиомицетовым дрожжам, у которых телеоморфная фаза развития приобретает нитчатую форму, тогда как анаморфная бесполая фаза дрожжевую почкующуюся форму 3. Из всех видов криптококков ныне известны как патогены для представителей царства АттаНа лишь Сгурсоссиэ пеоЬгтапв и С. НН. Последний был впервые описан в Австралии в г. Однако, в редких случаях, к патогенным криптококкам причисляют также С. Ыбиэ и С. IаигепШ . Не так давно мы также описали штамм С. Очевидно, можно ожидать, что в характеристики патогенных свойств криптококков будут вносить необходимые уточнения и дополнения, однако, в настоящее время, многие основные представления о факторах агрессии, патогенности и т. Мы придерживаемся следующих определений патогенность потенциальная способность микроба вызывать заболевание и приводить к возникновению повреждений в макроорганизме, а вирулентность мера патогенности. Патогенные свойства других криптококков или соответствующих микроорганизмов, включая их способность к инвазии и инфекциозности, определяются так называемыми факторами агрессии и факторами патогенности, которые представляют собой продукты обмена клеток или их структурные компоненты. Факторы агрессии или инвазии вещества, с помощью которых патоген проникает в ткани, размножается и распространяется в них. Факторы патогенности инфекциозности вещества, непосредственно индуцирующие развитие инфекционного заболевания, патоген при этом взаимодействует с макроорганизмом и приводит его к патологическому состоянию. Факторы агрессии и патогенности часто не разграничивают, поскольку первые
нередко продолжают участвовать в соответствующих патологических реакциях в ходе развития заболевания. Все факторы агрессии и патогенности можно разделить на 7 групп белки, полисахариды, гликоконьюгаты, липопротеины, фосфатиды, фосфопротеины и другие субстанции табл. Классификация факторов агрессии и патогенности. I группа Белки ферменты гидролазы, лиазы, гемолизины, токсины и токсин. VII группа Другие вва. Токсины грибов небелковой природы, свободные липиды, некоторые органические амины, ионы металлов и др. В то же время принято считать, что многие патогенные микромицеты являются лишь вторичными возбудителями микозов, поскольку грибковый патологический процесс развивается только на фоне ослабления иммунной системы макроорганизма. Что касается С. Классификация патогенных микромицетов, основанная на степени повреждения иммунного ответа макроорганизма. IV i . Ассоциативные взаимодействия С. Накопленные к настоящему времени данные о патогенных свойствах многих болезнетворных микроорганизмов не включают сведений об их ассоциациях i viv и i vi с другими микроорганизмами. Это касается и криптококков. Тем не менее, любые взаимоотношения микроорганизмов можно подразделить на два основных типа симбиотические симбиоз и антибиотические антибиоз.